Fundamentos de la tinción de Papanicolaou PDF

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fundamentos de la tinción de PAP y obtención de la muestra...

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Fundamentos de la tinción de Papanicolaou Toma de muestra La muestra se puede de 3 formas. La primera es utilizando la espátula de Ayre para tomar muestra de exocérvix o endocérvix dependiendo del lado que se utilice. El segundo método es mediante el uso de cepillo endocervical, el cual, se utiliza en conjunto con la espátula, uno para endocérvix y el otro para exocérvix. El último es utilizando el citobrush para obtener tanto, endocérvix, como exocérvix. Dependiendo del método utilizado se obtendrán dos B placa. En A, se formas A ejemplifica como va dividido en los primeros dos métodos, representando endocérvix en naranjo y exocérvix en azul. En B, se aprecia como se deposita la muestra mediante citobrush, y se representa utilizando los mismos colores para diferenciar el origen de la muestra. La muestra (placa o porta objeto) debe ser identificada correctamente con las iniciales del nombre de la paciente y acompañada de la Solicitud de examen citológico (SEC) respectiva, se registra este examen en el libro de envío de PAP al laboratorio de citodiagnóstico, y el portaobjeto se coloca en el ángulo superior derecho de la SEC con un clip. Luego se debe doblar la SEC transversalmente y colocada individualmente en una bolsa transparente, posterior a esto se reúnen todas las bolsas que contienen la SEC y portaobjetos para ser colocadas en una caja plástica con tapa y trasladadas al laboratorio para realizar la recepción de los exámenes. En la caja plástica también se agrega la nómina de registro SEC que debe tener el mismo orden correlativo en que vienen las mismas (SEC) para facilitar la recepción en el laboratorio. A demás se debe adjuntar el listado obtenido del sistema SIGGES para realizar el seguimiento de la garantía de oportunidad. En la recepción la técnico paramédico comienza a realizar el cotejo de cada uno de los exámenes con la nómina de registro SEC. Revisa cada una de las bolsas transparentes, verificando que el nombre de la paciente y rut corresponda con la nómina de registro SEC, de no haber ningún problema los exámenes serán recepcionados y procesados, de lo contrario serán rechazados y devueltos al remitente (CESFAM). Lo mismo ocurre si las placas vienen quebradas, SEC sin placa, solo viene la muestra, SEC ilegible, etc. Los exámenes que llegan al laboratorio siguen el siguiente protocolos: 1) La técnico paramédico comienza a fechar cada SEC y nómina SEC con la fecha de recepción. 2) Ordenar y cotejar las SEC con el registro en Nómina de SEC, seleccionadas por orden cronológico de recepción. 3) Asignar código de procedencia a la SEC que encabeza el grupo de exámenes de un mismo remitente, requisito de ingreso a Citoexpert (base de datos nacional que posee información del paciente). 4) Asignar un número de folio correlativo anual a la SEC y a la muestra. 5) Fechar la SEC con la fecha correspondiente a la lectura o Screening en la zona de la SEC de uso exclusivo para el Laboratorio. 6) Entregar el grupo de SEC ordenado correlativamente a la OFA Citoexpert de acuerdo a la carga diaria establecida. 7) Los portas objetos (placas) son colocados en canastillos de tinción metálica con capacidad para 60 portas y son llevados al proceso de tinción.

Fijación Características ideales de un fijador citológico:      

Cubrir y penetrar a la célula rápidamente. Mantener la morfología celular íntegra Inactivar la autolisis enzimática Permitir la permeabilidad de la tinción a través de la membrana plasmática Permitir la adhesión de las células al porta objeto Ser bactericida

Más usados:   

Alcohol etílico 96% Citospray (alcohol y polietilenglicol- Carbowax). Mezclas: alcohol-éter, es muy volátil, no se recomienda.

Una muestra de citología cervical debe ser fijada inmediatamente después de realizado el extendido. La lámina citológica debe llegar al laboratorio fijada por la persona encargada de obtener la muestra cervical, ya que una muestra sin fijar pierde capacidad o afinidad tintorial que se traduce en pérdida de tonalidades en la tinción de Papanicolaou (De ser así, se diagnostica con G4).

Tinción de Papanicolaou La tinción de Papanicolaou es un método de tinción policromática que consta de una tinción nuclear y un contraste citoplasmático. Tiene como ventaja una buena definición del detalle nuclear, evidenciando el patrón de cromatina de las células, un aspecto transparente de los citoplasmas y una diferenciación celular, que permite apreciar grados de maduración celular y actividad metabólica, todo esto debido al uso de tres colorantes; la Hematoxilina que tiñe selectivamente los núcleos y el Orange G y la eosina Alcohol (EA) que tiñen los citoplasmas. La tinción de Papanicolaou tiene 4 pasos principales: 1.- Fijación realizada en el momento de tomar la muestra. 2.- Tinción del núcleo con Hematoxilina 3.- Tinción del citoplasma con Orange G y EA 4.- Aclaramiento Hay que recordar que las células tendrán policromacia debido a una tinción por competencia por parte de los colorantes. 1) Tinción del núcleo: La hematoxilina de Harris tiene una afinidad por las estructuras ácidas, específicamente por la cromatina. Después de la hematoxilina las láminas se lavan en agua (Viraje). Luego se hace una diferenciación en una solución de HCl al 0,5% en agua destilada y luego lavado en agua corriente. 2) Tinción del Citoplasma: El Orange G es una tinción monocromática que colorea la queratina de un naranja brillante y penetra rápidamente al citoplasma. La queratina no se encuentra en condiciones normales en el epitelio cervical y vaginal, y si se encuentra en carcinomas queratinizados. Por lo tanto, la presencia de citoplasma orangeofílico brillante es significativa....