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HEMATOLOGIA 1. Conteo de glóbulos rojos Es un examen de sangre que mide la cantidad de glóbulos rojos de una persona. Los glóbulos rojos contienen hemoglobina, que transporta oxígeno. La cantidad de oxígeno que los tejidos corporales reciben depende de cuántos glóbulos rojos se tenga y de qué tan bien funcionen. El conteo de glóbulos rojos casi siempre forma parte de un CSC (conteo sanguíneo completo).Este examen puede ayudar a diagnosticar diferentes tipos de anemia (bajo número de GR) y otros problemas de salud que afectan los glóbulos rojos. Afecciones adicionales por las cuales se puede realizar el examen: enfermedad que daña los vasos sanguíneos del riñón (síndrome de Alport), cáncer de los glóbulos blancos (macroglobulinemia de Waldenstrom), trastorno por el cual los glóbulos

rojos

se

descomponen

más

pronto

de

lo

normal

(hemoglobinuria paroxística nocturna), trastorno de la médula ósea por el cual dicha médula es reemplazada por tejido cicatricial (mielofibrosis) Para el conteo de eritrocitos, se usan métodos sistemáticos que son más rápidos y precisos, y los métodos manuales. Todo método manual de recuento celular incluye 3 fases  :Dilución de la sangre  Muestreo de la sangre diluida en un volumen  Recuento de células en ese volumen Para determinar la densidad de las células se emplean diferentes técnicas, desde la relativamente simple cámara de contaje celular de la que existen numerosas variantes, entre ellas la que utiliza la cámara de Neubauer. Para el conteo de eritrocitos, es necesario diluir la sangre con el líquido de Hayem, en una proporción exacta. Luego se examina en el microscopio con una cantidad pequeña colocada en la cámara de Neubauer, contando el número de elementos que se encuentran en el retículo de la cámara

y mediante una

operación se obtiene el número total. Para la realización del conteo manual se necesita un líquido de dilución, una cámara de recuento, una pipeta diluidora y un microscopio.

1.1.

Reactivo de Hayem

Solución de cloruro de mercurio isotónica para conteo de eritrocitos en la cámara. El líquido de Hayem hace que la solución obtenga el grado de isotónica permitiendo que los eritrocitos se mantengan completos, mientras que los leucocitos se lisan por acción de la concentración de la solución al penetrar al núcleo. Se usa en el recuento de Hematíes realizando dilución de la sangre con una solución isotónica (Hayem) en porciones exactas.

1.2.

Solución fisiológica

La solución de cloruro de sodio al 0,9% o solución salina normal, erróneamente conocida como suero fisiológico o solución fisiológica, es una disolución acuosa de sal en agua, hasta cierto grado compatible con los organismos vivos debido a sus características definidas de

osmoticidad, pH y fuerza

iónica. Se usa como liquido diluyente isotónico para el conteo de glóbulos rojos para evitar la lisis de los hematíes al igual que el líquido de Hayem.

2. Concentración de hemoglobina La hemoglobina es la proteína presente en los glóbulos rojos encargada de suministrar oxígeno a las células mientras que el hematocrito es el porcentaje de glóbulos rojos con respecto al volumen total de la sangre. Una hemoglobinometría se puede realizar por varios métodos: 

Colorimétricos



Gasométricos (Determina la cantidad de O2 unido a la hemoglobina)



Densitométricos (Compara muestras de sangre con disoluciones de H2SO4)



Químicos (Determina el hierro unido a la hemoglobina)

Los métodos como la hematina ácida son muy subjetivos, motivo por el que el comité para la estandarización de la hematología propuso este método como un estándar para determinar la hemoglobina. La cianmetahemoglobina es un método muy preciso, muy exacto y de fácil estandarización. Método de la Cianmetahemoglobina Este método se basa en tres pasos: 1. Hemolizar la muestra sanguínea problema para liberar la hemoglobina

del interior de los hematíes y obtener así una disolución de hemoglobina con la cual trabajar. 2. Convertir la hemoglobina en cianmetaHb por acción de una mezcla de ferricianuro potásico y cianuro potásico. La cianmetaHb es una sustancia estable de color rojizo/pardo. 3. Determinar la absorbancia de la disolución de cianmetahemoglobina con una lectura a 540 nm de longitud de onda. Hasta hace pocos años se utilizaba el reactivo de Drabkin, un reactivo preparado a base de ferricianuro potásico y cianuro potásico. En la actualidad se utiliza el reactivo de determinación de la hemoglobina, que es un reactivo 50 veces más concentrado que el anterior. La hemoglobina, en contacto con ferricianuro potásico, se oxida dando lugar a metahemoglobina. Ésta, en contacto con cianuro potásico, se transforma en cianmetahemoglobina.

2.1.

REACTIVO DE DRABKIN

Reactivo que contiene cianuro y ferrocianuro potásico (reactivo de Drabkins), que oxida la hemoglobina a metahemoglobina la cual a su vez

pasa

a

cianometahemoglobina.

La

intensidad de color de este compuesto se mide fotocolorimétricamente.

Los

resultados

se

llevan a una curva estándar realizada con soluciones

de

cianometahemoglobina

comercial, de donde se extrapolan las concentraciones de hemoglobina de las muestras problema.

3. Conteo de glóbulos blancos Es un examen que mide el número de glóbulos blancos (GB) en la sangre. Los glóbulos blancos ayudan a combatir infecciones y también se denominan leucocitos. Existen cinco grandes tipos de estos glóbulos:     

Basófilos Eosinófilos Linfocitos (células T y células B) Monocitos Neutrófilos

Valores normales El número normal de glóbulos blancos en la sangre es 4,500 a 10,000 por microlitro (mcL). Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre diferentes laboratorios. Significado de los resultados anormales 

CONTEO BAJO DE GLÓBULOS BLANCOS (CGB) Un número bajo de glóbulos blancos se denomina leucopenia. Un conteo de glóbulos blancos de menos de 4,500 está por debajo de lo normal

Un adulto que tenga menos de 1,700 neutrófilos en un microlitro de sangre tiene un conteo bajo de glóbulos blancos. Si hay menos de 500 neutrófilos en un microlitro de sangre, el riesgo de infección se vuelve aún más alto. Esto puede deberse a:      

Deficiencia o insuficiencia de la médula ósea Fármacos para el tratamiento del cáncer u otros medicamentos Ciertos trastornos autoinmunitarios como el lupus Enfermedad del hígado o del bazo Ciertas enfermedades virales, como mononucleosis Cánceres que dañan la médula ósea



Infecciones bacterianas muy graves

CONTEO ALTO DE GLÓBULOS BLANCOS Un alto número de glóbulos blancos se denomina leucocitosis. Puede deberse a:        

Anemia Ciertas drogas o medicamentos (ver lista más abajo) Consumo de cigarrillo Infecciones, casi siempre aquellas causadas por bacterias Enfermedad inflamatoria (como artritis reumatoidea o alergia) Leucemia Estrés físico o mental intenso Daño tisular (por ejemplo, quemaduras)

3.1.

Reactivo de Turks

Solución de violeta de genciana ácido acético. Lista para su uso. Para conteo de leucocitos en Cámara Neubauer. Para el recuento de glóbulos blancos se utiliza un líquido de dilución llamado líquido diluyente de Türk, que se compone de las siguientes sustancias: Por cada 100 ml de agua destilada: 

2 ml de ácido acético glacial



1 ml de solución acuosa de violeta de genciana al 1%

Función del líquido de Türk: El ácido acético produce lisis de los eritrocitos sin alterar a los leucocitos. El violeta de genciana tiñe el núcleo de los leucocitos para que estos puedan observarse mejor. El violeta de genciana puede ser sustituido por azul de metileno Es una solución acuosa de Ácido Acético AL 3%, con una cantidad de Azul de Metileno suficiente para dar un color Azul pálido.

La solución hipotónica de Ácido Acético destruye los eritrocitos. El colorante Azul de Metileno permite observar mejor los glóbulos a los que tiñe ligeramente.

4. Conteo de plaquetas Es un examen de laboratorio que mide la cantidad de plaquetas que se tiene en la sangre. Las plaquetas son partes de la sangre que ayudan a la coagulación. Son más pequeñas que los glóbulos rojos y los blancos. El recuento de plaquetas puede realizarse de forma aproximada contando los trombocitos presentes en varios campos de un frotis sanguíneo observado al microscopio. Sin embargo, también se puede hacer un recuento de plaquetas más exacto mediante el empleo de una cámara de recuento El recuento de plaquetas mediante el examen de un frotis sanguíneo permite, además, el estudio de la morfología de éstos.

Resultados anormales CONTEO BAJO DE PLAQUETAS Un conteo bajo de plaquetas está por debajo de 150,000 (150 × 109/L). Si su conteo de plaquetas es inferior a 50.000 (50 × 109/L), su riesgo de sangrado es mayor. Incluso las actividades cotidianas pueden causar hemorragia. Un conteo de plaquetas más bajo de lo normal se denomina trombocitopenia. El bajo conteo puede dividirse en 3 causas principales: 

No se están produciendo suficientes plaquetas en la médula ósea



Las plaquetas se están destruyendo en el torrente sanguínea



Las plaquetas se están destruyendo en el bazo o el hígado

CONTEO ALTO DE PLAQUETAS Un conteo alto de plaquetas es de 400,000 (400 × 109/L) o superior. Una cantidad de plaquetas más alta de lo normal se llama trombocitosis. Esto quiere decir que su cuerpo está produciendo demasiadas plaquetas. Las causas pueden incluir: 

Un tipo de anemia en la cual se destruyen glóbulos rojos en la sangre antes de lo normal (anemia hemolítica)



Deficiencia de hierro



Después de ciertas infecciones, cirugía mayor o traumatismo



Enfermedad de la médula ósea llamada neoplasia mielo proliferativa



Extirpación del bazo.

4.1.

Tinción panóptica

Es una de las tinciones más utilizadas en la actualidad porque combina la calidad de los métodos clásicos (Giemsa, etc.) con una gran rapidez (tan solo 15 segundos). El procedimiento se basa en realizar una serie de inmersiones sucesivas de la extensión en las diferentes soluciones, de una manera rápida y sencilla. El método consta de tres soluciones diferentes. La solución nº 1 corresponde al fijador (contiene metanol). La solución nº 2 (color rojo) contiene eosina rápida y la solución nº 3 (color azul) contiene azul rápido Debido a la interacción entre los colorantes se pueden diferenciar los núcleos y los gránulos de color violeta.

4.2.

Oxalato de amonio

El oxalato de amonio es una sal de amonio y ácido oxálico que se combinan en una relación 2:1. Se produce a partir de una reacción de neutralización en agua del ácido oxálico, H2C2O4, con el carbonato de amonio o hidróxido de amonio El oxalato de amonio se utiliza como reactivo

analítico

y

agente

reductor,

usándose en la cuantificación de la concentración plasmática de calcio y plomo. Además, el oxalato de amonio se usa como un agente dispersante en estudio de las interacciones de la superficie plaquetaria. Diluyente en la prueba para recuento directo de plaquetas. En el recuento de plaquetas se emplean líquidos de dilución que lisen los hematíes y que impidan la agregación plaquetaria. Uno de los líquidos diluyentes que se pueden usar es la disolución de 1 gramo de oxalato amónico en 100 ml de agua destilada...