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LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR

CARRERA: Medicina

SIGLA: FCS 103-4

NOMBRE: Brigette Pérez, Ana Lucia Gómez, 723728,723197, 724724

MATRÍCULA: 724101, 723237,

Juan Francisco Pazmiño, Stephanie Jaque, Andrea Alexander FECHA DE PRÁCTICA REALIZADA: Domingo 2 de abril FECHA DE ENTREGA: Martes 4 de abril 1. TEMA:

Uso

2. OBJETIVO/S:

del

microscopio. (0.5)

2.1 General: Realizar el manejo del microscopio compuesto, su estructura, funcionamiento, mantenimiento y precauciones lo que permitirá alcanzar buenos resultados. 2.2 Específicos: ● Identificar las partes del microscopio, su mecanismo óptico, mecánico, ubicación y funcionamiento de los lentes objetivos. ● Calcular el diámetro del campo visual, radio, tamaño aproximado de las células para: 4x,10x,40x ● Realizar el montaje para observación de células vegetales: cebolla blanca, elodea, hoja de granadilla (estomas). ● Realizar los esquemas gráficos respectivos. 3. FUNDAMENTO TEÓRICO (0.5) El microscopio es un instrumento que nos permite observar objetos diminutos imperceptibles al ojo humano para aumentar nuestra comprensión de los seres vivos y los componentes inertes que podemos encontrar en nuestro planeta. Las partes que se deben destacar, pues gracias a ellas se logra el efecto de aumento, son: el lente ocular, varios lentes u objetivos localizados en un revolver que se pueden intercambiar para incrementar o disminuir el aumento, una platina donde se colocan las placas, un foco que permite iluminar la placa y un condensador que concentra la luz fijamente sobre la placa a analizar. Es importante recalcar que el aumento del lente ocular se multiplica por el aumento de los lentes del objetivo, es decir que si se tiene un lente ocular de 10x y un lente objetivo de 40x, la imagen que veremos sera 400 veces más grande que la muestra que se observa.

Al tratarse de un equipo con componentes delicados, se deben tomar en cuenta ciertas normas

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para

su

mantenimiento,

traslado

y

almacenamiento:

-Almacenar el microscopio en un lugar sin polvo y humedad, pues estos pueden dañarlo. -Asegurarse de que se cuente con una toma eléctrica en buen estado y alejado de fuentes de agua y sustancias químicas corrosivas. -En lo posible colocar el microscopio en una posición ergonómica sobre una superficie firme y nivelada, lo cual permite al microscopista acercar su cabeza al ocular de manera cómoda. -En el momento del traslado, sostener firmemente y proteger al microscopio con los brazos y torso. -Para limpiar los componentes externos del microscopio, basta una solución jabonosa y un pedazo de tela o microfibra. -La limpieza de los oculares y objetivos se puede realizar con un pincel y una tela seca, removiendo gentilmente el polvo u otros residuos sólidos. -Se puede dar mantenimiento a las partes móviles del microscopio utilizando aceite lubricante. (Equipos y Laboratorio, s.f.)

Este es una herramienta crucial para lograr una mejor comprensión de los organismos vivos, ya que gracias a él se pudo observar por primera vez las células, pequeñas celdas a las que posteriormente se les identificaría como la unidad básica de la vida. En la historia reciente, este instrumento nos ha permitido alcanzar una comprensión extendida del metabolismo celular y de la composición de los tejidos humanos, animales y vegetales, además de la composición de varias sustancias, como rocas y fluidos, lo cual nos permite tener una mejor comprensión del mundo en el que vivimos y los mecanismos que lo rigen. (Areaciencias, s.f.)

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4. COMENTARIO PERSONAL (0.5) El uso del microscopio es crucial para realizar investigaciones y para llegar a comprender las estructuras de las que están compuestos los seres vivos mediante su observación. Sabemos que en el mundo microscópico suceden muchos procesos imperceptibles que sólo se pueden llegar a comprender mediante el uso de herramientas adecuadas que nos permitan observar lo que el ojo no ve a simple vista y así obtener conclusiones. Si no existiera el microscopio no habría sido posible realizar muchas de las investigaciones que se hicieron a lo largo de la historia. Sin los resultados de estas, no conoceríamos la existencia de micro partículas y microorganismos que son esenciales en la ciencia y en especial en la medicina, pues no se conocería la célula ni cómo funciona. Para nuestra carrera como médicos tenemos que aprender a usar correctamente el microscopio porque vamos a tener que hacer muchos estudios que nos pueden ayudar a diagnosticar, mejorar y enriquecer nuestra práctica médica. 5. MATERIALES (0.5) ● Pipetas Pasteur de vidrio y de plástico ● Pisetas ● Cajas Petri ● Portaobjetos ● Cubreobjetos ● Pinzas de metal ● Papel para limpieza de lentes ● Hojas de bisturí ● Mangos para bisturí ● Microscopio: 4x,10x,40x,100x ● Papel milimetrado ● Tijeras ● Letras del periódico: a, i ● Cebolla blanca ● Hojas de granadilla ● Planta de elodea ● Pipeta ● Reactivos: ● Azul de metileno al 1% 0.05ml/a0.9ml/g ● Aceite de inmersión 0.05ml/a 0.9ml/g ● Agua destilada 5 ml/a 90 ml/g ● Equipos ● Microscopio óptico

6. PROCEDIMIENTO (0.5)

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● Conectar el microscopio a una fuente eléctrica. ● Encender la luz del microscopio. ● Ajustar los lentes ópticos. ● Colocar la muestra y observar. Muestra de papel milimetrado. ● Cortar un centímetro de papel milimetrado y colocarlo en el portaobjetos. ● Con la pipeta añadir una gota de agua a la muestra. ● Colocar el cubreobjetos encima. ● Observar en el microscopio. Para muestra de hoja de elodea. ● Con el bisturí cortar una hoja de la elodea. ● Colocar la muestra en el portaobjetos y añadir una gota de agua. ● Colocar el cubreobjetos encima. ● Observar en el microscopio. Para muestra de hoja de granadilla. ● Con el bisturí cortar una parte de la hoja. ● Colocar el resultado en el portaobjetos y añadir una gota de agua. ● Cubrir con cubreobjetos. ● Observar en el microscopio. Para muestra de cebolla ● Cortar un pedazo de cebolla con el bisturí. ● Con ayuda de una pinza separar la capa superficial y transparente de la cebolla. ● Colocar esta muestra en el portaobjetos. ● Añadir una gota de azul de metileno y dejar reposar por 5 minutos. ● Pasado este tiempo, con una pipeta llena de agua limpiar el exceso del colorante. ● Cubrir la muestra con el cubreobjetos. ● Observar en el microscopio. Para obtener diámetro del campo óptico ● Observar la muestra del papel milimetrado con aumento de 4x, 10x y 40x. ● En cada caso contar cuántos cuadrados son visibles, estos son los milímetros mostrados. Para obtener diámetro de la célula ● Contar cuántos elementos se ven en cada milímetro de la muestra con aumento de 4x, 10x y 40x. ● Dividir este resultado para el diámetro del campo obtenido de cada lente de aumento.

7. RESULTADOS (2.0)

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HOJA DE GRANADILLA

4x

10x

40x

ELODEA

4x

10x

40x

CEBOLLA CON AZUL DE METILENO

4x

10x

40x

●

CUESTIONARIO:

1.

Historia de invención del microscopio, investigadores que aportaron en su invención hasta la actualidad, clases de microscopios. Función de los lentes oculares, objetivos.

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Historia: Existen muchas teorías sobre la persona que descubrió el microscopio. Sin embargo, la más aceptada explica que Anton Van Leeuwenhoek creó el primer microscopio de un solo lente óptico. Con este pudo observar glóbulos rojos, insectos, protozoos, entre otros microorganismos. Tiempo después, Galileo Galilei promovió el uso de este pero algunos archivos indican que él no fue el inventor. “Algunos autores, reivindican la invención del microscopio compuesto, en 1590, por parte de los holandeses Zacharias Janssen (1588-1638) y su padre Hans Janssen, fabricantes de anteojos.” (Icaria, 2007). Así el microscopio continuó siendo utilizado por muchos científicos y aunque no se sabe a ciencia cierta quién lo inventó, ha ayudado a hacer grandes descubrimientos. Finalmente, Giovanni Faber fue quien le otorgó el nombre a este valioso instrumento. Investigadores: ● En 1590, Zacharias Janssen creó un microscopio formado por varias lentes en un tubo. ● En 1609 Galileo construyó un microscopio compuesto, con una lente cóncava y otra convexa. ● Giovanni Faber en 1625 popularizó el término “microscopio”, antes llamado occhiolino. ● En 1665 Robert Hooke publicó en su libro Micrographia imágenes obtenidas de un microscopio. ● Antoine van Leeuwenhoek observó organismos unicelulares con lentes de gran aumento. ● En 1931 los científicos Ernst Ruska y Max Knoll construyeron el primer microscopio de electrones. ● Erwin Müller y Kanwar Bahadur fueron los primeros en ver un átomo con un microscopio de iones en campo en 1955. ● En el 2010, Aydogan Ozcan creó un microscopio innovador, sin lentes. Este cuenta con luz led y sensores digitales, por lo que crea imágenes como hologramas. ● En 2012, en la Universidad de Victoria bajo la ayuda de muchos científicos, se instala un microscopio de electrones que es capaz de aumentar la imagen de una muestra por más pequeña que sea hasta 20 millones de veces. (MICROSCOPIO, 2016) Clases de microscopios: ●

Microscopio compuesto u óptico: Logra obtener imágenes ampliadas por sus lentes,puede tener un solo lente ocular o dos.

●

Microscopio estereoscópico: Permite observar una muestra en

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●

Microscopio de campo oscuro: La imagen se ve como objetos luminosos sobre un fondo oscuro.

●

Microscopio de fluorescencia: Permite observar muestras con fluorocromos.

●

Microscopio de contraste de fases: Modifica la trayectoria de los rayos de luz y genera contraste.

●

Microscopio electrónico: Tiene una alta magnificación, los electrones son utilizados para iluminar partículas más pequeñas. Es uno de los microscopios más eficientes.

Función de los lentes oculares: Los lentes oculares sirven para am bjeto, suelen tener dos oculares por eso se llaman binoculares, si tuvieran solo un ocular se llamaría monocular. (MICROSCOPIO P. D., 2015) 2. Investigue sobre el trasplante de células madre en seres humanos. Las células madre son células del organismo que tienen el potencial de convertirse en cualquier

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tipo de célula, como por ejemplo: células de la piel, células hepáticas, células cerebrales o células sanguíneas. Estas células también se pueden transformar en tres tipos de células sanguíneas: ● ● ●

Glóbulos blancos que luchan contra las infecciones. Glóbulos rojos que transportan oxígeno. Plaquetas que ayudan al proceso de coagulación de la sangre.

El trasplante de células madre sirve como tratamiento para algunos tipos de cáncer, como por ejemplo: leucemia, mieloma múltiple, cáncer de testículo, de ovario, y otros. Con estas células también se pueden tratar enfermedades de la sangre, ya que permiten regenerar las provisiones de células hematopoyéticas sanas (Cáncer.net, 2014) Las células madre hematopoyéticas que ya son trasplantadas, se introducen en el torrente sanguíneo a través de una vía intravenosa. Existen dos tipos de trasplantes de células que son: ●

●

Autotrasplante de células madres hematopoyéticas: En este tipo de trasplante los mismos pacientes actúan como sus propios donantes, esto quiere decir que una persona que vaya a someterse a algún tratamiento contra el cáncer, le extraerán sus propias células madres y las congelan para utilizarlas posteriormente. Después de que esta persona reciba quimioterapia o radioterapia las células extraídas serán descongeladas y las volverán a introducir en su organismo. Alotrasplante de células madres hematopoyéticas: En este tipo de trasplante las células madres provienen de un donante en la mayoría de veces de un hermano y en otras ocasiones de otra personas que tengan células compatibles al del paciente.

3. Explicar cuál es la función del azul de metileno en el área de la salud. El azul de metileno fue uno de los primeros colorantes antisépticos usados en medicina. Es un colorante germicida débil y se utiliza como antiséptico leve del tracto genitourinario. Este compuesto presenta una acción óxido-reductora y tiene la propiedad de colorear los tejidos. E ste en gran concentración convierte el hierro ferroso de la hemoglobina reducida a la forma férrica, y como resultado se obtiene metahemoglobina; con una baja cantidad de este, se puede convertir metahemoglobina a hemoglobina. Esto es la base de la función como antídoto del azul de metileno en el envenenamiento por cianuro. (BARBADO, 2011)

Tabla número 1 Dimensiones del campo óptico de los lentes objetivos V/O

4X

10X

40X

100X

mm

4.5

1.5

0.15

0.0375

um

4500

1500

150

37.5

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A

45000000

15000000

1500000

375000

8. ANÁLISIS DE RESULTADOS (2.0) La historia del microscopio demuestra la perseverancia y esfuerzo de muchos científicos por ver más allá de lo que tenían, por innovar la ciencia y por querer estudiar más a fondo los organismos que rodean al mundo. Las células madre representan un gran avance en el tratamiento de enfermedades que hasta ahora no cuentan con una cura tan efectiva, más adelante podrían ser la solución a muchos problemas de salud. El azul de metileno cuenta con muchos usos dentro del laboratorio y para la medicina, dado que es capaz de colorear ciertas estructuras y también funciona como antiséptico. Se debe aprovechar al máximo todas sus aplicaciones. Como se puede observar en las imágenes de las muestras en el microscopio, mientras aumenta la medida de los lentes, las estructuras aumentan de tamaño, por lo que en 40x se verá una célula ampliada con más detalle que en 4x, donde se ven varias células alejadas. Con la tabla número 1, se puede concluir que el campo óptico de un lente de 4x tiene un diámetro mayor al campo de lentes de mayor aumento, esto ocurre porque con cada lente la imagen se agranda y se enfoca un solo punto de la muestra, no todo. De igual forma, al realizar las conversiones, se abren más posibilidades para la interpretación de datos,pues se pueden adecuar al sistema de medición que se requiera. 9.

CORRELACIÓN

(1.0)

El microscopio es una herramienta esencial en el estudio de la Biología, puesto que nos permite identificar y estudiar a profundidad la estructura y el funcionamiento de los varios tipos de células presentes en los organismos multicelulares, así como los microorganismos unicelulares. Estas estructuras tan pequeñas y complejas son las que dan origen a un sinfín de especies de seres vivos, como plantas, animales y humanos; estos juntos son los que conforman el planeta donde vivimos. Las aplicaciones en la Medicina pueden incluir los análisis de microbiología con tinción de Gram en el diagnóstico clínico, lo que permite determinar el antibiótico a utilizar; los análisis de fertilidad masculina, en los cuales se realiza un conteo de los espermatozoides viables. De igual manera, con varias tinciones que se han desarrollado con los años, es posible observar estructuras de forma más clara y precisa. Los científicos pueden aprovechar la tecnología para obtener resultados más exactos y reales, lo que permite que se apliquen nuevos procedimientos a estas estructuras y mejorar su funcionamiento, lo que tiene aplicaciones en todas las ramas de la ciencia. 10. CONCLUSIONES (2.0) ● Se estudió teóricamente y en la práctica el manejo del microscopio compuesto, su estructura, funcionamiento y las precauciones que se deben tomar al momento de su utilización, lo cual nos permitirá alcanzar mejores resultados al momento de las prácticas.

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● ● ● ● ● 11.

Se identificó las partes del microscopio, su mecanismo óptico, mecánico, ubicación y funcionamiento de los lentes objetivos. Se calculó el diámetro del campo visual, radio, tamaño aproximado de las células para: 4x,10x,40x Se realizó el montaje para observación de células vegetales: cebolla blanca, elodea, hoja de granadilla (estomas). Se realizó los esquemas gráficos respectivos. Mediante el uso correcto del microscopio, se pudo obtener la imagen de manera más clara de lo que queremos observar. BIBLIOGRAFÍA

(0.5)

AreaCiencias, (s.f). El Microscopio. Recuperado el 03 de Abril de 2017 de: http://www.areaciencias.com/El_Microscopio.htm BARBADO, D. M. (2011). FORMULARIO NACIONAL DE MEDICAMENTOS. Obtenido el 01 de Abril de 2017 de FORMULARIO NACIONAL DE MEDICAMENTOS: http://fnmedicamentos.sld.cu/index.php?P=FullRecord&ID=764 Cáncer.net. (2014). Qué es el trasplante de células Madre. Recuperado el 02 de Abril del 2017 de : http://www.cancer.net/es/desplazarse-por-atenci%C3%B3n-del-c%C3%A1ncer/c %C3%B3mo-se-trata-el-c%C3%A1ncer/qu%C3%A9-es-el-trasplante-de-c%C3%A9lulasmadre-trasplante-de-m%C3%A9dula-%C3%B3sea Equipos y Laboratorio (s.f.). Mantenimiento General y Limpieza del Microscopio. Recuperado el 03 de Abril de 2017 de: http://www.equiposylaboratorio.com/sitio/contenidos_mo.php?it=719 Icaria, L. (15 de Mayo de 2007). ¿Quién inventó el microscopio óptico? Obtenido el 02 de Abril de 2017 de: https://www.xatakaciencia.com/tecnologia/quien-invento-elmicroscopio-optico MICROSCOPIO, B. H. (2016). Breve historia del microscopio. Obtenido el 02 de Abril de 2017 de QUO: http://www.quo.es/tecnologia/breve-historia-del-microscopio MICROSCOPIO, P. D. (2015). CIENCIAS NATURALEZ. Obtenido el 01 de Abril de 2017 de: http://www.areaciencias.com/partes-microscopio.htm...