Etapas para a preparação de lâminas histológicas PDF

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A aula foi ministrada pela Professora Dr. Maria Helena Maia, na Universidade Federal do Pará, para os alunos da turma do 3º semestre de Biomedicina. As informações foram transmitidas via apresentação de power point, e o arquivo que segue, são breves anotações feitas durante a aula....

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HISTOLOGIA ETAPAS PARA PREPARAÇÃO DE LÂMINAS HISTOLÓGICAS 1.CONCEITO Histologia é o ramo da anatomia que realiza estudos microscópicos dos tecidos e células que formam animais e plantas. 2. PREPARO DE ESPÉCIMES PARA EXAMES MICROSCÓPICO O procedimento mais usado no estudo de tecidos ao microscópio de luz (microscópio de óptico) consiste na preparação de cortes histológicos. No entanto, na maioria dos casos os tecidos e órgãos são muito espessos, por essa razão, antes de serem examinadas ao microscópio eles devem ser fatiados em secções ou cortes histológicos muito delgados que são colocados sobre a lâmina de vidro. Os cortes são obtidos por meio de instrumentos de grande precisão chamados micrótomos, mas antes os tecidos e órgãos necessitam passar por uma série de tratamentos, para manter o aspecto do tecido o mais próximo do natural in vivo. 2.1 FIXAÇÃO - Preserva a estrutura do tecido; - Evita a digestão dos tecidos por enzimas existentes nas próprias células (autólise); - Pode ser feita por métodos químicos ou físicos: - Na fixação química os tecidos são imersos em substâncias (fixadores), que formará uma ligação cruzada entre as proteínas, que irá estabilizá-las. Os tecidos devem ser cortados em fragmentos pequenos para que o fixador se difunda igualmente por todas as partes do tecido. - Os fixadores mais usado são o formaldeído a 4%, e o glutaraldeído. 2.2 DESIDRATAÇÃO - Remove a água dos tecidos; - O produto utilizado neste processo é o Etanol, em concentrações crescente de 70% até 100%, durante um período de tempo de 35min à 40min. 2.3 CLAREAMENTO - Torna o tecido transparente; - Os produtos mais utilizados são o Xilol e o Toluol (solvente orgânico); - O Xilol facilita a penetração de parafina/resina no tecido. 2.4 INCLUSÃO - Embeber o tecido em parafina ou resina, para dar uma consistência rígida ao tecido.

2.5 MICROTOMIA - Com um aparelho chamado micrótomo são feitos cortes nas peças de espessuras de 1 a 10 micrômetros; - Xilol e ácido sulfúrico são usados para remover a gordura; - Para remover a parafina/resina os cortes são aquecidos a 60ºC. 2.6 COLORAÇÃO - Para cada célula há um corante mais adequado devida a função que é exercida por ela. - Os principais tipos de corantes são: - corantes básicos: que coram componentes celulares ácidos, células denominadas basófilas (coloração azul ou violeta); - corantes ácidos: que coram componentes celulares básicos, células denominadas acidófilas (coloração rosa) - sais metálicos; - corantes especiais: coram as fibras da matriz extracelular. Dentre todos os corantes, a combinação mais utilizada é a Hematoxilina e Eosina (HE). A hematoxilina cora em azul ou violeta o núcleo das células e outras estruturas ácidas, tais como porções do citoplasma ricas em RNA e a matriz extracelular da cartilagem hialina. A eosina, por outro lado, cora o citoplasma e o colágeno em cor-de-rosa....