Podłoża mikrobiologiczne PDF

Preview

Summary

PODŁOŻA MIKROBIOLOGICZNEAgar z krwią - wzbogacone podłoże hodowlane, używane do diagnostykiwielu drobnoustrojów. Pożywka jest nieselektywna, wzrastają na niejbakterie beztlenowe, bakterie tlenowe, Gram dodatnie, Gram ujemne orazgrzyby i algi Prototheca. Składnikiem jest zwykły agar i krew barania(5%...

Description

PODŁOŻA MIKROBIOLOGICZNE

Agar z krwią - wzbogacone podłoże hodowlane, używane do diagnostyki wielu drobnoustrojów. Pożywka jest nieselektywna, wzrastają na niej bakterie beztlenowe, bakterie tlenowe, Gram dodatnie, Gram ujemne oraz grzyby i algi Prototheca. Składnikiem jest zwykły agar i krew barania (5%). Na tej pożywce można sprawdzać zdolność bakterii do wytwarzania hemolizyn (strefa hemolizy). AGAR Z KRWIĄ TO PODSTAWOWE PODŁOZE MIKROBIOLOGICZNE Agar SS (agar Salmonella-Shigella) - jest to wykorzystywana w mikrobiologii pożywka typu wybiórczo-różnicującego. Wykorzystuje się ją do hodowli bakterii (np. w celu ustalenia lekooporności) grup Salmonella i Shigella z próbek kału. Ponieważ kał zawiera wiele bakterii z różnych rodzin, ważna jest tutaj wybiórczość wzrostu. Pożywka poza czynnikami wzrostu (agar, bulion mięsny, pepton) posiada składniki różnicujące - chlorek sodowy, tiosiarczan i cytrynian sodowy oraz barwniki (czerwień obojętna, zieleń brylantowa). Innymi składnikami jest laktoza i dezoksychloran sodu. Agar MacConkeya – wykorzystywane w mikrobiologii podłoże służące do hodowli bakterii Gram-ujemnych. Zawiera sole kwasów żółciowych, fiolet krystaliczny (hamuje wzrost bakterii Gram-dodatnich), neutralną czerwień (barwi drobnoustroje fermentujące laktozę), laktozę i peptony. Podłoże zostało wynalezione przez Alfreda Theodore'a MacConkeya podczas jego pracy jako bakteriologa w Royal Commission on Sewage Disposal.

Podłoże Sołtysa. Podłoże silnie wybiórcze, służy do izolacji pałeczek Salmonella. Salmonella - rosną w postaci żółtych kolonii, tworząc otoczkę odbarwionego podłoża. Escherichia coli - wzrost częściowo zahamowany, wyrosłe kolonie są barwy zielonej. Shigella - wzrost całkowicie zahamowany. Proteus - wzrost śladowy lub całkowicie zahamowany.

Agar czekoladowy (CHOC) – wykorzystywana w mikrobiologii pożywka specjalna, na której mogą wyrosnąć prawie wszystkie szczepy bakterii. Pożywkę przygotowuje się poprzez kilkukrotne podgrzewanie agaru z krwią baranią w autoklawie; po pewnym czasie pojawia się jednolite zabarwienie, oznaczające hemolizę krwinek czerwonych. Nie zawiera ona czekolady, a nazwa została nadana wyłącznie ze względu na wygląd. Zaletą agaru czekoladowego jest to, że umożliwia wzrost wymagającym bakteriom takim jak Haemophilus i Neisseria, które nie rosną na żadnej innej pożywce

1

Podłoże Löwensteina-Jensena, zwane czasem podłożem Löwensteina lub LJ – pożywka używana do trudnej hodowli prątków. Czas od posiewu do detekcji drobnoustroju wynosi średnio 21 dni. Podłoże składa się zazwyczaj z wody destylowanej, mąki ziemniaczanej, Lasparaginy (źródło azotu), glicerolu (źródło węgla) oraz roztworu soli - siarczanu magnezu, cytrynianu magnezowego i fosforanu jednopotasowego. Następnie w sposób możliwie jałowy, po umyciu wodą i przetrzymaniu w alkoholu, do roztworu dawana jest masa jajowa. Ostatnim składnikiem jest zieleń malachitowa - większość drobnoustrojów ginie w obecności tego związku, natomiast prątki są oporne i wzrastają w jego obecności.

Podłoże Chapmana - jest to pożywka typu wybiórczo-różnicującego stosowana do hodowli gronkowców. Wykorzystuje się w niej fakt, że stafylokoki (gronkowce) są w stanie rosnąć przy wysokim stężeniu chlorku sodu, w przeciwieństwie do większości pozostałych bakterii. Poza czynnikami wzrostu (bulion, pepton) agar zawiera również NaCl (zazwyczaj w stężeniu 7,5% dla zahamowania wzrostu bakterii innych niż gronkowce), mannitol oraz czerwień fenolową.

Podłoże TSA 􀀹skład (g/litr): Tryptic Soy Broth – 12; agar – 25; 􀀹podstawowe podłoże stałe, na którym rośnie szeroka gama bakterii o stosunkowo niskich wymaganiach pokarmowych; Podłoże Sabourauda : Peptone, ekstrakt drożdżowy, glukoza, agar, chloramfenikol uniwersalne podłoże opracowane przez Sabourauda (Sabouraud, R. 1892. Contribution a l'etude de la trichophytie humaine. Etude clinique, microscopique et bacterioloqique sur la pluralité des trichophytons de l'homme. Ann. Dermatol. Syphil. 3: 1061-1087) .do hodowli dermatofitów. Mała wartość pH wynosząca około 5,6 oraz duże stężenie glukozy sprzyja wzrostowi wszystkich grzybów i alg Prototheca. Podłoże to ze względu na wysokie stężenie glukozy jest wybiórcze dla drożdżaków i pleśni, a także alg Prototheca; zaś antybiotyk hamuje wzrost bakterii.

Podłoże Mueller-Hintona, Podłoże Mueller Hintona z krwią. Podłoże służy do oznaczania wrażliwości drobnoustrojów na antybiotyki i chemioterapeutyki, w tym również wymagających takich jak Streptococcus pneumoniae i Haemophilus influenzae. Podłoże Columbia lub Columbia z krwią

Podłoże służy do hodowli i izolacji drobnoustrojów zarówno mniej wymagających jak również o dużych wymaganiach wzrostowych, do izolacji paciorkowców, dwoinek.

2

Podłoże Eijkmana Zakwaszenie podłoża (zmiana barwy podłoża z fioletowej na żółtą) i obecność gazu w rurce Durhama świadczą o występowaniu bakterii z grupy coli, przy czym jeśli takie zmiany podłoża obserwuje się w probówkach inkubowanych w 44 oC - bakterii z grupy coli typu fekalnego.Ostatnia probówka w szeregu z wynikiem pozytywnym stanowi podstawę do oznaczenia miana coli i miana coli typu fekalnego. Brak gazu i zakwaszenia po 48 godz. przyjmuje się jako wynik ujemny. Podłoże BHI (Brain Heart Infusion, BHI) jest pożywnym, buforowanym podłożem hodowlanym, zawierającym infuzje tkanek mózgu i serca oraz peptony, których zadaniem jest dostarczenie białka oraz innych składników odżywczych potrzebnych do wzrostu wymagających i niewymagających drobnoustrojów. W preparacie zawierającym 6,5% dodatek chlorku sodu sól działa jako środek różnicujący i/lub selekcyjny, gdyż wpływa na przepuszczalność błony oraz na równowagę osmotyczną i elektrokinetyczną w organizmach nietolerujących soli Podłoże Edwardsa-Chodkowskiego – przy posiewie mleka z gruczołu mlekowego przeżuwaczy rosną tylko paciorkowce. W związku z tym, że przy posiewie innego materiału biologicznego rosną wszystkie bakterie, podłoże stosuje się tylko w badaniach mleka w kierunku mastitis (zapalenie gruczołu mlekowego) Lp. Nazwa podłoża Agar odżywczy 9.

10.

Podłoże EdwardsaChodkowskiego

11.

Columbia Agar Base

13.

Podłoże Sabourada z chloramfenikolem

14.

Podłoże Mueller Hinton

15.

Agar na skosy

Skład Ekstrakt mięsny …………………..……………. 3,0 Pepton...... ............................................................. 5,0 Chlorek sodu ......................................................... 5,0 Agar ...................................................................... 15,0 Ekstrakt mięsny …………………..………..…. 10,0 Pepton ................................................................. 10,0 Aeskulina .............................................................. 1,0 Chlorek sodu ......................................................... 5,0 Fiolet krystaliczny ........................................... 0,0013 Siarczan talu ......................................................... 0,33 Agar .....................................................................15,0 Pepton ................................................................. 23,0 Skrobia .................................................................. 1,0 Chlorek sodu ......................................................... 5,0 Agar .....................................................................10,0 Ekstrakt drożdżowy............................................... 2,0 Aminobak ............................................................. 3,0 Pepton SP .............................................................. 3,0 Pepton K ............................................................... 3,0 Glukoza ................................................................ 19,0 Potasu fosforan II zasadowy .................................. 0,5 Potasu fosforan I zasadowy ................................... 0,5 Chloramfenikol ...................................................... 0,5 Agar ..................................................................... 13,0 Hydrolizat kazeiny .............................................. 17,5 Ekstrakt wołowy ................................................... 2,0 Skrobia .................................................................. 1,5 Agar ..................................................................... 17,0 Ekstrakt wołowy ................................................... 3,0

3

17.

Podłoże Chapmana

21.

Podłoże Eijkmana

22.

Podłoże Sołtysa

Ekstrakt drożdżowy............................................... 2,5 Aminobak .............................................................. 5,0 NaCI ...................................................................... 5,0 Glukoza ................................................................. 1,0 Agar ..................................................................... 15,0 Wyciąg wołowy ..................................................... 1,0 Chlorek sodowy ................................................... 75,0 Polipepton ............................................................ 10,0 D-mannitol ........................................................... 10,0 Czerwień fenolowa ............................................ 0,025 Agar ..................................................................... 15,0 Aminobak ............................................................ 10,0 Laktoza ................................................................ 5,0 NaCI ..................................................................... 5,0 Purpura bromokrezolowa ..................................... 0,01 Ekstrakt drożdżowy ............................................. 1,25 Bulion ................................................................... 15,0 Taurocholan sodowy ............................................ 2,50 Zieleń brylantowa .................................................. 0,7 Fuksyna kwaśna .................................................... 0,5 Czerwień obojętna ............................................... 0,05 Agar ...................................................................... 10,0

40. Agar BHI

Ekstrakt mózgowy, ekstrakt z serca i heptozy ...... 27,5 D(+) glukoza ......................................................... 2,0 Chlorek sodowy ..................................................... 5,0 Wodoroortofosforan disodowy .............................. 2,5 Agar –agar ........................................................... 15,0

57. Agar MacConkey

Pepton ................................................................................... 20,0 Laktoza ................................................................................. 10,0 Sole żółciowe ......................................................................... 1,5 Chlorek sodu .......................................................................... 5,0 Czerwień oboj. ....................................................................... 0,03 Fiolet krystaliczny ..................................................................0,001 Agar ..................................................................................... 15,0 Trzustkowy hydrolizat kazeiny (tryptone) ........................... 15,0 Extrakt sojowy (sojtone) ....................................................... 5,0 Chlorek sodowy ..................................................................... 5,0 Agar ..................................................................................... 15,0

59.

Pożywka agarowa tryptonowo-sojowa TSA Broth

4...