LP 4 TGO TGP Biochimie PDF

Preview

Summary

LP 4 TGO TGP - Note de curs 4...

Description

LP 4

Dozarea activităţii transaminazelor serice: TGP, TGO / 3 ore Determinarea activităţii TGP și TGO Principiul metodei, interpretarea rezultatelor, valori normale, variaţii patologice. Transaminazele sunt un grup de enzime care fac parte din clasa transferazelor. Transaminazele catalizează transferul grupării amino de pe un aminoacid pe un αcetoacid cu formarea unui alt aminoacid. Transaminazele cu importanţă clinică sunt: ALAT (alaninaminotransferaza) sau TGP şi ASAT (Aspartataminotransferază) sau TGO. TGP Alanina + acid alfa-cetoglutaric = acid piruvic + acid glutamic TGO Acid aspartic + acid alfa-cetoglutaric = acid oxalacetic + acid glutamic Valori normale si variatii patologice Enzima Valori normale Variatii patologice

TGP (UI) 2 – 16,5; copii 13 cresteri mari hepatita virala acuta hepatopatia toxica cu necroza cresteri moderate hepatite cronice, ciroze, icter mecanic, ficat de stază acută.

TGO (UI) 2 – 20; copii 28 cresteri mari 10-100 ori infarct, hepatită virală, hepatopatii toxice cresteri moderate hepatite cronice, afecţiuni distrofice musculare, anemii hemolitice severe, ictere colestatice.

Cresterea aminotransferazelor in afectiunile hepatice: -

-

Cresterea TGP este mai importantă decât creșterea TGO in hepatitele infectioase datorita lezarii membranelor celulare Cresterea TGO este mai importanta decat cresterea TGP in hepatopatiile infiltrative datorita lezarii membranelor celulare si mitocondriale In afectiunile musculare cresterile TGO sunt mai mari decat TGP

Determinarea activităţii TGP Determinarea TGP prin metoda enzimatica Principiul metodei Pentru determinarea TGP se utilizează ca substraturi L-alanina si alfa-ceto-glutaratul din care rezultă acidul piruvic. Acidul piruvic in prezenta LDH va reacționa cu NADH+H+ si se formează NAD+ si Llactat. Variatia absorbanței măsurată la lungimea de undă de 340nm proporţională cu activitatea enzimei.

este direct

Alanina + acid alfa-cetoglutaric = acid piruvic + acid glutamic Piruvat + NADH+H+ = L-lactat + NAD+ Proba Ser nehemolizat (hematiile conțin de 10-20 de ori mai multe transaminaze decât serul) Tehnica de lucru Intro eprubetă se pipetează 1ml amestec reactivi R1+R2 (1/1) si 100 μl proba. Se agită si se incubeaza 1 min la 37grd. C. Se citește variația absorbanței (EP ) la lungimea de undă de 340nm față de apă distilată, in cuve de 1 cm, timp de 3 min. Calcul Se calculează activitatea enzimatică a TGP exprimată prin variația absorbanței pe minut ∆A/min Cp U/l = ∆A/min x 1750, λ = 340 nm Cp U/l = ∆A/min x 1790, λ = 334 nm Cp U/l = ∆A/min x 3240, λ = 365 nm Valori normale Adulţi: 2 – 16,5 U/I Copii până la 5 ani: 0,2 - 13 U/I Variaţii patologice Valori crescute: hepatită virală acută, hepatopatia toxică cu necroză, Creşteri moderate: hepatite cronice, ciroze, icter mecanic, ficat de stază acută.

Determinarea TGO prin metoda enzimatică Principiul metodei Pentru determinarea TGO se utilizează ca substraturi acidul aspartic (L-aspartat) și alfa-ceto-glutaratul din care rezultă acidul oxalacetic (oxaloacetat). Acesta, in prezenta MDH reacționează cu NADH+H+ ducând la formarea NAD+ si acid malic (Lmalat). Variația absorbanței măsurată la lungimea de undă de 340 nm proporţională cu activitatea enzimei.

este direct

Acid aspartic + acid alfa-cetoglutaric = acid oxalacetic + acid glutamic Oxaloacetat + NADH+H+ = acid malic + NAD+ Proba Ser nehemolizat (hematiile conțin de 10-20 de ori mai multe transaminaze decât serul Tehnica de lucru Intro eprubetă se pipetează 1ml amestec reactivi R1+R2 (1/1) si 100 μl probă. Se agită și se incubează 1 min la 37grd. C. Se citește variația absorbanței (EP ) la lungimea de undă de 340nm față de apă distilată, in cuve de 1 cm, timp de 3 min. Calcul Se calculează activitatea enzimatică a TGO exprimată prin variația absorbanței pe minut ∆A/min Cp U/l = ∆A/min x 1750, λ = 340 nm Cp U/l = ∆A/min x 1790, λ = 334 nm Cp U/l = ∆A/min x 3240, λ = 365 nm Valori normale Adulţi: 2 – 20 UI Copii: până la 28 UI Variaţii patologice Valori crescute (10 – 100 ori): infarct miocardic, hepatită virală, hepatopatii toxice Creşteri moderate: hepatite cronice, afecţiuni distrofice musculare, anemii hemolitice severe, ictere colestatice....