Análisis DE Resultados III PDF

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ANÁLISIS DE RESULTADOS La obtención de pigmentos vegetales, de hoyuelo en un mortero con etanol se utiliza debido a que es capaz de solubilizar la clorofila y otros pigmentos presentes en el vegetal, por ser un compuesto orgánico, Los pigmentos clorofílicos son insolubles en el solvente universal llamado agua. Pero sí son solubles (afinidad química) en solventes orgánicos como por ejemplo alcohol etílico y acetona. A los solventes que extraen simultáneamente todos los pigmentos de la hoja se los suele llamar extractantes. Existen otros solventes que presentan afinidad por algunos pigmentos y se los llama separadores, como por ejemplo el tetracloruro de carbono y el éter de petróleo [1]. Para separar los residuos del hoyuelo del etanol con la clorofila. Es necesario el uso de la decantación y adición de hexano, el cual es un solvente separador, esto quiere decir que presentan afinidad con algunos pigmentos [2], se utiliza agua para recoger algunas impurezas y la eliminación de la capa acuosa. Sin embargo se debe utilizar alcohol metílico para disolver la clorofila, debido a que el alcohol metílico es más denso que el hexano. En la capa superior se obtiene hexano con otros pigmentos. A la capa superior se le agrega 5 mL de solución de KOH en alcohol la capa superior tomo un color amarillo y la inferior verde claro. La capa amarilla contiene xantofilas y la capa verde claro contiene carotenos. Se emplea el embudo de decantación y se le agrega hexano, el cual extrae la clorofila, debido a su solubilidad con esta y se le agrego agua , para eliminar la capa inferior que contiene agua y alcohol etílico, este diferencia miento de capas es debido a que el alcohol metílico es más denso que el éter etílico. A la capa superior se le añadió solución de KOH en alcohol metílico y agua, para poder separar las capas color verde azulado (capa superior) y verde oscuro (la capa inferior). En la capa superior se obtiene la clorofila A y en la capa inferior la clorofila B. La clorofila B se encuentra en la capa inferior debido a que en su estructura tiene un grupo aldehído (CHO) en el carbono 3 y la clorofila A presenta un grupo metilo (CH3) en el carbono 3. La técnica de separación es liquido-liquido. Esta técnica se basa en la diferencia de solubilidad de los pigmentos en el alcohol metílico [1]. La extracción de las clorofilas se realiza con una mezcla de etanol, hasta obtener un líquido muy concentrado y de color verde oscuro , después se realiza una extracción líquido-líquido en un embudo de separación en solución saturada de hexano y etanol el cuál extrae pigmentos, clorofilas y betacarotenos, por lo cual en este disolvente fue en el que se obtuvieron los pigmentos para la cromatografía posterior [2].Al realizar la cromatografía de absorción en el que este medio fue la alúmina (fase estacionaria) y el diluyente la mezcla de hexano en etanol, de manera que el diluyente comenzó a bajar y los componentes de la mezcla fueron adsorbidos por la fase estacionaria con diferente intensidad, de manera que el proceso de adsorción-desorción hizo que unos componentes avanzaran más rápidamente que otros [3]. Aparecieron varias bandas de diferentes colores que estuvieron más o menos alejados de la disolución de etanol en hexano según la mayor o menor solubilidad de los pigmentos en dicha disolución.

Estas bandas tenían diferente grosor, dependiendo de la abundancia del pigmento en la disolución. Las que tenían más afinidad por el disolvente bajaban más rápido que los otros pigmentos [4].Las primeras clorofilas que se extrajeron fueron las xantofilas, las cuáles son de color amarillo. Estas se obtuvieron en pequeña cantidad cada uno de sus coloraciones diferentes. Después se obtuvo la clorofila, la cual se obtuvo en mayor cantidad ya que esta es la que constituye aproximadamente el 75% de toda la clorofila en las plantas verdes y es de color

verde azulado [5]. Seguida por la clorofila beta que fue la que se obtuvo en segundo lugar en cantidad en color verde amarillento. Por último se obtuvieron los carotenos que fueron de color amarillo más intenso que las xantofilas y estos se obtuvieron al final debido a que eran menos afines al disolvente empleado [6].

BIBLIOGRAFIA [1] Prieto .F. , (1983) Manual del Laboratorio de Química. Gráficas Cervantes. Salamanca [2] García JL. (1980) Experiencias básicas en la enseñanza de las ciencias de la naturaleza II. Instituto de la educación. Universidad de Santander. Santander, [3] Gutiérrez R. (1990) .Enseñanza de las ciencias en la educación intermedia. Ed. Rialp. Madrid. [4] Villarreal F (1981) Experimentos de Química. Ed. Trillas. México, [5] J. Azcón-Bieto, M. Talón (2000). Fundamentos de Fisiología Vegetal. Madrid: McGraw-Hill/Interamericana, Edicions Universitat de Barcelona, [6] B.B. Buchanan, W. Gruissem, R. Jones.(2000.) Biochemistry and Molecular Biology of plants. Rockville (USA): American Society of Plant Physiologists....