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Polylinker 

Significado de la palabra MCS (sitio de clonación múltiple), también llamado un polylinker, es un segmento corto de ADN que contiene muchos sitios de restricción (hasta 20) - una característica estándar de ingeniería de plásmidos. [1], los sitios de restricción dentro de un MCS son por lo general únicos, que ocurre sólo una vez dentro de un plásmido determinado.

Un plásmido bacteriano utilizado en ingeniería genética como un vector de clonación plásmido es pUC18. Su región polylinker está compuesto por varios sitios de reconocimiento de enzimas de restricción, que han sido diseñados en un único clúster (polylinker). Cuenta con sitios de restricción para varias enzimas de restricción, incluyendo BamHI, EcoRI y PstI. Otro vector en ingeniería genética es pUC19, que es similar a pUC18, pero su región polylinker está invertida  

Esquema donde se muestre el polylinker Posición del polylinker dentro de un plasmido quimérico

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Ventajas de su uso Se utilizan durante los procedimientos de clonación molecular o subcloning. Extremadamente útiles en biotecnología, bioingeniería y genética molecular, los MCSs permiten a un biólogo molecular insertar un pedazo de ADN o varios pedazos de ADN en la región de los MCS. Esto puede usarse para crear organismos transgénicos, también conocidos como organismos genéticamente modificados (OGM).

Un polylinker es una secuencia corta de ADN que contiene dos o más sitios diferentes para “abrir el plasmido(cleavage)” por enzimas de restricción. Polylinkers se introducen a vectores para hacer más fácil la clonación proporcionando sitios que permiten la clonación de ADN, cortado con cualquiera de un número de diferentes enzimas de restricción, en un único plásmido.

MCS es la región especifica donde se llevara a cabo la clonación Tenemos nuestro DNA que se quiere clonar, este gen se corta con enzimas de restricción, para así insertar nuestro DNA que queremos en un sistema que nos dará múltiples copias del mismo DNA, se inserta en una célula huésped, que usualmente son bacterias. El DNA no se puede insertar solamente así a la célula porque no habría manera que se amplificara, así que para lograr esto se requiere colocar nuestro DNA en una especie de “vehículo” llamémoslo así, actuando como un sistema de entrega genético, que tendrá la capacidad de replicarse, aquí es donde actuan los vectores, que es el que llevara el segmento de DNA de interés, después este vector se insertara en la célula y así se podrá replicar y producir múltiples copias. Pero, ¿cómo incorporamos el DNA en el vector? Bueno, el lugar exacto donde colocamos el DNA y lo insertamos es lo que se conoce como MSC o polylinker. Si miramos en el vector, hay una región específica que es el sitio de clonación, significa que es la región que podemos abrir para ahí insertar el DNA deseado. Como cortamos o abrimos el vector para insertar el DNA?, aquí dependemos de las enzimas de restricción, que son enzimas que romperán los ácidos nucleicos por en medio, ellas reconocen secuencias especificas solamente y es ahí donde cortan, existen muchas enzimas como Eco Ri, Hind y BamHI, etc. Los polylinkers consisten en muchas enzimas de restricción, que incluso se pueden crear artificialmente para así poder usar ese vector para un alcance mayor de clonación, porque si un vector contiene por ejemplo 6 diferentes enzimas, ese vector será más versátil porque tendrá diferentes enzimas para usar en la clonación del vector, entonces en lugar de colocar solo una secuencia o una enzima se colocan múltiples, de ahí el nombre de MCS, porque ese sitio contiene múltiples enzimas de restricción....