Practica-4 - PRACTICA DEL LABORATORIO MICROBIOLOGIA PDF
| Title | Practica-4 - PRACTICA DEL LABORATORIO MICROBIOLOGIA |
|---|---|
| Course | MICROBIOLOGIA MEDICA |
| Institution | Universidad de San Miguel |
| Pages | 5 |
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Summary
PRACTICA DEL LABORATORIO MICROBIOLOGIA...
Description
LABORATORIO DE INMUNOLOGIA I “Uso de la cámara de Neubauer” RESUMEN: En esta práctica se realizó un conteo de leucocitos por el uso de la cámara de Neubauer para determinar así su concentración se tomó una muestra de sangre y se mezcló con EDTA la cual se mezcló con reactivo de Turk y colorante de giemsa. Se colocó una gota de esta mezcla en la cámara de Neubauer y se dejó reposar por 3 minutos para el asentamiento de los leucocitos se realizó el conteo de estas células con el microscopio a 10x contando los 4 cuadrantes para así realizar los cálculos correspondientes los cuales dieron una concentración de 9,700/mm3 de leucocitos totales en sangre entrando a niveles normales. . OBJETIVO
En el análisis hecho, los resultados
Determinar la concentración
de la cuenta de células quedaron en
leucocitos con el uso de una cámara
9,700/mm3 de leucocitos totales en
de Neubauer
sangre. Imagen
1:
Conteo
de
leucocitos
encontrados en los 4 cuadrantes en la
DIAGRAMA DE FLUJO
RESULTADOS
cámara de Neubauer
visualmente
un
microscopio
(Karp, 1996).
45
47
con
La cámara de Neubauer también llamada cámara cuenta-glóbulos o hemocitómetro, es un instrumento 45
46
muy útil que permite contar células de distintos tamaños, tiene la apariencia de un portaobjetos grueso, que en
CALCULOS: El total de células en
una
cara
tiene
estos 4 mm3 se multiplica por 50
delgada
(factor obtenido entre la dilución de la
encuentra grabada con un par de
sangre y la profundidad de la cámara)
cuadriculas muy finas y de medidas
47 + 45 + 46 + 45= 94 células
definidas.
contadas
también con un par de muescas que
LEUCOCITOS TOTALES/ mm3 = células
permiten
contadas X 50
analizar en dos compartimientos. Por
94 x 50= 9,700mm3 leucocitos totales
último, la cámara de Neubauer se
de
una
metal,
Esta
placa la
cámara
colocar
la
muy
cual
se
cuenta
muestra
a
complementa con un cubreobjetos cuyo grosor es mayor, también, que el
de
los
cubreobjetos
convencionales. La altura entre el portaobjetos y el cubreobjetos se DISCUSIÓN
encuentra definida, así como el área
Las cámaras de recuento se utilizan
de la cuadricula en el portaobjetos;
para
por lo tanto, es posible calcular el
determinar
el
número
de
partículas por unidad de volumen de
volumen contenido en cada
un líquido. Las partículas leucocitos,
compartimiento de la cámara de
eritrocitos,
Neubauer.
esporas,
trombocitos, polen
etc.
se
bacterias, cuentan
posible
De
conocer
esta
manera,
es
el
volumen
de
muestra celular que se coloca en la
cámara, ahora solo resta conocer el
operación se obtiene el número total.
número de células presentes en ese
Para la realización del conteo manual
volumen.
se necesita un líquido de dilución,
Todo método manual de recuento
una cámara de recuento, una pipeta
celular incluye 3 fases:
diluidora y un microscopio (Jiménez,
Dilución de la sangre
2003).
Muestreo de la sangre diluida
El recuento de leucocitos totales de
en un volumen
un paciente servirá de referencia para
Recuento de células en ese
determinar si hay algún proceso
volumen.
infeccioso
activo.
Al
efectuar
el
(Lorenzi, 2000)
recuento total no se encuentra la
Una suspensión celular se caracteriza
diferenciación entre los 5 tipos de
por
leucocitos
normales
partículas microscópicas dispersas en
monocitos,
linfocitos,
un
eosinófilos).
presentar fluido.
un
número
Habitualmente
de será
(neutrófilos, basófilos
y
la
En el método de Turk se utiliza una
la
solución de ácido acético al 2% que
suspensión como el porcentaje de
tiene como función lisar los eritrocitos
éstas que son viables.
para
Para determinar la densidad de las
recuento y el colorante contenido tiñe
células
los leucocitos. Se recuenta el tipo de
necesario
determinar
densidad
de
se
técnicas,
las
tanto
células
emplean
desde
la
en
diferentes
relativamente
célula
evitar
interferencias
deseado
en
un
en
el
volumen
simple cámara de contaje celular de
definido y se calcula el número de
la que existen numerosas variantes,
células en un microlitro de sangre
entre ellas la que utiliza la cámara de
para el conteo manual de leucocitos
Neubauer.
el
se lee al microscopio con objetivo de
cantidad
10X y solo se cuantan las celular que
pequeña colocada en la cámara de
se encuentran dentro de los cuatro
Neubauer, contando el número de
cuadros grandes
elementos que se encuentran en el
Neubauer, para los cálculos el total
retículo de la cámara y mediante una
de células en estos 4 mm3 se
microscopio
Se con
examina una
en
de la cámara de
multiplica por 50 (factor obtenido entre la dilución de la sangre y la profundidad de la cámara). Los
valores
de
referencia
de
leucocitos son: 5,000 – 10,000/mm3 5.00 – 10.00 X109 /L (Rodak,2014) Finalmente se concluyó con que la muestra de sangre se encontraba dentro de los valores normales de leucocitos revisados en la literatura, así como se aprendió a identificar los diferentes cuadrantes de la cámara y como llevar el conteo de esta. REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA Jiménez L F y Merchant H.: Biología Celular y Molecular. (2003) Prentice Hall.México.
Karp G.: Biología Celular y Molecular. (1996). McGraw-Hill Interamericana. México Lorenzi,T.(2000). Atlas de hematología . Grupo Gen Guanabara Koogan. Rodak, B., Fritsma, G., & Keohane, E. (2014). Hematologia. Mexico: Editorial Medica Panamericana....
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