Plasmolyse PDF

Preview

Summary

practicum plasmolyse biologie BA2...

Description

Plasmolyse methode voor de bepaling van de osmotische waarde van een cel Inleiding Het doel van het practicum is het bepalen van de grensplasmolyse van Allium sp cellen: het punt waarop de osmostische potentiaal van de omgevende oplossing en celinhoud gelijk zijn. = punt waarop 50% geplasmolyseerd Ψπ = miRT (m= concentratie omgevende oplossing (mol/kg); i = ionisatieconstante; R = gasconstante (8,32 J/mol.K); T = absolute temperatuur (K))

Methode en materialen Hiervoor wordt naar de cursus vorm en functie planten verwezen (p.159 - p.163). Aanmaak oplossingen  100mL sucrose stockoplossing MM (gram/mol) C (mol/L) V (L) n(mol) = C*V m(gram) = n*MM 342,3 1 0,1 0,1 34,23 Voor het maken van de 1M sucrose stockoplossing wordt 34,23 gram sucrose afgewogen en opgelost in 100 mL gedestilleerd water. 

Verdunningen

Cverdund (M)

Vverdund (mL)

Converdund (M)

Vonverdund (mL) = (Cverd.*Vverd.)/Conver

Vged. Water (mL) = Vverd. – Vonverd.

d.

0,6 10 1 6 4 0,5 10 1 5 5 0,4 10 1 4 6 0,3 10 1 3 7 0,2 10 1 2 8 Het uitgerekende volume onverdunde oplossing wordt telkens gepipetteerd en aangelengd met het uitgerekende volume gedestilleerd water. Bijvoorbeeld voor een concentratie van 0,6M geeft dit: 6mL stockoplossing aanlengen met 4mL gedestilleerd water. 

Verdunningsreeks tussen 0,5M en 0,6M

Cverdund (M)

Vverdund (mL)

Converdund (M)

Vonverdund (mL) = Vged. Water (mL) = (Cverd.*Vverd.)/Converd. Vverd. – Vonverd. 0,58 10 1 5,8 4,2 0,56 10 1 5,6 4,4 0,54 10 1 5,4 4,6 0,52 10 1 5,2 4,8 Het uitgerekende volume onverdunde oplossing wordt telkens gepipetteerd en aangelengd met het uitgerekende volume gedestilleerd water. Bijvoorbeeld voor een concentratie van 0,58M geeft dit: 5,8mL stockoplossing aanlengen van 4,2mL gedestilleerd water.

Resultaten  Delen geplasmolyseerde cel celwand plasmamembraan

cytoplasma

vacuole

celkern



Vacuüm-infiltratie en plasmolyse

Concentratie testoplossing (M) 0,6 0,6 0,5 0,5 0,4 0,4 

0 20 0 20 0 20

Aantal cellen nog turgescent 50

Aantal cellen geplasmolyseerd 0

Aantal cellen nog turgescent

Aantal cellen geplasmolyseerd

Bepalen van de grensplasmolyse

Concentratie testoplossing (M) 5,8 5,8 5,6 5,6 5,4 5,4 5,2 5,2 

Tijd verstreken (min)

Tijd verstreken (min) 0 20 0 20 0 20 0 20

Deplasmolyse

Toestand cellen bij testoplossing van 5,8M

Toestand cellen na verdunning door gedestilleerd water

Geschatte tijd benodigd deplasmolyse (min)

16



Osmotische potentiaal celsap

Ψπ = miRT 

Berekening m

M = C*V = 0,52mol/L * 0,01L = 0,0052mol 0,0052mol * 342,3g/mol = 1,77996 gram 10mL = 10g = 0,01kg [1,77996gram/0,01kg] *100 = 177,996 g/kg   

i= ionisatieconstante = 1 R = gasconstante = 8,31 J/mol*K T = absolute temperatuur = 293K (20°C)

Ψπ = (177,996g/kg) * (1) * (8,32J/mol*K) * (293K) = 433 911,53 g*J/kg*mol (????????)...