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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA DE LABORATORIO CLINICO ®

ASIGNATURA: MICROBIOLOGIA I PRACTICA # 4 Ensayo de investigación basado en la práctica de laboratorio. Tema: AGAR MUELLER HINTON Realizado por: Tapia Alarcón Jacquelin Fernanda Tapia Vargas Jhoana Lisbett Tene Dayana Semestre: Tercero

cod: 35 cod: 36

cod: 37 Paralelo: “A”

Docente: Ing. Félix Falconi Período: noviembre 2020– abril 2021 Fecha de la Práctica: 14 de diciembre 2020 Fecha de entrega: 21 de diciembre 2020 Riobamba – Ecuador

Tema: Agar Mueller Hinton

Por: Tapia Jacquelin, Tapia Jhoana, Tene Dayana.

RESUMEN

“Reconocimiento de la función del Agar Mueller Hinton y los materiales necesarios en la elaboración de un medio de cultivo.” El desarrollo del tema se llevó a cabo con la creación de un video explicativo en el cual se demuestra el procedimiento de utilización del Agar Mueller Hinton, mismo que se complementó con la búsqueda de información bibliográfica sobre su fundamento teórico y su aplicación práctica. Los métodos utilizados para la explicación del tema aportaron en la obtención de conocimiento sobre los pasos y técnicas correctas de aplicación del Agar Mueller Hinton, además que permitió ampliar la información recibida por parte del docente. En conclusión, se debe conocer las técnicas y fundamento teórico en cuanto a la aplicación del Agar Mueller Hinton porque nos permite realizar de manera correcta la difusión del microorganismo de que se desea hacer el cultivo. INTRODUCCIÓN

Cada grupo de organismos necesita un medio específico en el que mejor pueda determinarse su sensibilidad a los antibióticos. El Agar Mueller Hinton disponible en varios formatos de placa se utiliza en el procedimiento de difusión en disco estandarizado, tiene como uso principal realizar los ensayos de sensibilidad y susceptibilidad de los microorganismos frente a los antibióticos como también de sulfamidas, es un medio de cultivo no selectivo y no diferencial por lo que todos los microorganismos que se cultivan ahí, crecerán exitosamente debido a su superficie. DESARROLLO

AGAR MUELLER HINTON El Performance Standar for Antimicrobial Disk Suceptibility Test” recomienda el uso del agar para la elaboración de las pruebas de susceptibilidad antimicrobiana:[ CITATION Mar161 \l 2058 ] o Muestra buena reproducibilidad lote a lote en las pruebas de sensibilidad. o Contiene bajo nivel de inhibidores de sulfonamidas, trimetoprim y tetraciclina. o Permite el desarrollo de la mayoría de los microorganismos patógenos. Existen suficientes datos recopilados que avalan la experiencia de las pruebas de sensibilidad realizadas en este medio. Dentro de su composición se encuentra: extractos de ternera, caseína, sales, cationes divalentes y almidón soluble necesario para que los resultados sean reproducibles. Se trata de un medio de cultivo no selectivo, pues permite el crecimiento de la mayor parte de los gérmenes que no necesitan condiciones exigentes, además es un medio no exento.[ CITATION Mur11 \l 2058 ] 2 Laboratorio Clínico Tercero “A”

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Tema: Agar Mueller Hinton

Por: Tapia Jacquelin, Tapia Jhoana, Tene Dayana.

El medio de cultivo debe tener las siguientes características:  Altura del agar recomendada: 3,5 a 4,5 mm.  pH del agar: 7,2 y 7,4 a temperatura ambiente.  Ausencia de humedad.  Concentración baja de timina- timidina  La concentración de calcio y magnesio recomendada por el CLSI debe estar entre 20 a 25 mg/l y 10 a 12.5mg/l respectivamente. REQUISITOS MÍNIMOS PARA LA ELABORACIÓN DEL AGAR MUELLER HINTON Reactivos: Los reactivos utilizados en la elaboración de medios de cultivo Mueller Hinton son los siguientes: Medio de cultivo: Son sustancias higroscópicas, sensibles a la humedad, el calor, y a la luz. Debe ser homogéneo, libre de flóculos. Si hay algún cambio de la apariencia física, descartar el medio. Se deben almacenar a temperatura ambiente entre 2-25ºC. Dependiendo del medio y su almacenamiento, los medios de cultivo tienen una fecha de caducidad de entre 2 y 4 años.[ CITATION Pro10 \l 2058 ] En el mercado existen los siguientes medios de cultivo:  Mueller Hinton Agar Britania.  Mueller Hinton BIO-RAD  Agar mueller-hinton oxoid BD Mueller Hinton tiene certificación ISO 9000. Agua: “Protocols for evaluating dehydrated mueller hinton agar”, recomienda que el agua utilizada en la elaboración del medio sea desionizada/ destilada. Cajas petri: Es un recipiente de cristal o plástico, cuya base es de forma circular y sus paredes tienen un 1 cm de altura; su cubierta tiene la misma forma, pero con diámetro algo mayor. La caja Petri se utiliza generalmente en los laboratorios de bacteriología, para el cultivo, aislamiento e identificación de microorganismos. Dentro de sus características: o Son fabricadas con poliestireno cristal. o Esterilizadas por radiación gamma para uso en microbiología. o Deben ser fabricados con un material resistente al calor. Se recomienda el uso de caja Petri de 150 X 25 mm de diámetro, en los cuales se deben dispensar 70 ml del agar preparado. En las cajas de 100 X 15 mm de diámetro se debe colocar de 25 a 30 ml del material preparado. ENLACE DEL VIDEO PRÁCTICO

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https://unachedumy.sharepoint.com/:v:/g/personal/jacquelin_tapia_unach_edu_ec/EUlZubDzXIlCv30qyNhFcMBciYnjCiQJYKFT0nRRotiUA?e=5czYT2 CONCLUSIONES

Se identificó que los materiales que nos permiten y colaboran en la elaboración de un medio de cultivo son: Probeta, Matraz, Balanza, Algodón, Gasas, Parilla de calentamiento, Cabina de Bioseguridad, Espatula, pero principalmente las placas de Petri, ya que permiten realizar la preparación del Agar, la siembra del microorganismo y mantenerlo aislado de factores del medio ambiente que pueden dañar su estructura. Además, con la investigación se determinó las características de los materiales de uso e identificación al momento de la preparación del Agar. Por otra parte, El Agar Mueller Hinton, la práctica permitió establecer las condiciones adecuadas del crecimiento del microorganismo, en cuanto a su susceptibilidad frente a antibióticos y las técnicas y condiciones necesarias para la preparación del Agar Mueller Hinton como: la temperatura, Tiempo de duración y volumen. BIBLIOGRAFIA

x 1. Calderon

M.

Dspace.

[Online].;

2016

[cited

2020

Diciembre

18.

Available

from:

http://www.dspace.uce.edu.ec/bitstream/25000/11415/1/T-UCE-0006-004-2016.pdf. 2. Murray P, Rosenthal K, Pfaüer M. Microbiologia médica. Quinta ed. Mercedes I, editor. Madrid: Elsevier; 2011. 3. C P. Indicaciones del uso del medio de cultivo. 2010. x

ANEXOS

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Tema: Agar Mueller Hinton

Por: Tapia Jacquelin, Tapia Jhoana, Tene Dayana.

Imagen 1. Colonias de Burkholderia pseudomallei en agar Müller-Hinton tras 72 horas de incubación. Disponible en: Agar Müller-Hinton - Wikipedia, la enciclopedia libre

Imagen 2. Placa de antibiograma con halos de inhibición alrededor de todos los discos de antibióticos. Disponible en: MUELLER HINTON AGAR (medioscultivo.com)

Imagen 3. Staphylococcus aureus Mueller Hinton agar. Disponible en: Pin em Microbiology by Antisocial_met (pinterest.com)

Imagen 4. Placa de agar mueller-hinton agar sal de manitol agar baird-parker agar, estafilococos. Disponible en: Placa de agar mueller-hinton agar sal de manitol agar baird-parker agar, estafilococos, material, industria png | PNGEgg

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