Xpert® HIV-1 Qual Assay (fabricado por Cepheid AB) para el diagnóstico rápido de VIH en bebés PDF

Preview

Summary

Ensayo final obligatorio sobre pruebas diagnósticas...

Description

Xpert® HIV-1 Qual Assay (Cepheid AB) para el diagnóstico rápido de VIH en bebés Temas Selectos I: Desarrollo de Pruebas Clínicas de Laboratorio

Abstract: El virus del VIH causa una enfermedad que ha sido responsable de la muerte de millones de personas en el mundo desde hace varias décadas. Xpert es un método con una alta sensibilidad y especificidad para lograr este diagnóstico, además de que puede llegar a detectar hasta 40 copias/ml. Xpert es un test in vitro de diagnóstico, diseñado para la cuantificación rápida de partículas de HIV-1 en el plasma sanguíneo del paciente infectado. El método más utilizado en el diagnóstico de bebés es el PCR convencional, el cual es utilizado hasta los 18 meses de edad, de ahí en adelante el método aplicado es Western Blot. Para poder realizar un diagnóstico definitivo confiable, es necesario hacer al menos dos pruebas en los mismos días (es decir, repetir el estudio) y una prueba de confirmación a los 2 meses.

Palabras clave: Xpert, RT PCR, PCR convencional, VIH, sensibilidad, especificidad.

1

Xpert® HIV-1 Qual Assay (Cepheid AB) para el diagnóstico rápido de VIH en bebés El diagnóstico rápido y preciso de VIH en bebés es de suma importancia actualmente, ya que en 2015 de los más de 1.2 millones de bebés que nacieron de madres seropositivas en todo el mundo, poco más del 50% tuvo acceso a una prueba diagnóstica y, un menor porcentaje aún, tuvo acceso al tratamiento adecuado y temprano de la enfermedad10. Por lo tanto, el propósito principal del presente ensayo es analizar el fundamento y técnica de la prueba Xpert HIV-1 Qual Assay, su capacidad de proporcionar resultados exactos a los pacientes (sensibilidad y especificidad) y compararlo con el método tradicional utilizado para el diagnóstico en bebés (PCR convencional hasta los 18 meses). Fundamento y Método de la Prueba: La Organización Mundial de la Salud (OMS) precalifica dos pruebas diagnósticas de vanguardia, que podrían facilitar la detección rápida y poco invasiva en bebés y niños, como lo menciona la Organización de las Naciones Unidas SIDA (ONU SIDA, 2015): “La prueba Xpert funciona con la misma tecnología empleada para diagnosticar la tuberculosis. Para la detección del VIH sólo se necesita un cambio de cartucho, lo que la convierte en una plataforma rentable que se puede utilizar para detectar diversas enfermedades. Xpert necesita una fuente de alimentación continua, pero muy poca formación o mantenimiento y puede utilizarse con muestras de sangre o pruebas con sangre seca en papel”. Este tipo de prueba diagnóstica tan innovadora y con un diseño que permite realizar el diagnóstico apropiado de diversas enfermedades con un sólo equipo, pero diferentes cartuchos, es importante en lugares donde no se tienen los medios económicos o acceso a personal calificado, ya que facilita el proceso de detección en mucho menos tiempo, con resultados exitosos. La tecnología de Xpert se basa en una prueba previamente conocida (PCR de transcripción reversa, o RT PCR), lo que la hace tan innovadora es la automatización del equipo, la rapidez con la que nos proporciona resultados

2

confiables y la facilidad con que se pueden realizar varias pruebas en una fracción de tiempo. Xpert es un test in vitro de diagnóstico, diseñado para la cuantificación rápida de partículas de HIV-1 en el plasma sanguíneo del paciente infectado. Aplica la tecnología del PCR de transcripción reversa (RT PCR) y busca los subtipos A, B, C, D, AE, F, G, H, AB, Imagen 1. Cartucho para VIH-1 y el equipo Xpert Qual4.

AG, J y K del grupo M, y los grupos N y O. Es capaz de detectar desde 40 copias por ml, hasta

10 millones8. El diagnóstico se lleva a cabo en un promedio de 90 minutos, además provee un resultado de ácidos nucleicos totales del RNA y DNA pro viral, en un sólo cartucho integrado3. La técnica utilizada por Cepheid para el diagnóstico de VIH-1 es una técnica ampliamente conocida y practicada, la cual se basa en el empleo de la enzima transcriptasa reversa, como expone Rodríguez G (2014): “El PCR de transcripción reversa (RT PCR) es una técnica que permite sintetizar DNA complementario (cDNA) a moléculas de RNA usando para ello la enzima transcriptasa reversa. El cDNA obtenido es la cadena complementaria de la cadena molde de RNA. Los primers randomizados aseguran que la primera hebra de síntesis se produzca eficientemente a partir de todas las moléculas de RNA presentes, tanto RNAm (mensajero) como RNAr (ribosómico)”.

Imagen 2. Ilustración del proceso de RT PCR11.

3

Sensibilidad y Especificidad: De acuerdo a los resultados obtenidos por Michaeli M, et. al. (2015), la sensibilidad de Xpert Qual Assay es de 92.7-100% a un intervalo de confianza (CI) de 95% y la especificidad es de 92.6-100%, igualmente a un CI de 95%. El intervalo de confianza es, según datos proporcionados por MiniTab 19 (2019), un rango de valores, derivado de los estadísticos de la muestra, que posiblemente incluya el valor de un parámetro de población desconocido. Por otro lado, Ibrahim M, et. al. (2018) obtuvieron resultados similares en un estudio realizado a recién nacidos (0-3 días de edad) en Botsuana, donde se calcula una sensibilidad de 93.3% (68.1-99.8%) con un CI del 95% y una especificidad de 100% (96.1-100%) con un CI del 95%. Además, recalcan el éxito del método para el diagnóstico en recién nacidos comentando que un bebé clasificado como “low positive” (...