Hodowle-drobnoustrojów PDF

Preview

Summary

Methods of microbial culture...

Description

Hodowle drobnoustrojów, czystych kultur.

techniki

posiewania,

otrzymywanie

Celem ćwiczenia było sporządzenie różnego rodzaju podłoży i posiewanie na nich drobnoustrojów różnymi technikami wraz z otrzymaniem czystych kultur. 1. Sposób: przeszczepienie kultury płynnej do podłoża płynnego: Drożdże o nazwie Debaryomyces hansenii (1ml) przenosiliśmy do podłoża płynnego YM, za pomocą pipety ze sterylną końcówką w aseptycznych warunkach przy płomieniu palnika.

2. Sposób: Przeniesienie materiału z mikroorganizmami ze skosu na skos: Pichia ohmeri przenosiliśmy sterylną ezą, wcześniej opalając wylot probówki z materiałem biologicznym. Drożdże wprowadzaliśmy zygzakiem do podłoża, zaczynając od dołu probówki. Wszystkie operacje z ezą wymagały jej wcześniejszego wyżarzenia w płomieniu palnika przed i po wprowadzeniu materiału.

3. Posiew redukcyjny metodą płytek rysowych: Po uprzednim przygotowaniu i opisaniu płytek, 3 z nich posłużą do wykonania płytek rysowych, każdy członek zespołu wykonuje ją innym sposobem. Drożdżem wykorzystanym w tym posiewie jest Pichia ohmeri z hodowli na podłożu stałym. Niezależnie od sposobu, postępowanie jest analogiczne: Za pomocą wyjałowionej ezy rozprowadzamy zygzakiem materiał biologiczny w pierwszym sektorze. Ezę wyżarzamy, po ostygnięciu przykładamy na końcu pierwszego sektora i jednym płynnym ruchem przenosimy do sektora drugiego. Nie odrywając ezy od płytki, rozprowadzamy pobrany materiał zygzakiem. Operację kontynuujemy do końca czwartego sektora.

4. Posiew redukcyjny metodą płytek mazanych: W metodzie wykorzystywane są trzy opisane płytki z podłożem agarowym, a wykorzystaną w posiewie kulturą jest Debaryomyces hansenii z hodowli płynnej. Głaszczkę moczymy w denaturacie i podpalamy w celu wyjałowienia. Na 1. płytkę nanosimy pipetą (sterylną) niewielką ilość hodowli płynnej i rozprowadzamy za pomocą głaszczki. Później BEZ ponownej sterylizacji głaszczki, wykonujemy rozmaz na płytce drugiej i trzeciej.

5. Hodowla rysowa na płytce z agarem kukurydzianym: Płytkę wykonujemy poprzez poprowadzenie na jej powierzchni trzech równoległych rys. Każdą rysę wykonujemy z użyciem ezy i na każdą nanosimy inną kulturę drożdży. W naszej płytce jest to: Pichia ohmeri, Debaryomyces hansenii oraz Yarrowia lipolytica....