Calibración de pipetas automáticas y volumétricas por el método de pesada PDF

Preview

Summary

Práctica sobre calibración de pipetas....

Description

Nombre de la práctica: Calibración de pipetas automáticas y volumétricas por el método de pesada

Práctica. 1

Páginas. 5

Realizó:

Docentes:

Fecha de realización: 06/08/18

Fecha de entrega: 13/08/18

Contenido

Página

l. Conocimientos previos

1

ll. Objetivos

2

lll. Metodología

2

lV. Resultados, Cálculos y Discusión

2

V. Conclusiones

5

Vl. Bibliografía

5

Conocimientos previos Un rasgo importante de buenos analistas es su capacidad para sacar el máximo rendimiento del equipo disponible. Con este fin, es deseable calibrar el propio material volumétrico (buretas, pipetas, matraces aforados, etc.), destinado a medir volúmenes exactos vertidos o contenidos (Harris, 2001). Todo material volumétrico está calibrado para ser utilizado de una forma determinada y a una temperatura establecida. Los instrumentos pueden estar calibrados para verter (como las pipetas y las buretas) o para contener (como los matraces aforados) (Fuentes y col., 1998). ● Pipetas volumétricas Las pipetas están ideadas para trasvasar volúmenes conocidos de líquidos desde un recipiente a otro. La pipeta aforada está calibrada para verter un volumen fijo. La última gota de líquido no sale de la pipeta; y no debe soplar para verterla (Harris, 2007). ● Pipetas automáticas Las micropipetas vierten volúmenes desde 1 a 1000 μL. El líquido se aloja en una punta de plástico desechable. Las puntas de polipropileno son estables a la mayoría de las disoluciones acuosas y de muchos disolventes orgánicos, excepto el cloroformo (CHCl 3). Las puntas no son resistentes a los ácidos nítrico o sulfúrico concentrados (Harris, 2007).

1

● Calibrado El material volumétrico de vidrio se calibra o controla su exactitud pesando la cantidad de agua contenida o emitida a una temperatura dada, y calculando después el volumen a partir de la masa. No debe olvidarse que la densidad del agua y el volumen de un recipiente de vidrio varía en función de la temperatura (Gotelli, 1993). La temperatura de calibración es habitualmente de 20 °C (esto es importante dado que el volumen ocupado por una determinada masa de líquido varía con la temperatura, fenómeno que también ocurre con el volumen del recipiente que lo contiene) (Fuentes y col., 1998). Objetivos Calibrar pipetas automáticas y volumétricas a través del método de pasada. Metodología Materiales y Reactivos ● Pipetas automáticas de 1000 � L, 200 � L, 100� L y 10 � L ● Agua destilada ● Termómetro ● Matraz Erlenmeyer con tapa rosca de 100 mL ● Matraz volumetrico de 10 mL ● pipetas volumétricas de 10 y 5 mL ● Balanza analitica Procedimiento Se pesó un Matraz Erlenmeyer con tapón de rosca de 50 mL, limpio y seco. Se llenó la pipeta en cuestión (pipeta volumétrica de 10 mL y 5 mL y pipeta automática de 100 μL) con agua destilada y se descargó en el Matraz Erlenmeyer. Posteriormente se tapó el Matraz y se volvio a pesar. Se repitió esta operación vaciando nuevamente la pipeta en cuestión, en el mismo matraz sin tirar el agua colocada anteriormente. * La operación se repitió 3 veces para el caso de las pipetas volumétricas y 10 veces para el caso de la pipeta automática. * Antes de comenzar con la parte experimental se midió la temperatura del agua destilada con la que se trabajó. Resultados, Cálculos y Discusión Las tablas 1-3 detallan los resultados de las mediciones realizadas para los distintos volúmenes de agua medidos. En ellas se incluyen los valores de masa de agua y corrección de volumen por factor de temperatura. Fórmulas

Vcorregido :(Masa de agua en g)∗(Volumen de 1 g de agua a latemp dellab) ΔVc :(V medido)−(Vcorregido)

Tabla 1. Resumen de valores de medición realizados con pipeta volumétrica de 5 mL. 2

Tabla 2. Resumen de valores de medición realizados con pipeta volumétrica de 10 mL.

La tabla 4 muestra las condiciones bajo las que se realizaron las mediciones y los resultados estadísticos de las mismas.

Tabla 3. Resumen de valores de medición realizados con pipeta volumétrica de 100 �L.

Tabla 4. Resumen de condiciones y resultados estadísticos de las mediciones realizadas.

3

La figura 1 muestra una tabla extraída de la norma ISO 648, que describe los valores de error máximo permisible para pipetas volumétricas. Con base en ello y los resultados descritos en la tabla 4, se puede determinar que las pipetas volumétricas empleadas no cumplen estas condiciones y sus mediciones son altamente inexactas e imprecisas. Estos resultados se asocian al empleo del material bajo condiciones que rebasan las recomendaciones del fabricante, por lo cual se altera significativamente su calidad, destacando principalmente su uso con sustancias a altas temperaturas y procesos de lavado y secado con cambios bruscos de temperatura.

Figura 1. Valores de error máximo permisible para pipetas volumétricas. En contraste con los resultados de la calibración del material volumétrico, la calibración de la pipeta automatica demostró que este instrumento cumple con las condiciones para su uso en el laboratorio. Con base en la norma ISO 8655, el error máximo permisible para pipetas automáticas con un volumen de 100 � L es de 0.3%, el cual es mucho mayor al obtenido experimentalmente según lo observado en la tabla 4, donde el error relativo obtenido es de 1.5 x10-6 %. Cabe resaltar que en esta misma norma se menciona una condición de humedad relativa no controlada durante los procedimientos realizados en esta práctica, y en ella misma describen la susceptibilidad de las pipetas automáticas a condiciones de humedad por debajo del 37% y que comprometen su exactitud con un error añadido en la medición del volumen de hasta un 0.17% que puede ser significativo en la medición de volúmenes igual o por debajo de 100�L. Conclusiones ● Se pudo realizar la calibración tanto de las pipetas volumétricas como las automáticas. ● Las pipetas automáticas son aptas para el uso en el laboratorio dando resultados confiables ya que este entra dentro del rango establecido en la norma correspondiente.

4

●

Las pipetas volumétricas no son aptas para su uso ya que estas obtuvieron un valor mayor al establecido en las normas.

Bibliografía ● Fuentes A. (1998). Bioquímica clínica y patología molecular. Editorial Reverte S.A. ● Gotelli A. (1993). Manual práctico para el control de calidad interno en el laboratorio toxicológico. Centro panamericano de ecología humana y salud. Metepec, Edo. de México. ● Harris D. (2003). Análisis químico cuantitativo. Tercera edición. Editorial Reverte. ● ISO 648:1977 Laboratory glassware - One-mark pipettes. ● ISO 8655-1:2002 Piston-operated volumetric apparatus.

5...