4. Cinétique à deux substrats et inhibition PDF

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Cours d'enzymologie, par J.Radom.
3e année de licence BBCP, semestre 5....

Description

Cin Cinét ét étiq iq ique ue à d deu eu euxx sub subst st strrat atss et in inhibi hibi hibitio tio tion n I.

Et Etude ude d des es aan nalo alogu gu gues es de su subs bs bstrat trat 1. Bi BiB Bi alé aléato ato atoire, ire, av avec ec ap approx prox proxim im imaatio tion nd du u qu quasiasiasi-éq éq équilib uilib uilibre re 

Un analogue de A est compétitif vis-à-vis de A (sa fixation est exclusive de celle de A), non compétitif vis-à-vis de B (il peut s’associer à l’enzyme, que B soit fixé ou non)



Un analogue de B est non-compétitif vis-à-vis de A, compétitif vis-à-vis de B.

2. Bi BiB Bi o ordo rdo rdonnée, nnée, ave avecc aappro ppro pproxima xima ximation tion du qua quassi-é i-équ qu quilib ilib ilibrre, A étan étantt le pre premier mier sub subst st strat rat 

Un analogue de A est compétitif vis-à-vis de A et vis-à-vis de B (un excès de B empêche la fixation de l’inhibiteur par déplacement d’équilibre).



Un analogue de B est incompétitif vis-à-vis de A (la forme sur laquelle il se fixe devient très minoritaire lorsque [A] tend vers 0) et compétitif vis-à-vis de B.

3. Bi BiB Bi o ordo rdo rdonnée, nnée, ave avecc aappro ppro pproxima xima ximation tion de l’ét l’état at sta station tion tionna na naiire re,, A éta étant nt lle e pre premier mier sub subst st strat rat 

Un analogue de A est compétitif vis-à-vis de A, non compétitif vis-à-vis de N (l’excès de B n’empêche pas la fixation de l’analogue) ;



Un analogue de B est incompétitif vis-à-vis de A, compétitif vis-à-vis de B.

4. Mécan écanisme isme pingping-pon pon pongg 

Un analogue de A est compétitif vis-à-vis de A, incompétitif vis-à-vis de B (la forme sur laquelle il se fixe devient minoritaire lorsque [B] tend vers 0 ;



Un analogue de B est incompétitif vis-à-vis de A, compétitif vis-à-vis de B.

II.

Inhi les produits produits nhibit bit bitii on par les 1. Bi Bib bi or ordo do donn nn nné, é, av avec ec aapp pp pprox rox roximat imat imatio io ion n du qu quasiasiasi-é équi quilib lib libre re po pour ur le less ssu ubs bstrats trats et les p prod rod roduit uit uitss E+A ↔

EA

↔

EAB ↔

EPQ

↔

EQ

↔

E+Q

a) Q est compétitif vis-à-vis de A (sa fixation est exclusive de celle de A) et aussi vis-à-vis de B (l’étape E+A ↔ EA étant en quasi-équilibre, l’excès de B déplace l’équilibre EQ  E + Q vers les formes dissociées empêchant la fixation de Q). b) P n’a pas d’effet inhibiteur (car EQ n’existe pas en absence de Q), sauf si P peut se fixer sur EA. P se comporte alors comme un analogue de B (inhibition incompétitive vis-à-vis de A, compétitive vis-à-vis de B).

2. Bi BiB Bi o ordo rdo rdonné, nné, av avec ec ap appro pro proxim xim ximatio atio ation n de l’l’éta éta étatt st statio atio ationnai nnai nnaire re a) Q est compétitif par rapport à A (sa fixation est exclusive de celle de A), non compétitif par rapport à B (la forme d’enzyme sur laquelle se fixe B (EA) et celle où se fixe Q € sont séparées par une étape réversible) ; b) P est non compétitif par rapport à A et à B (le complexe E (sur lequel se fixe A) et le complexe EA (sur lequel se fixe B) sont séparés du complexe EQ (où se fixe P) par des étapes réversibles). Lorsque l’on travaille à une très grande concentration de B, l’étape EA + B ↔ EAB devient irréversible et P se comporte comme un inhibiteur incompétitif vis-à-vis de A (pas d’inhibition à faible concentration de A).

3. Mécan écanisme isme PingPing-Pong Pong E+A↔ EA ↔ E’P ↔ E’ + P E’ + B ↔ E’B ↔ EQ ↔ E + Q En présence d’un des produits de la réaction, les étapes de fixation des 2 substrats ne sont plus séparées par des étapes irréversibles. En conséquence, les représentations primaires de 1/v en fonction des inverses des concentrations des substrats ne sont plus parallèles. P est inhibiteur non compétitif vis-à-vis de A (E où se fixe A ou E’ où se fixe P sont séparés par des étapes réversibles) et compétitifs vis-à-vis de B (leurs fixations sont exclusives). De même, Q est inhibiteur compétitif vis-à-vis de A et non compétitif vis-à-vis de B....