Laboratorio No 5 células vegetales, cloroplastos, etc. PDF

Title Laboratorio No 5 células vegetales, cloroplastos, etc.
Author LUIS ANGEL LLANOS ACUÑA
Course Biología Molecular
Institution Universidad de Cartagena
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LABORATORIO No Luis Llanos, Luis Ballesteros, Abraham Tapias, Daniel Jiménez, Gabriel Ramírez, Camilo Reyes. Estudiantes de ingeniería de alimentos de la universidad de CartagenaABRIL-LABORATORIO No. OBSERVACIÓN DE CÉLULAS VEGETALES Y DIFERENCIACIONES CITOPLASMATICASRESUMENEn el siguiente informe va...


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LABORATORIO No.3 Luis Llanos, Luis Ballesteros, Abraham Tapias, Daniel Jiménez, Gabriel Ramírez, Camilo Reyes. Estudiantes de ingeniería de alimentos de la universidad de Cartagena

ABRIL-2022

LABORATORIO No.3 OBSERVACIÓN DE CÉLULAS VEGETALES Y DIFERENCIACIONES CITOPLASMATICAS RESUMEN En el siguiente informe vamos a poder visualizar como las células y tejidos forman la materia viva, por medio de la identificación de los organelos que componen el citoplasma de células vegetales con ayuda del microscopio que nos ayudará a reconocer y diferenciar cada uno de ellos, organelos como cromoplastos, cloroplastos y amiloplasto. Para la identificación de cada uno se utilizarán varios materiales (corcho, cebolla, papa, yuca, maíz, plátano, hoja de elodea) a los cuales se le agregarán sustancias que tiñan las células y colerizando lo que se desea observar, en este caso utilizaremos el azul de metileno y Lugol diluido. PALABRAS CLAVE: Células, Lugol, Materiales.

Organelos,

ABSTRACT In the following report we will be able to visualize how cells and tissues form living matter, through the identification of the organelles that make up the cytoplasm of plant cells with the help of the microscope that will help us to recognize and differentiate each of them, organelles such as chromoplasts, chloroplasts and amyloplasts. For the identification of each one, various materials will be used (cork, onion, potato, cassava, corn, banana, elodea leaf) to which substances will be added that stain the cells and color what is to be observed, in this case we will use methylene blue and diluted Lugol. KEYWORDS: Organelles, Cells, Lugol, Materials.

INTRODUCCIÓN En el universo biológico se encuentran dos tipos de células: procariotas y eucariotas. Estas últimas a diferencia de las primeras, contienen una membrana nuclear definida y membranas internas que encierran otros compartimentos, las organelas, en donde tienen lugar diferentes reacciones químicas importantes para el funcionamiento de la célula. Animales, plantas, hongos y protistas a pesar que hacen parte del grupo de eucariontes, presentan diferencias significativas en su estructura y funcionamiento celular. En cuanto a la célula vegetal, esta contiene un conjunto de organelas que le permiten: transformar la energía contenida en la luz solar en energía química (los alimentos), vivir en medios generalmente hipotónicos, realizar intercambios gaseosos con el medio y almacenar material energético (almidón) entre otras funciones. Los plastidios son una clase de organelas que solo se encuentran en vegetales y algunas protistas y que el estudiante podrá observar en esta practica a través de la observación directa o mediante pruebas especificas de tinción de muestras de tejidos vegetales. MARCO TEORICO. La célula vegetal es un tipo de célula eucariota que forma los tejidos vegetales, aunque sus características no son generalizables a todas las células de una planta, y menos a muchos organismos llamados vegetales de una forma imprecisa. Las células adultas de las plantas terrestres tienen rasgos comunes con algas y hongos.

Una característica propia de las células vegetales es la pared celular, resistente a la tensión, lo que proporciona solidez a la célula. En las plantas, su principal componente es la celulosa, polisacárido, gracias al cual usamos la madera y el papel. Las paredes celulares de los hongos son de quitina, mientras las de las algas están construidas a base de glicoproteínas y polisacáridos, aunque algunas, como las diatomeas, poseen una pared compuesta por dióxido de silicio hidratado (sílice opalino). Otra característica de las células vegetales es la ausencia de centriolos, propios de la célula animal, aunque estas también forman microtúbulos. En su lugar poseen una masa fibrosa difusa con una composición similar al material pericentriolar. Finamente, también como específicos de la célula vegetal, los cloroplastos, en los vegetales fotosintetizadores eucariotas, algas y plantas, son los encargados de la fotosíntesis. Los platos o plastidios son orgánulos presentes en las células de las plantas y de las algas, aunque también se pueden encontrar en algunos animales marinos. Evolutivamente son el resultado de procesos de endosimbiosis, es decir, una bacteria con capacidad de fotosíntesis, parecidas a las cianobacterias actuales, se fusionó o fue engullida por otra célula y en vez de ser digerida se conviertió en un simbionte (endosimbionte), lo que supone transferir la mayoría de los genes al núcleo de la célula hospedadora. A partir de ese proceso inicial se generaron los diferentes tipos de plastos que encontramos hoy en día. La función de los plastos es variada: fotosíntesis, síntesis de aminoácidos y lípidos, almacén de lípidos, azúcares y proteínas,

dar color a diferentes partes de la planta, sensores de la gravedad, participan en el funcionamiento de los estomas, entre otras. Son orgánulos con una doble membrana y un espacio intermembranoso entre ellas. Interiormente poseen más compartimentos membranosos como los tilacoides de los cloroplastos o los túbulos de los cromoplastos. Tienen ADN en su interior y la maquinaria para dividirse, al igual que ocurre con las mitocondrias, aunque están sometidos al control de los genes nucleares. Los plastos no se crean de nuevo, sino que provienen de otros que ya existen. Así, deben transmitirse en los gametos durante la fecundación y, por tanto, todos los plastos de una planta provienen de los plastos del embrión, que se denominan proplastidios. Los proplastidios también se encuentran en las células meristemáticas de las plantas adultas, los cuales se dividen antes de la división de la célula meristemática para asegurar que habrá proplastidios en las dos células hijas. Cuando la célula se diferencia también lo hacen los proplastidios, originando los diferentes tipo plastos de la planta: leucoplastos (elaioplatos, amiloplastos, proteoplastos), cloroplastos y cromoplastos. Los cloroplastos pueden desdiferenciarse y convertirse en otros tipos de plastos, un proceso de diferenciación que puede ir en las dos direcciones. Bibliografía. Jarvis P, López-Juez E. 2013. Biogenesis and homeostasis of chloroplasts and other plastids. Nature reviews in molecular and cell biology. 14: 787-802. Ljubesic N, Wrischer M, Devidé Z. 1991. Chromoplasts--the last stages in

plastid development. International journal of development biology. 35: 251-258. Wise RR. 2006. The diversity of plastid form and function. In The structure and function of plastids. Springer Netherlands. p. 3-26. OBJETIVOS: OBJETIVOS GENERALES:  Reconocer que las células y tejidos constituyen niveles de organización de la materia viva  Identificar mediante observación con el microscopio óptico, algunas organelas que se encuentran en el citoplasma de células vegetales, las cuales se forman a partir de organelas precursores llamadas proplástidos. OBJETIVOS ESPECÍFICOS:  Reconocer la estructura del corcho, células de la epidermis de cebolla, y establecer diferencias entre ellas  Comprender la importancia de los colorantes en la identificación de estructuras celulares.  Identificar cloroplastos, cromoplastos, amiloplastos en el citoplasma de células vegetales y establecer diferencias entre ellos. MATERIALES  Microscopios  Porta-objetos  Cubre objetos  Cuchilla o bisturí  Pinzas de disección  Azul de metileno  Cebolla Corcho  Elodea  Tomate maduro  Papa  Plátano  Yuca  Maíz ( harina )  Bisturí o cuchilla

 Lugol 3.3 PROCEDIMIENTO: 3.3.1 Estructura del corcho: a. Con una cuchilla o bisturí haga cortes muy finos hasta obtener uno extradelgado para que pueda ser claramente observado al microscopio. b. Coloque su mejor corte sobre un portaobjeto, agréguele una gota de agua, ubique el cubre-objeto y enfoque con menor y mayor aumento. Esquematice sus observaciones y compare con la figura No. 3.1

Figura No. 3.1 Células del corcho Células de epidermis de cebolla a. Parta longitudinalmente una cebolla en cuatro pedazos; de uno de éstos, separe una de las hojas de la parte interna. b. Con unas pinzas de disección, o en su defecto, la uña, desprenda la tenue capa delgada y transparente adherida a la cara interna (cóncava) de la hoja. c. Deposite un pequeño fragmento de epidermis en un porta-objeto, extiéndalo evitando que se formen arrugas, adiciónele una gota de agua, ubique el cubre - objetos y observe con menor y mayor aumento. Esquematice sus observaciones.

d. Tome otro fragmento de epidermis de cebolla, sitúelo en el porta objeto, agréguele dos gotas de colorante (azul, metileno o lugol) y póngale el cubreobjeto. Observe con mayor o menor aumento y dibuje. Identifique las estructuras observadas. e. ¿Qué diferencias observó entre el primer y segundo enfoque de células de cebolla? Compare las observaciones con la Figura No. 3.2

¿Cómo se llaman las estructuras que observa usted en el citoplasma de las células de Elodea? ¿Observa usted algún movimiento en el citoplasma de éstas células? Cromoplastos: Seleccione un tomate no muy maduro y utilizando una cuchilla, haga una incisión y separe una parte del epicarpio o cáscara. Extraiga una porción de pulpa o mesocarpio con el extremo de un palillo y espárzalo sobre un porta objeto seco y limpio (sin agua). Coloque el cubre objeto sobre el preparado sin hacer presión. Observe al microscopio con menor y mayor aumento.

Figura No 3.2. Epidermis de cebolla Para observar otras ilustraciones de epidermis de hojas haz clic aquí. Cloroplastos: Deposite una hojita de Elodea en un porta objeto agréguele dos o tres gotas de agua, cúbrala con un cubre objetos y observe con menor y mayor aumento. Es importante evitar que la hoja se seque, y para ello, deposite gotas de agua en los bordes del cubre objeto conforme se necesite. Dibuje.

Figura No. 3.3 Cloroplastos Para observar la hoja de Elodea teñida con lugol ve a la imagen 3.7 de la galería.

Figura No. 3.4 Cromoplastos de Tomate

Esquematice sus observaciones e identifique las estructuras observables. ¿Visualiza estructuras particularmente diferentes a las observadas en otras células? Amiloplastos: a. Parta con una cuchilla una papa, hágale un pequeño raspado, deposítelo en el porta objeto, agregue una gota de agua y coloque el cubre objeto, observe con menor y mayor aumento. Dibuje. b. Deposite otra muestra de raspado de papa en un porta objeto, agréguele una o dos gotas de lugol diluido y coloque el

cubre objeto. ¿Que cambios nota con respecto a la primera observación? c. Observe en su orden los amiloplastos de plátano, yuca y maíz siguiendo rigurosamente los procedimientos a y b. Dibuje la forma de éstos amiloplastos y compare con la figura 3.5.

Vista 10x10 del corcho

Figura No. 3.5. Amiloplastos PARA OBSERVAR UNA REPRESENTACIÓN ARTÍSTICA DE UNA CELULA VEGETAL HAZ CLIC AQUÍ RESULTADOS.  Estructura del corcho. A partir de muestras de corcho se buscó identificar las células presentes al igual que estructura. Se logró observar que en un objetivo de 40x10 el corcho posee una estructura en forma de pequeñas celdas unidas entre sí, parecida al panal de una abeja, así como también la no presencia de un núcleo. Vista 4x10 del corcho.

Vista 40x10 del corcho

Comparando los resultados obtenidos con la imagen 3.1. Podemos concluir que en ambas imágenes podemos identificar la presencia de pared celular, solo es observable el campo vacío entre una pared celular y otra donde se encontraba el citoplasma, pero a causa de que la célula está muerta no se aprecian ningún organelo. 

Células de la epidermis de la cebolla

 Cebolla húmeda en agua A partir de la muestra de epidermis en la cebolla se buscó identificar las células vegetales presentes. No se logró identificar de manera clara la forma de la célula, así como membrana y pared celular. A 10x10 se puedo identificar la presencia de pequeños círculos o núcleo.

Vista 40x10 cebolla en agua

Vista 4x10 cebolla en agua

Vista 10x10 cebolla en agua

 Cebolla con lugol Al tomar una segunda muestra de la cebolla y teñirla con lugol logramos identificar de manera precisa y clara la epidermis de la cebolla son de forma ovalada y algo grande, así como también se logró identificar su membrana celular y la presencia de núcleos en cada una de ellas. Vista 4x10 cebolla con lugol

separa a cada una de las células, así como también la presencia del núcleo, tamaño y estructura de las mismas. Mientras que en la muestra de cebolla en agua no se logra visualizar con claridad la estructura de la misma.  Cloroplastos. Con una muestra de plata de elodea se buscó la presencia de células vegetales, así mismo se logró identificar su membrana celular al igual que otros organelos presentes en la misma. Vista 10x10 cebolla con lugol

Vista 4x10 elodea

Vista 40x10 cebolla con lugol

Vista 10x10 elodea

¿Qué diferencias observó entre el primer y segundo enfoque de células de cebolla? La diferencia más notable es la adecuada visualización de los núcleos y pared celular de la epidermis de la cebolla. En la muestra con lugol se logra visualizar con completa claridad la pared celular que

Vista 10x10 elodea

¿Cómo se llaman las estructuras que observa usted en el citoplasma de las células de Elodea? En los objetivos de 40x y 100x se logra identificar de manera clara y precisa la presencia de cloroplastos que son los orgánulos encargados de realizar la fotosíntesis, de igual manera de logro visualizar el movimiento que estos realizan

Vista 10x10 tomate

¿Observa usted algún movimiento en el citoplasma de estas células? Se logra visualizar los movimientos que realizan los cloroplastos en el citoplasma alrededor de la muestra de elodea, este movimiento se la llama ciclosis, que es el movimiento circular causado por el cambio en el estado de la célula y ante estímulos externos como la luz.  Cromoplastos A partir de una muestra de tomate de busco observa los distintos organelos presentes en él, como lo es el núcleo y los cromoplastos que son los que le da el pigmento característico del tomate. Se tomaron muestras a 10x y 40x donde se nos permitió una visualización de su estructura de forma ovalada, así como la presencia de núcleos y cromoplastos alrededor del citoplasma. Vista 4x10 tomate

Vista 40x10 tomate

¿Visualiza estructuras particularmente diferentes a las observadas en otras células? A diferencias de las anteriores observaciones en la estructura de las células de tomate de logra observar la forma de manera circular, así como un mayor tamaño. La presencia de

cromoplastos característicos a su coloración y la presencia de vacuolas. 

Amiloplastos

- Muestra de papa con agua Vista 4x10 papa con agua

- Muestra de papa con Lugol Al adicionar a la muestra el reactivo de Lugol se logró observar como los leucoplastos se tiñeron de un color morado, haciéndose mucho más visible la membrana. Estas estructuras reciben el nombre de amiloplastos los cuales almacena almidón de reserva en la papa. Vista 4x10 papa con lugol

Vista 10x10 papa con agua Vista 10x10 papa con lugol

Vista 40x10 papa con agua Vista 40x10 papa con lugol

¿Qué cambios nota con respecto a la primera observación? Pudimos observar la coloración de los amiloplastos una vez colocado el reactivo de Lugol, así se logró una mejor visualización de su estructura - Muestra de yuca con agua En la observación de la Yuca se apreció el movimiento que hacían los amiloplastos o granos de almidón hacia la parte más húmeda de la porción cortada, a este movimiento se le llama caudal, y su forma puede ser esférica o pueden ser alargados pero en nuestro caso fueron de forma esférica y cuando se acaba el agua estos amiloplastos dejan de moverse. Vista 4x10 yuca con agua

Vista 40x10 yuca con agua

- Muestra de yuca con lugol 4x10 observar la muestra de la Yuca en el microscopio pudimos observar que esta contenía como muchos puntos como entre color morado y negro porque se pintaron con la gota de lugol para ser observables pero identificamos que estos son los amiloplastos que son un tipo de leucoplasto que almacena almidón, esto quiere decir que lo que observamos como puntosson los amiloplastos de la Yuca los cueles almacenan almidón de reserva. Vista 4x10 yuca con lugol

Vista 10x10 yuca con agua

Vista 10x10 yuca con lugol

Vista 40x10 yuca con lugol

Vista 10x10 plátano con agua

Vista 40x10 plátano con agua

Diferencias entre las dos muestras Pudimos observar a partir de los esquemas los amiloplastos en cada uno de las muestras se diferencia en su tamaño, forma y estructura. - Muestra plátano con agua Al observar la muestra de plátano en uno de los objetivos 4x10 se pudo contemplar que esta contenía un conjunto de bolsas de distintos tamaños y algunas muy juntas, dichas bolsas se pudieron identificar como aminoplastos, en los otros dos objetivos se pudieron observar mucho más cerca. Vista 4x10 plátano con agua

-Muestra platano con lugol Al observar esta muestra con el objetivo 4x10 estas contenían las mismas bolsas que las muestras con agua pero con un tono obscuro que las hacía ver muy formadas y más detalladas que cuando fueron observadas con agua, la tinción con lugol no ayudo a poder identificarlas de manera más clara ya que la función del

lugol en los amiloplastos es un método que se usa para identificar polisacáridos como el almidón. Vista 4x10 platano con lugol

Vista 10x10 platano con lugol

Diferencias entre las dos muestra No había gran diferencia entre las muestras, solo que en las muestras montadas con lugol gracias al color obscuro que toman los amiloplastos se pueden ver mucho más detalladas que en las muestras con agua, pero su forma y tamaño es igual. - Muestra maíz con agua Al observar la muestra de maíz en uno de los objetivos 4x10 se pudo contemplar que esta contenía un conjunto de bolsas muchos más pequeños que las otras muestras de distintos tamaños y algunas muy juntas, dichas bolsas se pudieron identificar como aminoplastos, en los otros dos objetivos se pudieron observar mucho más cerca. Vista 4x10 maíz con agua Vista 10x10 maíz con agua

Vista 40x10 platano con lugol Vista 40x10 maíz con agua

-Muestra maíz con lugol

Vista 4x10 maíz con lugol

Con las otras prácticas se hicieron comparaciones de montajes y los resultados fueron los esperados.

Vista 10x10 maíz con lugol Vista 40x10 maíz con lugol

DISCUSION DE RESULTADOS El empleo de colorantes para la observación de células representa una gran ventaja, ya que, gracias a ellas se logra una mayor visualización de las estructuras, tamaños y formas de los distintos organelos presentes en la célula vegetal, para obtener así resultados esperados. Realizando comparaciones con las practicas ejecutadas en la guía del laboratorio pudimos concluir con los resultados de las pruebas de las células de corcho que ambos resultados son lo esperado a partir de las muestras tomadas. De igual manera se hicieron comparaciones con las pruebas de la epidermis de la cebolla de la guía de laboratorio; los resultados obtenidos fueron diferentes debido a la toma de la muestra; Mientras que nuestros resultados arrojaban estructuras ovaladas de tamaño mediano, los resultados de la guía obtuvieron estructura de forma alargada en forma de celda, aun así, no se impidió llegar a los resultados esperados. Siempre se debe tener en cuenta la cantidad de reactivo a utilizar para la tinción de las células porque al emplearse más del adecuado causaría una mala visualización de las células debido a la alta concentración del reactivo.

Recomendaciones Para realizar las prácticas de laboratorio de la célula vegetal, hay que tener en cuenta algunas recomendaciones: • Tomar la muestra asignada por la materia en este caso la guía hacer los procedimientos de forma segura para poder tener un buen resultado...


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