EL Microscopio DE Campo Claro PDF

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EL MICROSCOPIO DE CAMPO CLARO Es el principal medio que utilizaremos a lo largo de toda la materia para observar la morfología de los tejidos a estudiar, por lo que debemos conocer en detalle sus partes y el funcionamiento de cada una de ellas. Sistema Mecánico       

Pie Columna Tornillos de ajuste macrométrico Micrométrico Tubo Platina Subplatina

Sistema Óptico     

Ocular Objetivo De iluminación condensador Espejo Fuente de luz

SISTEMA MECÁNICO Este sistema sostiene al sistema óptico y aloja los elementos necesarios para la iluminación y enfoque del preparado.

Pie: brinda apoyo y estabilidad al aparato. Columna: soporta la platina, tubo y tornillos de ajuste macro y micrométrico. Tornillo de Ajuste: provocan el desplazamiento del tubo o la platina en sentido vertical, lo que permite el enfoque.

Tubo: en su extremo superior se halla el ocular, y en el inferior el objetivo. Se trata de un cilindro metálico cuyo interior se encuentra pintado de negro, lo que evita la reflexión de la luz. Normalmente tiene una longitud de 170 mm. Platina: es una plataforma horizontal sobre la cual se coloca y sujeta el preparado a observar, tiene un orificio central que permite el paso de la luz y un venier que posibilita la relocalización de los detalles de interés.

Subplatina: sostiene al condenador y se ubica por debajo de la platina. SISTEMA ÓPTICO Se compone de un sistema óptico de observación y un sistema óptico de iluminación; el primero consta de: Objetivo: está formado por un sistema de pequeñas lentes ubicadas muy cercanas una de la otra, la que se halla en el extremo distal del objetivo se denomina lente frontal. Los objetivos pueden ser objetivos a seco (no hay ninguna sustancia interpuesta entre la lente frontal y el preparado), u objetivos de inmersión (entre la lente frontal y el preparado se coloca una sustancia cuyo índice de refracción es muy similar al del vidrio).

Ocular: es un tubo cilíndrico con un diafragma fijo en el centro y una lente en cada extremo, la superior se denomina lente ocular y la inferior lente colectora.

El sistema óptico de iluminación consta de: Condensador: concentra el haz de luz sobre el plano del objeto que se encuentra en la platina. Debajo de él se encuentra el diafragma iris que regula la cantidad de luz que llega al condensador.

Fuente de Luz: es una lámpara que está ubicada en la parte inferior del aparato, en caso de no poseerla debe ubicarse una fuente de luz externa (lámpara incandescente común) aproximadamente a 30 cm. del espejo.

CARACTERISTICAS DE LOS OBJETIVOS:   

ESCALA DE REPRODUCCIÓN: relación lineal que existe entre el tamaño del objeto y su imagen, por ejemplo, 4:1, 40:1, 65:1, etc. PODER DEFINIDOR: es la capacidad del objetivo de formar imágenes de contornos nítidos. LÍMITE DE RESOLUCIÓN: es la menor distancia que debe existir entre dos objetos para que puedan visualizarse por separado.

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PODER DE RESOLUCIÓN: es la capacidad de mostrar la imagen en sus detalles más finos. Está en relación inversa con el límite de resolución. PODER DE PENETRACIÓN: es la propiedad de permitir la observación simultánea de varios planos del preparado. Es inversamente proporcional a la escala de reproducción o aumento. DISTANCIA FRONTAL: es la distancia de la lente frontal al preparado colocado en la platina, cuando está enfocado. Disminuye cuando aumenta la escala de reproducción del objetivo. AUMENTO TOTAL: Debemos notar que el ocular también tiene un aumento, por lo tanto el aumento total de la imagen que observamos es el producto entre el aumento del objetivo y el del ocular. Ejemplo: si tenemos colocado el objetivo cuya escala de reproducción es 40:1 y nuestro ocular tiene un aumento de 10x, entonces el aumento total será 40 x 10 = 400. USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO DE CAMPO CLARO

1. Lo primero es conseguir una buena fuente de iluminación. Si la misma está incorporada al microscopio, enfocamos con el objetivo de menor aumento, cerramos el diafragma de campo y movemos el condensador hacia arriba y hacia abajo hasta que el contorno del diafragma se vea nítido. El diafragma se centra con los tornillos que lo sujetan a la subplatina. Luego se quita el ocular y se verifica que la luz esté centrada. A medida que se abre el diafragma su contorno desaparece del campo observado. Si la fuente de luz es externa, se quita el ocular, se coloca el objetivo de menor aumento, y se mueve el espejo hasta centrar la luz. Recordemos que si tenemos condensador debemos usar la cara plana del espejo. 2. Volvemos a colocar el ocular y, siempre con el objetivo de menor aumento, colocamos el preparado sobre la platina. Utilizando el tornillo el ajuste macrométrico enfocamos lo más claramente posible. 3. El condensador debe estar en la posición más alta y el diafragma abierto. Esto si el preparado está coloreado, sino el diafragma debe estar cerrado. 4. Con el tornillo micrométrico se logra el enfoque fino según nuestra visión. 5. Modificamos la apertura del diafragma hasta obtener la cantidad de luz deseada. 6. Luego de estudiado el preparado con este objetivo, podemos pasar gradualmente a objetivos de mayor aumento, corrigiendo la apertura del diafragma para cada uno de ellos.

7. En caso de utilizar el objetivo de inmersión, se coloca una pequeña gota de aceite sintético sobre el preparado y luego se enfoca con sumo cuidado, recordando que este objetivo es el de menor distancia frontal y corremos el riesgo de estropear el preparado y la lente frontal. Al finalizar el uso de este objetivo se deben retirar los restos de aceite con un papel de carilina o una gasa embebida en xilol o solvente especial para limpieza de lentes, nunca se debe dejar sucio el objetivo. 8. Cuando se termina de utilizar el microscopio se lo debe dejar de la siguiente manera: - fuente de luz apagada - condensador al tope - diafragma abierto - platina alta - objetivo de menor aumento en posición - todas las lentes limpias. INTRODUCCIÓN A LA OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA Para la observación microscópica es importante, como siempre, que Usted se sienta cómodo. Antes de comenzar la observación deje en otro sitio sus abrigos, sus carpetas y carteras, acomódese frente al microscopio y proceda a realizar un reconocimiento del microscopio que va usar. Organización del tiempo disponible: una vez organizado el terreno y reconocido los elementos pase a considerar el tiempo disponible. Tenga en cuenta que va a tener que completar todas las observaciones del práctico en un tiempo determinado, por ejemplo es habitual que un práctico de esta naturaleza dure 60 minutos de los cuales, desde que se acomoda y recibe una explicación breve al inicio más los saludos con sus compañeros van a quedarle unos 45-50 minutos. Piense que debe hacer un reconocimiento de varios preparados que pueden ser por ejemplo 5-7 en ese tiempo, es decir 7-10 minutos por preparado. Para que no le suceda que cuando este por terminar su tiempo de práctico descubra que aun le quedan por examinar varios preparados es recomendable que siga el tiempo con las indicaciones del ayudante. Reconocimiento del microscopio: fíjese el tipo de microscopio que le fue asignado, en que posición esta el tornillo que desplaza la platina, dónde esta localizado el tornillo macrométrico y el micrométrico, que tipo de fuente de luz posee, etc. Luego proceda a encenderlo o a enfocar la luz en el espejo. Una vez reconocido el microscopio, sin mirar aun por el ocular, alinee el eje óptico del microscopio (que la luz que incide desde la fuente emerja por el ocular), fíjese que este en posición el objetivo con el que Ud. desea iniciar la observación. Recuerde que todas las observaciones deben iniciarse con el objetivo seco de menor aumento.

Reconocimiento del preparado histológico: seleccione su preparado, primero pase el dedo suavemente por la superficie para detectar de que lado esta el cubre objeto y colóquelo en la platina orientado hacia arriba. Es recomendable que se acostumbre a realizar este procedimiento con cada preparado porque si usted lo coloca invertido, va a poder usar el objetivo seco débil (10 X) sin inconvenientes (OJO, dependiendo si el preparado es permanente o no, porque en una preparación permanente el cubreobjeto está adherido al portaobjeto). Porque este objetivo hace foco mas o menos a un centímetro de la preparación (que es una distancia superior al espesor del portaobjetos), pero cuando usted pase al objetivo seco fuerte (40 - 45 X), con el que el foco optimo se logra a un milímetro de la preparación dado que portaobjeto tiene un grosor superior, la distancia focal quedaría dentro del mismo vidrio que constituye el portaobjeto entonces al intentar enfocar correctamente la imagen corre el riesgo de producir un daño. Este puede ser de menor grado rompiendo el preparado o mayor, dañando el objetivo. Ajuste del preparado: coloque el preparado en la platina correctamente sujeto en su lugar con la pinza y desplace el mismo moviendo el tornillo de la platina, sin mirar por el ocular, hasta que la preparación interrumpa el haz de luz que proviene de la fuente incorporada o externa. Una vez hecho esto aproxime, sin mirar por el ocular, la lente frontal del objetivo al preparado aproximadamente a 1 cm. Coloque y mantenga una mano en el tornillo que desplaza a la platina y la otra en el tornillo macro o micrométrico que mueven el objetivo y proceda a ajustar la distancia hasta lograr una visión nítida del preparado. Inicio de la observación: comience con el objetivo seco débil (X4) con el que logrará una ampliación de 40X y que permite un área de visión de 1,5 mm = 1.500 micrómetros de diámetro, aproximadamente corresponde al área que delimita esta letra "o". Recorra la totalidad del espécimen tratando de reconocer sus partes basándose en su conocimiento o a la comparación de un atlas que usted puede mantener a su lado. El tamaño del campo de visión guarda una relación inversa con la amplificación utilizada. Recuerde que los diagnósticos se hacen con el objetivo seco débil (4X) porque es un engaño creer que al usar el objetivo seco fuerte (mayor amplificación) Ud. va a entender mas, al contrario porque al usarlo disminuye el diámetro del campo de visión por lo tanto percibirá menos relaciones entre los tejidos, menor cantidad de estructuras, de tejidos y aumentará su confusión. Con el objetivo seco fuerte (X40 o X45) obtendrá una ampliación de 400 X pero su área de visión se reducirá a 375 micrómetro de diámetro (recuerde: 1.500 micrómetros con el seco débil).

Método para automatizar estas tareas: Usted debe lograr un método de observación para ordenarse... este pasará a ser "su método" y así lo aplicará en todas las observaciones microscópicas que realizará y ... tal vez en su vida. Usted recordará que le recomendamos estudiar acompañado, pero la observación microscópica es una actividad individual. Usted debe concentrarse, sumergirse en el preparado con sus 2 ojos abiertos como si estuviese contemplando un paisaje, entonces verá colores en gamas del rojo (eosina) y el azul (hematoxilina) pero si presta atención identificará múltiples tonalidades, cada de una de ellas tiene una explicación funcional (debe cuestionarse: porque se ve así?), desde un celeste claro a un violeta, desde un rosa pálido a un rojo intenso. A modo de ejemplo, si usted contempla un bosque en una mirada rápida verá todo homogéneamente verde pero si usted se detiene y observa en detalle identificará múltiples tonos de verde que corresponden a diferentes plantas o diversos estados de las mismas. Este procedimiento se incorpora conduciéndose como en una investigación... pero esta es "su investigación", con concentración y la pasión de encontrar, de descubrir ... "el cómo" y "el porque". Terminología: desde ahora deberá referirse empleando vocabulario técnico, que irá aprendiendo a lo largo del curso.

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La interpretación tridimensional: a partir de la imagen en dos dimensiones que brinda el microscopio óptico, armar una imagen tridimensional, representa un desafío que solo puede ser resuelto aplicando el razonamiento. Usted deberá formarse una imagen tridimensional a partir de la visión bidimensional que logrará ver con el microscopio óptico + el conocimiento adquirido previamente + concentración + capacidad individual. Este es el desafío. Todas las imágenes que vea en un preparado histológico a través del microscopio óptico necesitaran recomponerse en su cerebro. Su cerebro deberá pensar: cualquier forma en la que corte una esfera siempre aparecerá como circulo. En cambio, un ovalo se observará como una forma alargada, salvo que se trate de una estructura cortada transversalmente que aparecerá como un circulo. En ese caso, debe recorrer el preparado para buscar en otros sectores del mismo para componer la forma real en su cerebro. Además es un momento oportuno para ensayar relacionar la morfología con la función.

De Usted depende ... no vamos a obligarlo a aprender ... no vamos a obligarlo a aprobar ... no se puede ... de Usted depende....