Informe Práctica N°4 - Vitamina C - A1-2 PDF

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Informe de práctica de Bioquímica I...

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PRACTICA # 4 DETERMINACION DE LA VITAMINA C I. INTRODUCCIÓN La vitamina C, llamada también ácido ascórbico, se encuentra principalmente en las frutas cítricas, verduras, papas, leche. La vitamina C, enantiómero L del ácido ascórbico o antiescorbútica, es un nutriente esencial, en particular para los mamíferos. La presencia de esta vitamina es requerida para reacciones metabólicas en todos los animales y plantas y es sintetizada por casi todos los organismos excepto en el hombre, por ausencia de la enzima L-gulonato oxidasa. Su deficiencia causa ESCORBUTO, inhibiendo la síntesis de colágeno, indispensable en los tejidos que se manifiesta en anemia, cansancio y debilidad, encías inflamadas que sangran fácilmente, hemorragias en la piel etc.. En organismos vivos, la vitamina C o ascorbato es un antioxidante hidrosolubre, que protege el cuerpo contra la oxidación mediante reacciones redox y es cofactor en varias reacciones enzimáticas vitales, actúa junto con la vitamina E. El objetivo de la práctica es determinar la vitamina C en zumos de diferentes alimentos. II. MATERIAL Y MÉTODO 2.1 MATERIAL: REACTIVOS -

Solución de 2,6-diclorofenolindofenol al 0,05% ( disolver en agua caliente )

-

Solución acética-metafosfórica: ácido acético al 8% (p/v) y ácido metafosfórico al 2% ( p/v ). 2.2 MÉTODO La determinación se basa en la propiedad que tiene el ácido L-ascórbico de reducir al 2,6diclorofenolindefenol, que es un indicador redox. El 2,6-diclorofenolindefenol oxidado es azul a un pH superior a 5,7 y rosado a un pH inferior y al ser reducido se decolora ( leucoderivado ).

a) Fundamento:

La determinación se lleva a efecto mediante la titulación de la vitamina C con una solución del indicador, en presencia de ácidos acético-metafosfórico. Estos ácidos inhiben la oxidación aeróbica del ácido ascórbico, precipitan las proteínas e inactivar las enzimas que pueden interferir en la reacción. Debido al medio ácido en que se realiza la titulación, el viraje que hay que considerar es el de rosado a incoloro. b) Procedimiento

 Elegir los alimentos en los cuales va a analizar el contenido de vitamina C (frutos cítricos, papa, tomate, manzana, pera).  Extraer jugo del material a analizar y hacer una dilución al 1/20 en solución acéticametafosfórica. ( 0.1 ml de zumo más 1.9 mL de sol Ac.Acido-Metafosfórica.)  Colocar 2 ml de esta dilución en un matraz Erlenmeyer y titular agregando solución de 2,6diclorofenolindofenol con una pipeta de 2 ml hasta coloración rosada débil, persistente durante 5 segundos.  Titular un blanco en las mismas condiciones ( 0.1 mL agua + 1.9 mL de sol Ac. A-M). c) Expresión de resultados

Expresar los resultados en mg de ácido ascórbico por 100 ml de jugo 0 100 g de alimento. Cada 1.0 ml de 2,6-diclorofenolindofenol equivale a 0,12 mg de ácido ascórbico. Entonces:

1ml 2,6 –DCFIF------0,12 mg de ácido ascórbico Volumen Gasto--------x mg de ácido ascórbico

III.

RESULTADOS

IV.

DISCUSIÓN

El medio ácido en el cual se encuentra el ácido ascórbico es para proteger al ácido de la oxidación aeróbica, así mismo en la mayoría de los tejidos animales y vegetales, el ácido ascórbico es la única sustancia que muestra acción reductora en solución ácida. La reacción con 2,6 DCFIF es la más común para la determinación de la vitamina C, es la reducción cuantitativa del colorante, que es convertida en una leucobase incolora para la forma reducida del ácido ascórbico. El factor aditivo de la vitamina C es el ácido ascórbico actúa como donador de equivalente reductores, oxidándose a ácido deshidroascórbico que por sí mismo puede actuar como fuente de vitamina C. El indicador 2,6 DCFIF es color azul en estado oxidado en forma natural, al ponerlo en contacto con las disoluciones cambia a color rosado (reducido) debido a que el ácido ascórbico lo reduce donando H+. V.

CONCLUSIONES

Logramos determinar cuali y cuantitativamente la presencia de vitamina C, en la naranja con la titulación del indicador 2,6-diclorofenolindofenol. Al reacción el 2,6-diclorofenolindofenol con el ácido ascórbico ocurre una reacción redox, ya que el indicador se reduce al ganar electrones y el ácido ascórbico se oxida al perder los electrones.

VI.

BIBLIOGRAFÍA

Knight, John et al. (agosto de 2016). «Ascorbic Acid Intake and Oxalate Synthesis» [Ingesta de ácido ascórbico y síntesis de oxalato]. Urolithiasis44 (4): 289-297. GOBERNA RAIMUNDO. (2014): Actualizaciones en Bioquímica Clínica. 1ra Edición. Secretariado de Publicaciones. Universidad de Sevilla. España. MCKEE TRUDY. (2014). Bioquímica, las bases moleculares de la vida. 5ta Edición. Editorial Mc Graw Hill- LANGE. España.

ACTIVIDADES EXTRA-AULA: Funciones de la vitamina C Cataliza la hidroxilación poste-de translación de la prolina y los residuos de la lisina. Es vital para la síntesis normal del colágeno, de la L-carnitina, de las catecolaminas, y de las proteínas. Su deficiencia produce:Puede contribuir a la anemia en el embarazo. Produce escorbuto infantil (enfermedad de Barlow). Sintomas de la deficiencia de vitamina C: las encías se inflaman entre los dientes y sangran con facilidad. Petequias en la piel Enuncie dos enzimas dependientes de vitamina C: El ácido ascórbico es cofactor de enzimas oxigenasas dicetoglutarato dependiente (αKGDD) que hidroxilan el colágeno, la L-DOPA, la noradrenalina, el HIFα, la 5-metilcitosina (5mCp) y las histonas demetilasas. Indique la cantidad de vitamina C que se encuentra en: Limón: 53 mg Naranja: 55 – 60 mg Tomate: 27 mg Manzana: 4.6 mg Papa: 100 – 150 mg - Esquematice la estructura de la vitamina C oxidada y reducida

Ácido L-ascórbico VITAMINA C REDUCIDA

Ácido L-dehidro-ascórbico VITAMINA C OXIDADA

Reacción redox de la vitamina C con el 2,6-DCFIF en medio en la solución ácida metafosfórica: Según Nielsen (2003), el ácido ascórbico reduce el tinte indicador a incoloro. El punto final de la valoración con el tinte, de una muestra del contenido del ácido ascórbico, el exceso de color no se confirma una coloración a la impresión. La concentración de tinte valorante se puede determinar utilizando un patrón de ácido ascórbico. A continuación, se puede valorar con el tinte las muestras de alimentos en la información, utilizar el volumen de consumo en la evaluación para calcular el contenido de ácido ascórbico El ácido L-ascórbico se oxida al ácido L-deshidroascórbico promedio del tinte indicador. En el punto final, el exceso de tinte no reducido es de color rosa-rosado, en la disolución. El ácido L-

deshidroascórbico puede ser determinado convirtiéndolo primero ácido L-ascórbico con un agente reductor conveniente. mg de ácido ascórbico = Volumen gasto *Eq W V =gasto en ml de 2,6-diclorofenolindofenol utilizados para titular una alícuota de la muestra E = 0,12 mg ácido ascórbico equivalentente a 1 ml del indicador 2,6-DCFIF W= Los gramos de muestra en la alícuota analizada (01 ml= 0.1 g)

Si:

1ml 2,6 –DCFIF

0,12 mg de ácido ascórbico

Volumen Gasto x mg de ácido ascórbico Entonces: X=0,24 mg de ácido ascórbico BIBLIOGRAFÍA DE LA ACTIVIDAD LIJI THOMAS, MD. Función fisiológica de la vitamina C. Recuperado 20 de julio del 2020. Rev. News Medical. Disponible en: https://www.newsmedical.net/health/Vitamin-C-Physiological-Function-(Spanish).aspx Carencia de vitamina C y escorbuto. Recuperado 20 de julio del 2020. Disponible en: http://www.fao.org/3/w0073s/w0073s0n.htm VILLAGRAN, M. MUÑOZ, M. Una mirada actual de la vitamina C en salud y enfermedad. (2019). Recuperado 20 de julio del 2020. Rev. Chilena de Nutrición. Disponible en: https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S071775182019000600800...