Bioquímica-Clínica-I PDF

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Bioquimica / enfermeria ...

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Bioquímica Clínica I ¿Qué es la Bioquímica Clínica? • El uso de la Bioquímica para explicar las bases de una enfermedad y/o El uso de técnicas bioquímicas para ayudar en el diagnóstico y/o pronóstico de una enfermedad El proceso de la bioquímica clínica     

Pregunta clínica Muestra biológica Análisis control de calidad Interpretación de los resultados Respuesta bioquímica ¿Qué se puede medir?

1. Concentraciones o cantidades de metabolitos, iones o gases 2. Presencia y concentraciones de proteínas Particulares 3. Actividad de enzima ¿Cómo se expresan los resultados bioquímicos? 1. Mayoritariamente de forma cuantitativa 2. Cuando se miden metabolitos se expresa su valor en concentración  molar: moles/litro  gramos/litro 3. Cuando se miden enzimas su valor se expresa: • Unidades /litro ( μ moles /min o /hora) ¿Por qué pueden variar los resultados? Hay tres tipos principales de variaciones que pueden afectar los testsy la interpretación de los resultados   

Variación Pre analítica Variación Biológica Variación Analítica

¿Dónde podemos medir?     

Sangre Orina Deposiciones LCR Desgarro

   

Saliva Semen Otros líquidos: Sinovial, pleural, ascítico, pericárdico,amniótico. Muestras sólidas Composición del plasma

Obtención: a través de la sangre total con anticoagulante y centrifugada La sangre se compone de plasma y células. El plasma corresponde al 55% de la totalidad de la sangre y el 45% restante corresponde a los elementos figurados (glóbulos rojos, glóbulos blancos y plaquetas). Composición del plasma:   

Agua 92% Proteínas Plasma 7% Otros solutos 1% Hemograma

El hemograma es un análisis de sangre en el que se mide en global y en porcentajes los tres tipos básicos de células que contiene la sangre, las denominadas tres series celulares sanguíneas: 1. Serie eritrocitaria o serie roja 2. Serie leucocitaria o serie blanca 3. Serie plaquetaria Serie roja (Eritrocitaria) Se cuantifica el número de Glóbulos rojos , el hematocrito, la hemoglobina y los índices eritrocitarios El hematocrito: mide el porcentaje de GR en el volumen total de la sangre.  

La hemoglobina: se mide su concentración en sangre. Los índices eritrocitarios proporcionan información sobre el tamaño (VCM)

la cantidad (HCM) y la concentración (CHCM) de hemoglobina de los GR. Todos estos valores varían dentro de la normalidad según la edad y el sexo. Hb

Hto

hombre 12-17 g/dl mujer 11-15 g/dl

hombre 40-52% mujer 37-47%

Serie Blanca (Leucocitaria) Está formada por los leucocitos o glóbulos blancos. Sus funciones principales son la defensa del organismo ante las infecciones y la reacción frente a sustancias extrañas. El recuento de leucocitos tiene dos componentes: 1. Número total de leucocitos en 1 mm3 de sangre (5.00010.000/mm3) 2. Fórmula leucocitaria: mide el porcentaje de cada tipo de leucocitos (Segmentados o neutrófilos, monocitos, linfocitos, eosinófilos y basófilos) El aumento del porcentaje de un tipo de leucocitos conlleva disminución en el porcentaje de otros. *Estos valores varían dentro de la normalidad según la edad*     

Neutrófilos 50-70% Linfocitos 25-40% Monocitos 2 – 8% Eosinófilos 1 – 3% Basófilos 0 – 1%

Formula Leucocitaria (Formula de Schilling)

Serie Plaquetaria

Compuesta por plaquetas o trombocitos, se relaciona con los procesos de coagulación sanguínea. En el hemograma se cuantifica el número de plaquetas y el volumen plaquetario medio (VPM). El volumen plaquetario medio proporciona información sobre el tamaño de las plaquetas. El recuento de plaquetas también varía con la edad

Proteínas Plasmáticas Funciones de las proteínas plasmáticas        

Transporte y Almacenamiento Balance de Fluidos (Agua y electrolitos) Regulación del equilibrio ácido/base Respuesta de fase aguda/Anticuerpos/Sistema inmune/complemento Construcción y reparación de tejidos Enzimas Hormonas Coagulación

Análisis de proteínas plasmáticas totales Proteínas plasmáticas totales:       

Su concentración depende de la velocidad de síntesis o degradación proteica Cambios en el volumen de distribución asociados a la hidratación del paciente Estado nutricional Funcionamiento hepático Función renal Metabolismo Afecciones como mieloma múltiple

Síntesis de proteínas:  

La síntesis de la mayor parte de las proteínas plasmáticas tiene lugar en el hígado Los linfocitos B son responsables de la síntesis de la inmunoglobulinas

Degradación o pérdida   

El catabolismo tiene lugar en distintas células (endoteliales, macrófagos, fibroblastos) Pérdida por filtración glomerular Pérdidas a través de la pared intestinal

Proteínas plasmáticas • Albúmina (60%) Contribuyente mayoritario a lapresión coloidal. Transporte de lípidos y hormonas esteroidales • Globulinas (35%) Transporte iones, hormonas, lípidos; función inmune •Fibrinógeno (4%) Componente esencial del mecanismo de coagulación (conversión a fibrina insoluble) •Proteínas reguladoras (< 1%) Proteínas plasmáticas importantes en el diagnostico clínico      

Proteínas de fase aguda Proteínas transportadoras Anti proteasas Proteínas del complemento Inmunoglobulinas Lipoproteínas Reacción de fase aguda o respuesta de fase aguda

La respuesta de fase aguda consiste en el incremento en las concentraciones plasmáticas de diversas proteínas, llamadas reactantes de fase aguda, que ocurre como parte de la respuesta inmune innata temprana a las infecciones o a formas no específicas de daño tisular. Los reactantes de fase aguda o proteínas de fase aguda son proteínas sintetizadas en su mayoría por el hígado, cuyas concentraciones plasmáticas se incrementan abruptamente después de la infección o a formas no específicas de daño tisular, como parte del

síndrome de respuesta inflamatoria sistémica (systemicinflamatory response síndrome [SIRSI]) Proteínas de fase Aguda Los niveles de ciertas proteínas en el plasma aumentan en estado inflamatorio o secundario a cierto daño tisular estas proteínas son llamadas “proteínas de fase aguda” o “reactantes de fase aguda” Reactantes de fase aguda positivos con incremento elevado (1000 veces) y cinética rápida (2-6 horas) PCR ( proteinaC reactiva ) proteina del suero amiloide A(SAA) Reactantes de fase aguda positivos con incremento moderado (2-4 veces) y cinética media (12 horas) 

α1-antiquimiotripsina

Reactantes de fase aguda positivos con incremento moderado (2 – 4 veces) y cinética lenta (3 – 4 dias)    

α 1-antitripsina α 1-glicoproteina acida Fibrinógeno Haptoglobina

Reactantes de fase aguda positivos con incremento leve (50%) y cinética lenta (3 – 4 días)  

Complemento Ceruloplasmina

Reactantes de fase aguda negativos   

Albumina Prealbumina Transferrina

Proteína C reactiva (PCR) 



La PCR es una de las proteínas mas utilizadas en el diagnostico clínico en respuesta inflamatoria o en el seguimiento de tratamientos que permitan la disminución de esta Su síntesis es inducida por daño tisular por infecciones, inflamación o neoplasia



Pertenece a una familia de proteínas pentamericas (pentraxinas) dependientes de calcio Cinética de la PCR

  

 

Concentración plasmática constante No se modifica por alimentos, no tiene ritmo circadiano La síntesis de Novo comienza a las 6 horas de iniciado el proceso inflamatorio con un máximo a las 24-72 horas. Terminado el proceso inflamatorio se demora 7 días en bajar sus niveles a la normalidad Los niveles séricos aumentan con la edad VR: 0,8 mg/dL

Proteínas en suero: Concentración de proteínas en suero: Valores de referencia

Significado Clínico: Disproteinemia o desorden en el equilibrio de Agua Bajo estas circunstancia se sugiere realizar un análisis diferencial de proteínas en suero, cuantificar la osmolaridad plasmática y determinación de V.H.S (velocidad de sedimentación) Electroforesis de proteínas totales del suero Análisis de proteínas plasmáticas por electroforesis en acetato de celulosa

Principales proteínas en las bandas de electroforesis BANDA: ALBUMINA Prealbumina (TTR, tranteritina, 54Da) 

Transporte de tiroxina y triyotironina. Proteína de fase aguda negativa

Albumina (69 kDa) 



Es la mayor proteína del plasma (50%) su principal función es el transporte de sustancias como hormonas, acidos grasos, calcio, bilirrubina y algunos fármacos Mantencion de la presión oncotica

Hipoalbuminemia:  

Consecuencias: perdida del equilibrio osmótico entre el plama y el fluido instersticial (edema) Posibles causas: disminución de la sinstesis proteica en el hígado, baja absorción de aminoácidos, incremento de la perdida de proteínas (mucosa ulcerada del intestino, síndrome nefrotico), aumento de otras proteínas

Hiperalbuminemia: 

Normalmente causada por estado de deshidratación

BANDA α-1: α-1 ANTITRIPSINA α1- Antipripsina: (52kDa) es el mayor componente de la fracción α1>90% es sintetizada por hepatocitos y macrófagos y es la principal inhibidor de serina proteasa plasmáticas (serpinas o Pi) El mayor genotipo es MM cuyo producto fenotípico es la PiM 

Aumena en reacciones Inflamatorias

BANDA α-2: α-2 MACROGLOBULINA 2 Macroglobulina (720 Kda) Formada por cuatro subunidades idénticas de 180 Kda. Es sintetizada por los hepatocitos, macrófagos y astrocitos.  

Es un importante inhibidor de proteasas, puede unirse a citoquinas plasmáticas y regular su función Transporta un 10% del zinc circulante

BANDA α-2: HAPTOGLOBINA Haptoglobina (Hp) (90 Kda) es una glicoproteína plasmática que forma complejos en hemoglobina (Hb) extracorpuscular (aproximadamente el 10% de la hermoglobina que se degrada/dia) Hb  Riñón  Excretada por la orina, perdida de Fe Hb + Hp  Hb-Hp complejo  Catabolizado por el hígado, recuperación de Fe

BANDA α-2: CERULOPLASMINA Ceruloplasmina (160 kDa): es una α2-Globulina. Sintetizada principalmente por el hígado. Es una proteína de fase aguda    

Transporta mas del 90% del cobre plasmático. Con una estequeomteria 6Cu: Cer/mol Es una ferroxidasa Fe 2+  Fe + 3 Tiene efecto antioxidante frente a radicales producidos por metales Deficiencia de esta proteína se encuentra en enfermedades hepáticas

Principales proteínas plasmáticas en las bandas de electroforesis región β: proteínas del complemento 

  

La familia del complemento son un grupo de proteínas que junto con la inmunoglobulinas actúan para generar una respuesta inmune, destrucción de bacterias y eliminación de complejos AntAc Los componentes del complemento que mas se miden en clínica es C3 y C4 y C1-inhibidor esterasa **Valores altos de C3 y C4 se encuentran en Cáncer, colitis ulcerativa** **Deficiencia de C3 y C4 se encuentran LES, desnutrición, cirrosis, rechazo Trasplante renal, infecciones bacterianas.**

Principales proteínas plasmáticas en las bandas de electroforesis

Inmunoglobulinas

Patrón electroforético de alteraciones en el proteinograma

Medición de enzimas como proteínas Un defecto enzimático es una disminución en la actividad de un enzima. Esto puede ser debido a: – Tipo I: Cantidad reducida, pero la actividad específica* es normal – Tipo II: Cantidad es normal, pero la actividad específica* está reducida debido a un defecto en la enzima. *actividad específica = actividad enzimática (μmoles/min) por mg de proteína

Enzimas en suero útiles en diagnostico clínico

Función Hepática

Las pruebas de función hepática se interpretan más fácilmente, si se considera que el hígado está conformado por 3 sistemas:   

Hepatocito (procesos bioquímicos) Tracto Biliar (Excreción de Bilirrubina) Sistema reticuloendotelial (metabolismo de hemoglobina y bilirrubina)

Particular trascendencia constituyen los siguientes proceso bioquímicos: 



Vía de interconversion aminoácidos-carbohidratos, involucrando las aminotransferasas (GPT o ALT: alanina aminotransferasa y GOT o AST; Aspartato Aminotransferasa) Ciclo de la Urea: la mayoría de las enzimas son únicas del hígado (ejemplo: la OCT; ornitina carbamiltransferasa) elevaciones séricas de amonio y OCT pueden indicar daño hepático severo

Perfil Hepático         

Bilirrubina Total Bilirrubina Directa AST ALT Fosfatasa Alcalina GGT Proteínas Totales Albumina Tiempo de Protrombina

Diagnostico

cronicidad

severidad

monitorizació n

Bilirrubinas

pronostico

El metabolismo de la bilirrubina depende de la velocidad de síntesis proveniente de la degradación de la hemoglobina (sistema reticuloendotelial), y de su velocidad de excreción vía canalículos biliares (sistema biliar). 



La bilirrubina, antes de ser excretada, se conjuga con ácido glucurónico en el REL del hepatocito; un bloqueo en su excreción provocará una elevación anormal de bilirrubina conjugada en el suero Una sobreproducción rápida de bilirrubina (ej. anemia hemolítica) resultará enun incremento en la bilirrubina libre (no conjugada) en el suero

El laboratorio clínico determina la concentración de: 1. bilirrubina directa (conjugada) 2. bilirrubina indirecta (no conjugada) 3. bilirrubina total (que es la suma de las dos anteriores) Es importante saber cuál de las dos bilirrubinas (directa o indirecta) está elevada pues esto puede guiar el diagnóstico médico e indicar que análisis adicionales son necesarios.

Pruebas de Función Hepática Enzimas: Aminotransferasas (transaminasas) Existen 2 enzimas importantes en ésta categoría: AST o GOT y ALT o GPT 1. GOT se encuentra ampliamente distribuida en el organismo, incluyendo corazón y músculo; GPT se encuentra principalmente en el hígado. 2. Aprox. un 80% de la GOT en hepatocitos está localizada en mitocondrias, mientras que la GPT es predominantemente no mitocondrial. La razón sGOT/sGPT (cuociente DeRitis), que normalmente tiene el valor de 1 o ligeramente superior a 1, ha sido utilizado en el diagnóstico de enfermedad hepática:

Se ha postulado que en una injuria hepatocelular leve ambas enzimas son liberadas al suero; en una injuria más severa, el daño de la membrana mitocondrial adicional provocará una mayor liberación de GOT, elevando la razón GOT/GPT sérica. Pacientes que han abusado en forma crónica de alcohol presentan elevaciones consistentes de GOT mitocondrial. 

La razón sGOT/sGPT en enfermedad hepática alcohólica es: (3:1 ó 4:1)

La actividad sGPT es más específica para detectar enfermedad hepática en pacientes no alcohólicos y asintomáticos. • La actividad sGPT se incrementa generalmente más que la sGOT en pacientes con hepatitis viral aguda (razón sGOT/sGPT menor o igual 1)

Fosfatasa Alcalina (ALP)   

La ALP tiene un valor de pH óptimo de aprox. 9 Distribución tisular: Hueso, hígado, riñón, intestino y placenta En el hígado existe predominantemente en el tracto biliar, constituyendo un marcador de disfunción biliar

La actividad ALP en el tracto biliar se incrementa rápidamente ( ≥ 10 x) en obstrucciones causadas por: cálculos en los conductos, procesos infecciosos derivados de colangitis ascendente, lesiones por invasión de tejidos. En colestasia obstructiva la ALP sérica aumenta de forma paralela con la bilirrubina conjugada

La ALP sérica también se encuentra levemente elevada en la mayoría de las instancias de ictericia causadas por injuria celular (ej. hepatitis viral, cirrosis alcohólica)

У-Glutamil Transferasa (GGT) La GGT, denominada también У-glutamil transpeptidasa, cataliza la transferencia de un grupo У-glutamilo desde un  -glutamil-péptido a otro péptido o a un aminoácido. Puede estar involucrado en el transporte de aminoácidos a través de la membrana celular, y en el metabolismo del glutatión • Se encuentra presente en la membrana celular y fracción microsomal. El riñón, y en menor extensión hígado y páncreas, son ricos en GGT.

• La mayor utilidad de su medición radica en el diagnóstico de enfermedades hepatobiliares. Altos valores (más de 10 x) se pueden encontrar en colestasia crónica debido a cirrosis biliar primaria o colangitis esclerótica; los valores van

en paralelo con la ALP y 5’nucleotidasa en obstrucciones post-hepáticas y enfermedad infiltrativa hepática. • Por tratarse de una enzima microsomal, está sujeta a inducción por sustancias activadoras del sistema microsomal (alcohol, drogas); es particularmente útil para evaluar pacientes con alcoholismo

Función Pancreática Enzimas pancreáticas con utilidad diagnostica     

Amilasa Lipasa Tripsina Quimiotripsina Elastasa AMILASA Distribución tisular:

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.

Páncreas glándulas salivares Testículos/ovarios Músculo esquelético pulmones Tejido adiposo NO en hígado Utilidad Clínica

Diagnostico de pancreatitis aguda Aumenta 4-6 veces

2-12 horas inicio dolor (peak máx. 12-24 hrs) Niveles basales 3-4º día

    

No tiene relación con la severidad Sensibilidad 70-75% Especificidad 60-70% 20% amilasa normal LIPASA

 

Síntesis en células acinares pancreáticas 100 veces más que en otros tejidos

 

Otros tejidos: estómago, pulmón, leucocitos, mucosa intestinal, tejido Adiposo Reabsorción tubular renal completa

Utilidad Clínica Pancreatitis Aguda Pancreatitis aguda Aumenta 2-50 veces 4-8 horas inicio crisis (peak máx. 24 hrs) Niveles basales 8-14 días (vm=7-14h) No tiene relación con la severidad Lipasa normal en casos de hiperamilasemia no pancreática Aumenta Lipasa en pancreatitis aguda con amilasa normal

Función Renal Función renal normal Glomérulos: “filtra” sangre

plasma ultra filtrado

Retiene células y proteínas Túbulos: “procesa” plasma ultrafiltrado a orina Excreción renal      

Urea del metabolismo de aminoácidos Creatinina del metabolismo muscular Acido úrico del metabolismo de ácidos nucleícos Productos finales del metabolismo de la hemoglobina Metabolitos de hormonas Sustancias extrañas: (ej., drogas y otros compuestos ingeridos de la dieta)

Evaluación de la función renal Mediciones en el Plasma Niveles de Creatinina y BUN Cuando falla la excreción renal de desechos aumenta bun y creatinina en plasma

BUN (blood Urea Nitrogen) 8-25 mg/dl • Urea 45% • Aminoácidos 20% • Ácido úrico 20% • Creatinina 5% • Creatina 1-2% • Amonio 0.2%

Función glomerular y tubular Evaluación del Glomérulo     

Creatinina y BUN en Suero / plasma FRG : aclaramiento de Creatinina Excreción de proteínas cantidad total de proteínas perfil electroforético

Evaluación de la Función Tubular Balance ácido/base    

Orina : pH Sangre: pH, pCO2 , HCO3Suero / plasma: Na+, Cl-, HCO3-

Balance electrolitos   

Suero: Na+, K+; Si anormal: orina Na+, K+ Fosfato en suero Calcio en suero y orina

Reabsorción de metabolitos

 

Glucosa en orina Aminoácidos orina (no rutinarios)

Vías renales y urinarias EVALUACION POR UROANÁLISIS (Examen de orina completo) Físico Aspecto   

Color pH densidad

2. Químico      

Proteínas Glucosa Nitritos Bilirrubina cuerpos cetónicos hemoglobina

3. Microscópico: Búsqueda de elementos en sedimento urinario (cilindros, células, microorganismos y cristales) Marcadores bioquímicos Infarto agudo al M...