Title | MAPA DE Ligamiento DE Drosophila Melanogaster |
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Course | Genética General |
Institution | Universitat Politècnica de València |
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Memoria de prácticas Drosophila...
MAPA DE LIGAMIENTO DE DROSOPHILA MELANOGASTER Para la obtención de un mapa de ligamiento de Drosophila Melanogaster se utiliza la información obtenida a partir de los siguientes cruzamientos: -Cruzamientos entre los parentales -Cruzamientos prueba de la F1 ● Cruzamientos entre los parentales En este caso, se realizaron cruzamientos recíprocos para comprobar si existía o no herencia ligada al sexo. En ambos casos, se seleccionaron hembras vírgenes para asegurarse de que la descendencia provenía únicamente de los machos seleccionados.
-Cruzamiento 1:
♀ Salvaje (XX)
F1
x
♀ Salvaje (XX+)
♂ Mutante (X+Y)
♂ Salvaje (XY)
-Cruzamiento 2:
♀ Mutante (X+X+)
F1’
♀ Salvaje (XX+)
x
♂ Salvaje (XY)
♂ Mutantes (X+Y)
Gracias al fenotipo manifestado por la descendencia, se demuestra que existe herencia ligada al sexo. Los genes se encuentran sobre el cromosoma X y el alelo salvaje domina sobre el mutante. X > X+ ● Cruzamientos prueba de la F1: El objetivo de estos cruzamientos es estudiar el modo de transmisión de tres genes que controlan la forma de las alas, la forma de las quetas y el color del cuerpo. Mediante un cruce prueba se puede determinar: 1. Control genético de las mutaciones 2. Cromosoma donde se encuentran las mutaciones 3. Orden de los genes 4. Distancia entre los genes 5. Coincidencia e interferencia 6. Genotipo y fenotipo de las moscas en cada generación
Genética General
1º Biotecnología
Curso 2015/2016
Para ello se utiliza la información obtenida en el recuento de la descendencia: Categoría 1 2 3 4 5 6 7 8
Cuerpo Salvaje Salvaje Salvaje Salvaje Mutante Mutante Mutante Mutante
Genes estudiados: -Cuerpo: A -Quetas: B -Alas: C
Quetas Salvaje Salvaje Mutante Mutante Salvaje Salvaje Mutante Mutante
Alas Salvaje Mutante Salvaje Mutante Salvaje Mutante Salvaje Mutante
Machos 4240 593 1570 768 1132 1302 636 2020 12261
Hembras 4465 538 1631 570 1426 1149 696 1658 12133
Total 8705 1131 3201 1338 2558 2451 1332 3678 24394
A(salvaje) > a(mutante) B(salvaje) > b(mutante) C(salvaje) > c(mutante)
1. Control genético de las mutaciones AaBbCc x aabbcc Genes con dos alelos y dominancia completa. ◦Gen A: Aa x aa ½ Aa ½ aa Aa (salvaje): 14375 aa (mutante): 10019
1/2 1/2
◦Gen B: Bb x bb ½ Bb ½ bb Bb (salvaje): 14845 bb (mutante): 9549
1/2 1/2
◦Gen C: Cc x cc ½ Cc ½ cc Cc (salvaje): 15796 cc (mutante): 8598
1/2 1/2
A pesar de tratarse de un gen con dos alelos, la segregación no es la esperada (1/2). Esto se debe a la baja viabilidad de los individuos mutantes que ha distorsionado los resultados de la segregación esperada frente a la observada. A continuación, es necesario comprobar si los genes se transmiten de forma independiente o existe ligamiento entre ellos. Para ello se realiza la prueba de la X2.
Genética General
1º Biotecnología
Curso 2015/2016
◦Genes A y B AaBb x aabb AaBb: 9836 Aabb: 4539 aaBb: 5009 aabb: 5010
1/4 1/4 1/4 1/4 X2=3078,26
◦Genes A y C AaCc x aacc AaCc: 11906 Aacc: 2469 aaCc: 3890 aacc: 6129
1/4 1/4 1/4 1/4 X2=8490,4
◦Genes B y C BbCc x bbcc BbCc: 11263 Bbcc: 3582 bbCc: 4533 bbcc: 5016
1/4 1/4 1/4 1/4 X2=6005,97
Los valores de las X2 se alejan mucho de los valores permitidos. Las frecuencias de los genotipos AaBb, AaCc y BbCc deberían acercarse más a las de los genotipos aabb, aacc y bbcc, respectivamente. Esto no ocurre debido a la baja viabilidad de los mutantes. Aún teniendo en cuenta esto, las frecuencias observadas no se ajustan a las de la segregación independiente, lo que indica que los tres genes están ligados. 2. Cromosoma donde se encuentran las mutaciones Los tres genes están ligados, de modo que se encuentran en el mismo cromosoma, el cromosoma X. Los cruces recíprocos de los parentales demostraron que existe herencia ligada al sexo. 3. Orden de los genes Para saber qué gen está en medio, es necesario conocer los gametos de los parentales (más frecuentes) y de los dobles recombinantes (menos frecuentes). -Parentales: -Dobles recombinantes:
ABC ABc
abc abC
En este caso, el gen que varía entre los parentales y los dobles recombinantes es el C, lo que quiere decir que es este gen quien está en medio. ACB acb Genética General
acb
x acb
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4. Distancia entre los genes Para conocer la distancia a la que se encuentran los genes es necesario hallar las frecuencias de recombinación (r). Recombinantes zona 1: Aaccbb: 1338 aaCcBb: 2558 AaccBb: 1131 aaCcbb: 1332 r1 =
Dobles Recombinantes
1338+2558+1131+1332
= 0,26
24394
Recombinantes zona 2: AaCcbb: 3201 aaccBb: 2451 AaccBb: 1131 aaCcbb: 1332 r2=
Dobles Recombinantes
3201+2451+1131 +1332 = 0,3326 24394
Frecuencias de recombinación: r1 = 0,26 r2 = 0,3326 r = 0,5926
Distancia entre A y C = 26cM Distancia entre C y B = 33,26 cM Distancia entre A y B = 59,26 cM
La frecuencia de recombinación en la zona 1 indica que los genes A y C se encuentran a una distancia de 26cM y la de la zona 2 que B y C están a 33,26cM. La suma de ambas indica la distancia entre A y B, 59,26cM. Esta última distancia, al ser mayor que 50cM (r=0,5) muestra que ambos genes no están ligados. Sin embargo, anteriormente hemos comprobado que sí lo están. Esto demuestra que las distancias obtenidas son aproximadas y no reales, ya que se han visto distorsionadas debido a la baja viabilidad de la variedad mutante.
A
C 26
B 33,26
59,26 5. Coincidencia
e interferencia
Coeficiente de coincidencia =
0,100967 0,086476
= 1, 17
Interferencia = 1−1,17 = -0,17
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6. Genotipo y fenotipo de las moscas en cada generación PARENTALES Genotipo Fenotipo Cuerpo Machos A_C_B_ Salvaje Hembras aaccbb Mutante
Alas Salvaje Mutante
Quetas Salvaje Mutante
Fenotipo Cuerpo Mutante Salvaje
Alas Mutante Salvaje
Quetas Mutante Salvaje
Fenotipo Cuerpo Salvaje Salvaje Salvaje Salvaje Salvaje Salvaje Salvaje Salvaje Mutante Mutante Mutante Mutante Mutante Mutante Mutante Mutante
Alas Salvaje Salvaje Mutante Mutante Salvaje Salvaje Mutante Mutante Salvaje Salvaje Mutante Mutante Salvaje Salvaje Mutante Mutante
F1 Genotipo Machos Hembras
a_c_b_ AaCcBb
F2 Genotipo Machos Hembras Machos Hembras Machos Hembras Machos Hembras Machos Hembras Machos Hembras Machos Hembras Machos Hembras
A_C_B_ AaCcBb A_c_B_ AaccBb A_C_b_ AaCcbb A_c_b_ Aaccbb a_C_B_ aaCcBb a_c_B_ aaccBb a_C_b_ aaCcbb a_c_b_ aaccbb
Quetas Salvaje Salvaje Salvaje Salvaje Mutante Mutante Mutante Mutante Salvaje Salvaje Salvaje Salvaje Mutante Mutante Mutante Mutante
Los machos sólo cuentan con un cromosoma X por lo que sólo tienen un alelo.
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1º Biotecnología
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