GMOS lab report PDF

Preview

Summary

gmos lab report...

Description

TheEffic i e n c yo ft heAdgi aTe s t i n gSt r i pWh e nDe t e r mi n i n gt hePr e s e nc eof Ge ne t i cModi fic a t i oni nSo y be a ns St u d e n tI D1 0 8 4 3 6 4

Un i v e r s i t yo fGu e l p h No v e mb e r1 0 , 2 0 1 9

TheEffic i e nc yoft h eAd gi aTe s t i n gSt r i pWhe nDe t e r mi n i n gt h ePr e s e n c eofGe ne t i cMo di fic a t i o ni nSo yb e a ns

ABSTRACT Ge n e t i c a l l ymo d i fie do r g a n i s ms( GMOs )a r ep l a n t so ra ni ma l st h a th a v eh a dt h e i rg e n e t i c ma k e u pa l t e r e d , t h epr e s e n c eGMOsc a nb ede t e c t e dt h r o u g hv a r i o u st e s t i n gme t h o d s ,t h emo s t p o p u l a rb e i n gPo l y me r a s eCh a i nRe a c t i on( PCR)a n dEn z y me l i n k e dI mmu n o s or b e n tAs s a y ( ELI SA) .I nt h i se x p e r i me n tt h ea c c u r a c yo fa nAd g i ae x t r a c t i o nki t( ac o mmo nELI SA p r o c e d u r e )wa st e s t e dwh e nd e t e r mi n i n gt h ep r e s e n c eo fg e n e t i cmo di fic a t i o ni nap o p u l a t i o no f s o y b e a n s . Ab l e n do ft h eOACWa l l a c e( n o n GMO)s o y b e a na ndOACCh a l l e n g e rR2( RR2 Y v a r i e t y )s o y b e a ns e e d swe r egr o wna ndt h e nt e s t e df o rGMs .Af t e ru s i n gt h eAd g i ae x t r a c t i o nki t a n da nI mmu n o s t r i p , t h ep l a n t swe r es p r a y e dwi t hag l y p h o s a t eh e r b i c i d et ot e s tt h ea c c u r a c yo f t h eAd g i ar e s u l t s . Af t e re x a mi n i n gt h ee n dr e s u l t s , i twa sd e t e r mi n e dt h a tt heAd g i at e s t i n gh a d 7 1 . 4 %f a l s ep o s i t i v ea nd1 1 . 1 %f a l s en e g a t i v es o y b e a n s ,a n dt h e r e f or ei sn o tar e l i a b l es o u r c eo f GMOt e s t i n g . Fo rt h ef u t u r eo fGMOt e s t i n gELI SAt e s t i n gme t h od ss h o u l dn o tb er e l i e do na s h e a v i l ywh e nt e s t i n gf o rg e n e t i cmo di fic a t i o n s .

Page 2 of 11

TheEffic i e nc yo ft heAd gi aTe s t i n gSt r i pWhe nDe t e r mi ni n gt h ePr e s e nc eo fGe n e t i cMo di fic a t i oni nSo y be a ns

I NTRODUCTI ON Ge n e t i c a l l ymo d i fie dp l a nt so ra n i ma l sa r eo r g a n i s mswh i c hh a v eha dt h e i rg e n e t i c ma t e r i a li n t e n t i o n a l l ya l t e r e db yh u ma n ’ s , g e n e t i ce n g i n e e r i n gi swi d e l yu s e da c r o s st h ewo r l dt o mo d i f yo r g a n i s mst oi n t r o d u c ead e s i r e dt r a i ti n t ot h eo r g a n i s m’ sDNA( Bi o t e c h n ol . Ad v . 2 00 0 ) . Ge n e t i ce n gi ne e r i n gi npl a n t sc a ni mp r o v ep e s tr e s i s t a n c e , h e r bi c i det o l e r a n t , i mp r o v e dgr o wt h a n di n c r e a s e dn u t r i t i o n a lv a l u e . Gl y c i n emax( L. )Me r r . , c o mmo n l ykn o wna st h es o y b e a n ,i so n e o ft h ema j o rp l a n t st h a tha v eb e e ng e n e t i c a l l ymo d i fie d( CFI A2 0 1 2 ) . So y b e a n sa r eu s e di nf o o d a n di n d us t r i a lu s e s , l i v e s t o c kf e e d ,p r o d u c t i o no fe d i b l eo i la ndb i o di e s e l . He r b i c i de sa r eu s e de x t e n s i v e l yi na g r i c u l t ur et oma i n t a i nwe e dc o n t r o l ;h o we v e r e ffe c t i v eh e r b i c i d e st y p i c a l l ya r en o ns e l e c t i v eo ft h ep l a n t st h e yki l l . Ge n e t i ce n g i n e e r i n gc a nb e u s e dt oc o mb a tt h e s eh e r b i c i d e sb yi n s e r t i n gag e n et h a ti st o l e r a ntt ot h ede a t h l yc h e mi c a l s .A p o p u l a ri n g r e di e n ti nma n yh e r b i c i d e si sg l y p h o s a t e , mo s tc o mmo n l yf o u ndi nt h eh e r b i c i de Ro u n d u p( Ri l e ye ta l . 2 0 1 1 ) . Gl y p h o s a t ep r e v e n t st h eb i n d i n go fs u b s t r a t e st oEPSP( 5 e n o l p y r u vy l s h i ki ma t e 3 p ho s p h a t e )s yn t h a s e , a ne nz y mee s s e n t i a lt ot h ep r od u c t i o no fa r o ma t i c a mi n oa c i d s ;wi t h o utt h e s ea mi n oa c i ds , p r o t e i ns y n t h e s i si sa b s e n t , a n dt h ep l a n t sd i e s( J . Nu t r i t i o n1 99 6 ) .Ge n e t i ce n g i n e e r i n gh a sma d ei tp o s s i b l et oi ns e r tag e n ei n t oap l a n t sg e n o me t h a ti sh e r bi c i d et o l e r a nt ,t h i si sc o mmo n l ys e e ni ns o y b e a n st oma k et h e mg l y p h os a t et o l e r a n t .A CP4 EPSPs y n t h a s ee nz y mewa sd i s c o v e r e di naCP4s t r a i nofAg r o ba c t e r i u m, t h i se n z ymei s g l y ph o s a t et o l e r a n ta n dt h e r e f o r es t i l lr e p r o d u c e sa r o ma t i ca mi noa c i d s , ag e nef r o mCP4 EPSPS wa st h e nu s e dt og e n e t i c a l l ymo d i f ys o y b e a n st oma k et h e mg l y p h os a t et o l e r a n t( Cr o pSc i . 1 9 9 5 ) . Th eg l y p h o s a t eh e r b i c i d er e s i s t a n tg e nei sa l s or e f e r r e dt oa st h eRRg e n e , Ro u n d u pr e a d yg e n e .

Page 3 of 11

TheEffic i e nc yo ft heAd gi aTe s t i n gSt r i pWhe nDe t e r mi ni n gt h ePr e s e nc eo fGe n e t i cMo di fic a t i oni nSo y be a ns

Af t e rt hei n v e n t i o no fg e n e t i c a l l ymod i fie do r g a n i s m( GMOo rGM)t e s t swe r ec r e a t e dt o i d e n t i f ywh e t h e ra no r g a n i s mwa smo d i fie d .Po p ul a rt e s t i n gp r o c e d u r e st od e t e c tGMOsa r e Po l y me r a s eCh a i nRe a c t i on( PCR)a n dEn z y me l i n k e dI mmu n os o r b e n tAs s a y( ELI SA) .PCRi sa DNAb a s e da n a l y s i sa n dELI S Aa r epr o t e i n b a s e dt e s t i n g( St a r k e2 00 2 ) .PCRi st hemo s t a c c u r a t eme t h o dh o we v e r ;i ti smo r ec o mpl e xa n de x p e n s i v e . ELI SAi ss i mp l e ra n dmo r ec o s t e ffic i e n tt h a nPCRa n di spr e f e r r e dwh e nt e s t i n gs p e c i fict r a i t s . I nt h i se x p e r i me n tt wov a r i e t i e so fs o y be a npl a nt s( Gl y c i nemax( L. )Me r r . )we r e s t u d i e d .OACWa l l a c e ,an on GMOt ha ti sn ott o l e r a n tt oGl yp h os a t e ,a ndOACc ha l l e n g e r ,a RR2 Yv a r i e t yc on t a i ni n gt ha ti st o l e r a n tt og l y ph os a t e .Th eELI SAme t h o dwa su s e dt ot e s tt h e p r e s e n c eo ft h eRo un d u pRe a d yg e n ei nas a mp l eo fs o y b e a nswi t ha nAg d i ae x t r a c t i o nki t .

Ob j e c t i v e Th eo b j e c t i v eo ft hi ss t u d ywa st od e t e r mi net h el e v e lo ft h eRo u n d u pRe a d yg e n ei na s a mp l eo fs o y b e a np l a n t sa n dde t e r mi n et h ee ffic i e n c yo fa nAg d i as t r i pt e s ta sme a s u r e db yt h e f r e q u e n c yo ff a l s ep o s i t i v e sa n df a l s ene g a t i v e so ft h et e s ti nc o mp a r i s o nt ot h er e a c t i ono fp l a n t s t ot h eh e r b i c i d eg l y p h os a t e .

Hy po t he s i s I twa sh y p o t h e s i z e dt h a tt heAg d i as t r i pt e s tc a nb eu s e dt od e t e c tt hel e v e lo fGM p r e s e n c e si napo p u l a t i o no fs o y be a np l a n t s .

Page 4 of 11

TheEffic i e nc yo ft heAd gi aTe s t i n gSt r i pWhe nDe t e r mi ni n gt h ePr e s e nc eo fGe n e t i cMo di fic a t i oni nSo y be a ns

METHODSANDMATERI ALS St e pOne :pr e pa r e dt het e s ts a mpl e . Ac o mb i n a t i o nofs e e d swa sc ol l e c t e do ft h eOAC Wa l l a c e( n on GMO)s o y be a na n dOACCh a l l e n g e rR2( RR2 Yv a r i e t y )s o y b e a n . Se e d swe r e p i c k e da tr a n d o mf r o mt h emi x t u r eo fs e e d sa n dgr o wna tac o n s t a n t2 2Cu n de ra1 6 /8h l i g h t / d a r kc y c l e .Ea c hp l a n twa st he ng i v e nau n i q u ec o d ea n da s s i g n e dt oe a c hme mb e ri nt he c l a s s . St e pTwo:pr e pa r e dt heAg di ae x t r ac t i o nki t .Wi t hg l o v e so n , e x t r a c t e do nel e a fle tf r o m t h es o y b e a n ,a p p r o x i ma t e l ywe i g h i n gb e t we e n0. 1 2-0 . 1 6g , t h e nt o r eo p e nt h ee x t r a c t i o nb a ga n d p o s i t i o n e dt h el e a fb e t we e nt h et wol a y e r so fme s hi nt h eb a g . Ho mo g e n i z e dt h el e a fle twi t h t h umbu n t i li twa sgr i nd e da n dmi x e dwi t ht h es o l u t i o ni nt h eba g . Th es o l u t i o ni nt h eb a gwa s fil l e dwi t h3mlo fa nSEB4e x t r a c t i o nb u ffe r( Su c r os eb a s e dEx t r a c t i o nBu ffe r ) , wh i c hc o n t a i n e d ap h o s p h a t eb u ffe rs a l i nes o l u t i o n( 0 . 1M Na Cl , 1 5mM p o t a s s i u mp h os p h a t e , p H7 . 2 )a n d p r o t e a s ei n h i b i t o r st os t o pt h ede g r a d a t i o no fp r o t e i n sd u r i n gt h ee x t r a c t i on . St e pThr e e :t e s t e ds a mpl ewi t hI mmuno St r i p.Af t e rl e t t i n gt h el e a fle ts i tf o r3 0 s e c on d s , t heI mmu no St r i p®STX7 4 0 0 0/ 0 0 5 0wa sp l a c e di n t ot heb a gwi t ht hegr e e ns i d e s u bme r g e d0 . 5c mi n t ot h ee x t r a c ts o l ut i o na n dhe l di nt h eba gf o r3 5mi n u t e s . St e pFo ur :r e c o r de do bs e r v a t i o ns .Af t e rt h eI mmu no St r i pwa sr e mo v e dar e dc on t r o l l i n ewa ss e e no nt h es t r i p . I ft h es o l u t i onwa st e s t e dp os i t i v e( +)f o rt h eRRg e n ea n o t h e rl i n ewa s p r e s e nt b e t we e nt h ec o n t r o ll i n ea n dt h es a mp l es o l ut i o np a d ,i ft h es o l u t i o nwa st e s t e dn e g a t i v e ( )f o rt h eRRg e n eo n l yt h ec o n t r o ll i n ewa ss e e n .Th et e s tr e s u l t swe r er e c o r d e da l o n gwi t ht h e p l a n t su n i q u ec od e .

Page 5 of 11

TheEffic i e nc yo ft heAd gi aTe s t i n gSt r i pWhe nDe t e r mi ni n gt h ePr e s e nc eo fGe n e t i cMo di fic a t i oni nSo y be a ns

St e pFi v e :s pr a y e dt hepl ant swi t hRo undup. Af t e rt h ep l a n twa st e s t e df o rt h ep r e s e n c e o ft h eRRg e n e , t h e ywe r es p r a y e da tar a t eof2.6 L ha-1wi t hWe a t he r ma xRo u n d u pwi t ha c o n c e n t r a t i o no f540 g ai L-1. Th e ywe r et h e ngr o wna g a i na tac o n s t a n t2 2Cu n d e ra1 6 /8h l i g h t / d a r kc y c l ef o ro n ewe e k . St e pSi x :r e c o r de do bs e r v a t i o nso fpl a nta f t e rRo undup. Th ep l a n t swe r er e t u r n e da nd r e c o r d e di fi twa sa l i v eo rd e a da f t e rb e i n gs p r a y e dwi t hRo u nd u p .

Va r i a bl e s Th ei nd e p e n d e ntv a r i a b l ei nt h i se x p e r i me n ti st h ee n v i r o n me n ti nwh i c ht h es o y b e a n s we r egr o wni n ,i . e . t e mp e r a t u r e , h o u r so fd a y l i g h ta n dg r o wt hp e r i o d .Th ed e p e n d e nt v a r i a bl e sa r e t h et y peo fs o y b e a nt h a tt e s t e ds i n c ei twa sgr o wna tr a n d o m.

Page 6 of 11

TheEffic i e nc yo ft heAd gi aTe s t i n gSt r i pWhe nDe t e r mi ni n gt h ePr e s e nc eo fGe n e t i cMo di fic a t i oni nSo y be a ns

RESULTS Ta b l e1s h o wst h er e s u l t so ft e s t i n gs o y b e a n sf o rt h ep r e s e n c eofg e n e t i cmo d i fic a t i o n , u s i n gAd g i ae x t r a c t i o nki ta n dag l y p h o s a t es p r a ya p p l i c a t i o n . I tc a nb es e e nf r o mt a b l e1t h a t 2 1 . 7 %o ft h es o y b e a n ss u r v i v e da n d7 8 . 2% o ft h ep l a n t sd i dn o ts u r v i v ea f t e rb e i n gs p r a y e dwi t h Ro u n d u p . Th er a t i ooft h eOACCh a l l e n g e rR2a n dOACWa l l a c eu s e dt ob l e n dt h es e e ds a mpl e wa s5 : 18 , a s s umi n gt h a tt h eOACWa l l a c ewa st h es o y be a n st h a td i dn o ts u r v i v ea n dt h eOAC Ch a l l e n g e rR2wa st h es o y b e a n st h a td i ds u r v i v e . I ft hes o y b e a nh a db e e nt e s t e dp o s i t i v ef o rt h e RRg e n ei twa se x p e c t e dt os u r v i v et h eg l y p h os a t es p r a ya p p l i c a t i o na n di fi th a db e e nt e s t e d n e g a t i v ei twa se x p e c t e dt od i es i n c ei td i dn o tc o n t a i nt h eg l y p h os a t et o l e r a n tg e ne , h o we v e rt hi s wa sn o te n t i r e l yr e fle c t e di nt h er e s u l t ss e e ni nt a b l e1 .Af t e rt h eRo u n d u pwa ss p r a y e di twa ss e e n t h a tt h ep l a n t st h a tt e s t e dne g a t i v ef o rt h eRRg e ned i di n d e e dd i e ,b u tmo s to ft h es o y b e a n st h a t t e s t e dp o s i t i v ef o rt h eg e n ea l s od i e d .

Re s ul to f t e s ts t r i p

Gl y pho s a t es pr a ys ur vi v a l Su r v i v e d De a d ( +v ef o rRR) ( v ef o rRR) 8 2 0

Po s i t i v e( +)f o r p r o t e i n Ne g a t i v e( )f o r 2 1 6 p r o t e i n To t al pl a nt s 1 0 3 6 Ta b l e1 . Numb e ro fs o y b e a np l a n t st e s t e dp o s i t i v ea n dn e g a t i v ef o rt h ep r e s e n c eo ft h eRo u n d u p Re a d yg e n e( u s i n ga nAd g i ae x t r a c t i o nki ta n da nI mmu n o St r i p )a n dt e s t i n gp o s i t i v eo rn e g a t i v e a f t e rs p r a y i n gwi t hag l y p h os a t ehe r b i c i d e .

Page 7 of 11

TheEffic i e nc yo ft heAd gi aTe s t i n gSt r i pWhe nDe t e r mi ni n gt h ePr e s e nc eo fGe n e t i cMo di fic a t i oni nSo y be a ns

DI SCUSSI ON Ge n e t i c a l l ymo d i fie d( GM)c r o p sa r ev e r yp op u l a ri nv a r i o u sc o u n t r i e sa c r o s st h ewo r l d, ma n yr e g u l a t i o n sa n dr e s t r i c t i o nsh a v eb e e np l a c e do nGMsa sma n yh e a l t ha n de n v i r o n me n t a l c o n c e r n sh a v eb e e nr a i s e d( As i a nJ . o fBi oSc i . 2 0 0 7 ) . Re l i a b l ea nda c c u r a t et e s t i n gofGMOsi s a ni mp o r t a n tp r o c e s s , t h i sr a i s e st h eq u e s t i o no fwh a tme t h o do ft e s t i n gi st h emo s tr e l i a b l e . I n t h i se x p e r i me n tt h ea c c u r a c yofEn z yme l i n k e dI mmu n o s o r b e nt As s a y( ELI S A)wa st e s t e du s i n g Ad g i ae x t r a c t i o nki t sa n dg l y p h os a t es p r a ya p pl i c a t i o n . I nt h i se x p e r i me n ti twa sa s s u me dt h a ti fas o y b e a np l a nt d i e da f t e rt h ea p p l i c a t i ono ft h e g l y ph o s a t eh e r b i c i d et h a ti td i dn o tc o n t a i na na c t i v eRRg e n e , a n di ft h ep l a n ts u r v i v e di twa s a s s u me dt oc o n t a i na na c t i v eRRg e n e .I tc a nb es e e nf r o mt a b l e1t h a to n l y2 1. 7 % oft h e s o y b e a n ss u r v i v e da n d7 8 . 2 %o ft h ep l a n t sd i e d ,h o we v e rt h e s er e s u l t sc o u n t e r a c t e dt h ee x p e c t e d r e s u l t s .Onl y2 8 . 6 %o ft h es o y be a n st ha tt e s t e dp o s i t i v ef o rt h eRRg e n es u r v i v e dt h eg l y p h o s a t e h e r b i c i de ,me a n i n g7 1 . 4 % oft h es o y b e a n st h a twe r es u p p o s e dt ol i v e , d i e d . Pl a n t st h a twe r e t e s t e dp o s i t i v ef o rt h eg e n eb u td i e df o l l o wi n gt h eh e r b i c i dea p p l i c a t i o na r ec a l l e df a l s epo s i t i v e s a n dp l a nt st h a twe r et e s t e dn e g a t i v ef o rt h eg e n eb u ts ur v i v e dt h ea p p l i c a t i o na r ec a l l e df a l s e n e g a t i v e s .Fr o mt a b l e1i tc a nb ec a l c u l a t e dt h a t7 1 . 4 %o ft hes o y b e a n swe r ef a l s ep o s i t i v e sa n d 1 1 . 1 %p e r c e nt we r ef a l s en e g a t i v e s , t h i sme a n st h a tt het e s t i n gf or71 . 4 % oft h ep l a n t st h a twe r e p o s i t i v e , wa sf a l s eo rt h e r ewa ss o met y p eo fh u ma ne r r o r . Wh e no b s e r v i n gt h er e s u l t sa sawh o l e 4 7 . 8 %o ft h es o y b e a n swe r ef a l s e l yd e t e c t e df o rt h ep r e s e n c eo faGM.

Page 8 of 11

TheEffic i e nc yo ft heAd gi aTe s t i n gSt r i pWhe nDe t e r mi ni n gt h ePr e s e nc eo fGe n e t i cMo di fic a t i oni nSo y be a ns

Af t e rc o n d u c t i n gt h i se x p e r i me n t , i ti sp r o mi n e n tt ha tt h eAd g i ae x t r a c t i o nki ti sn o tv e r y r e l i a b l ewh e nde t e c t i n gg e n e t i cmo d i fic a t i o ni ns o y be a n s , t h i si mp l i e st h a tu s i n gt h eELI SA me t h o di saq u e s t i o n a b l et e c h n i q u ei nt h ea gr i c u l t u r ei n d u s t r y . Th e r ewa sal a r g ep e r c e nt of s o y b e a n st h a twa st e s t e df a l s e l yf o rt h ep r e s e n c eo ft h eRRg e ne , t h i si sc o n c e r n i n gf o rf o od ma n u f a c t u r e sa n dt h eg o v e r n me nt t oma i n t a i nt h eq ua l i t yo fc o n s u me rp r o d uc t s . ELI S Ai sa f a s t e r , mo r ec o s t e ffic i e n tt e s t i n gme t h o dt h a nPCR( As i a nJ . o fBi oSc i .2 0 0 7 ) , h o we v e rt h e r e s u l t sa r en o ta sa c c u r a t e . Fo rt h ef u t u r eo fGMOt e s t i n g , PCRs h o u l db eu s e dwh e ni n v e s t i g a t i n g c o n s u me rp r o d uc t sa st h e r ei sma n yh e a l t hc on c e r n sr a i s e dt oh uma n sa n da n i ma l s( As i a nJ . o f Bi oSc i . ) .

Co nc l us i o n I nc o n c l us i o n , a f t e rc o n d u c t i n gt h i se x p e r i me n tAd g i ae x t r a c t i o nki t swe r en o tv e r y a c c u r a t ewh e nt e s t i n gf o rt h ep r e s e n c eo fg e ne t i cmo d i fic a t i o ni nGl y c i n emax( L. )Me r r . Pl a n t s , a n dt h eh y p o t h e s i sc a nb er e j e c t e d .

Page 9 of 11

TheEffic i e nc yo ft heAd gi aTe s t i n gSt r i pWhe nDe t e r mi ni n gt h ePr e s e nc eo fGe n e t i cMo di fic a t i oni nSo y be a ns

REFERENCES CFI A. 2 01 2 . Th eBi o l o g yo fGl y c i n emax( L. )Me r r . ( So y b e a n ) .Ca n a d i a nFo o dI n s p e c t i o n Ag e n c y . Go v e r n me n to fCa n a d a . [ o n l i n e ]Av a i l a b l ef r o m: https://www.inspection.gc.ca/plants/plants-with-novel-traits/applicants/directive-9408/biology-documents/glycine-max-l-merr-/eng/1330975306785/1330975382668 (accessed 7 November 2019).

Gi o v a n ni n i ,T. a n dCo n c i l i o ,L. 2 00 2 . PCRDe t e c t i o no fGe n t i c a l l yMo d i fie dOr g a n i s ms : ARe v i e w. St a r k e . 5 4 ( 8 ) :3 2 1 3 2 7 . DOI :10 . 1 0 0 2 / 1 5 2 1 3 7 9 X( 2 0 0 2 08 ) 54 : 8 3 . 0. CO; 2 J

Harrison, L. A., Bailey, M. R., Naylor, M. W., Ream, J. E., Hammond, B. G., Nida, D. L., Burnette, B. L., Nickson, T. E., Mitsky, T. A., Taylor, M. L., Fuchs. R. L., and Padgette, S. R. 1996. The expressed protein in glyphosate-tolerant soybean, 5enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase from Agrobacterium sp. strain CP4 is rapidly digested in vitro and is not toxic to acutely gavage mice. J. Nutrition 126(3): 728-740. Ku ma r , M. a n dMo di , S. 2 0 0 7 . Se e dt e s t i n go fGMOs( Fo o dc r o p s ) . As i a nJ . o fBi oSc i .2 ( 2 ) : 1 7 1 1 7 3

Pa d g e t t e , S. R. , Ko l a c z , K. H. , De l a n n a y , X. , Re , D. B. , La Va l l e e , B. J . , Ti ni u s , C. N. , Rh o d e s , W. K. , Ot e r o , Y. I . ,Ba r r y , G. F . , Ei c h h ol t z , D. A. , Pe s c h k e , V. M. , Ni da ,D. L. , Ta y l o rN. B. a n dKi s h o r e , G.M. 1 9 9 5. De v e l o p me n t , I de n t i fic a t i o n , a n dCh a r a c t e r i z a t i o no fa Gl y p h o s a t e To l e r a n tSo y b e a nLi n e . Cr o pSc i . 3 5 :1 4 51 14 6 1 .

Page 10 of 11

TheEffic i e nc yo ft heAd gi aTe s t i n gSt r i pWhe nDe t e r mi ni n gt h ePr e s e nc eo fGe n e t i cMo di fic a t i oni nSo y be a ns

Ri l e y , P . , Co t t e r , J . , Co n t i e r o , M. a n dWa t t s , M. 20 1 1 . He r b i c i d et o l e r a n c ea n dGM c r o p s :wh y t h ewo r l ds h o u l db er e a d yt or o u n du pg l y p ho s a t e . Gr e e n p e a c eI n t e r n a t i o n a l . Ams t e r d a m, t h eNe t h e r l a n d s . 3 9p p .

Gi o v a n ni n i ,T. a n dCo n c i l i o ,L. 2 00 2 . PCRDe t e c t i o no fGe n t i c a l l yMo d i fie dOr g a n i s ms : ARe v i e w. St a r c h‐ St ä r k e . 5 4 ( 8 ) :3 2 1 3 2 7. DOI :1 0 . 1 0 0 2 / 1 5 2 1 3 7 9 X( 2 0 0 2 08 ) 54 : 8 3 . 0. CO; 2 J

APPENDIX Plant ID

Positive or negative for RR gene (+/-)

C5

-

Page 11 of 11...