Práctica 1 espectrofotometro UV- VIS PDF

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Práctica 1: “Rutinas de diagnóstico”Analista: Flores Arellano MaricruzObjetivos: Identificar la región UV-Vis, saber que sucede en esa zona y saber utilizar el espectrofotómetro correspondiente para poder brindar el mejor análisis.Consideraciones teóricas:En el análisis de muestras de suelo y agua, ...

Description

Práctica 1: “Rutinas de diagnóstico” Analista: Flores Arellano Maricruz Objetivos: Identificar la región UV-Vis, saber que sucede en esa zona y saber utilizar el espectrofotómetro correspondiente para poder brindar el mejor análisis. Consideraciones teóricas:

En el análisis de muestras de suelo y agua, el espectrofotómetro constituye una herramienta fundamental para la cuantificación de nutrientes y contaminantes. Del correcto desempeño de este instrumento dependerá en gran medida la calidad de los resultados obtenidos, por lo que se considera un equipo crítico en los ensayos de laboratorio y que necesariamente deberá ser verificado periódicamente. La espectrofotometría es una técnica ampliamente utilizada en los laboratorios para el análisis cuantitativo de numerosos compuestos, debido principalmente a su sencillez operativa y a la rapidez en el análisis. La concentración de una sustancia puede ser calculada a partir de la cantidad de luz absorbida por una muestra, en el rango del espectro del ultravioleta (UV) y visible (Vis) aplicando la ley de LambertBeer. Por ello, para generar datos confiables es de gran importancia la verificación previa del funcionamiento del espectrofotómetro. Los principales parámetros a controlar en estos equipos son: la exactitud de la longitud de onda, la exactitud y precisión fotométrica, la linealidad fotométrica y la verificación de la luz difusa o parásita. Utiliza radiación electromagnética (luz) de las regiones visible, ultravioleta cercana (UV) e infrarroja cercana (NIR) del espectro electromagnético, es decir, una longitud de onda entre 380nm y 780nm. La radiación absorbida por las moléculas desde esta región del espectro provoca transiciones electrónicas que pueden ser cuantificadas. La espectroscopia UV-visible se utiliza para identificar algunos grupos funcionales de moléculas, y, además, para determinar el contenido y fuerza de una sustancia. Se utiliza de manera general en la determinación cuantitativa de los componentes de soluciones de iones de metales de transición y compuestos orgánicos altamente conjugados.

Desarrollo experimental Conectar el equipo a la corriente eléctrica.

Encender computadora e impresora.

Configuración de los niveles del espectrofotómetro, con los parámetros de la tabla.

Seleccionar absorbancia (A) en ordinate mode

Cambiar a la pestaña de instrumento.

Realizar un ajuste de blanco, con la medición de dos celdas vacias.

Encender el equipo, el espectrofotómetro.

Seleccionar el factor y colocar

Encender computadora e impresora.

Seleccionar niveles de absorbido y suavizado.

Seleccionar el slit y el cambio de lampara a 1nm.

Cambiamos a la pestaña de muestra.

Después presionar botón Ok. Realizar cálculos de desviación.

Sacar las celdas vacías y preparar las nuevas celdas.

Etiquetar las longitudes de onda y sacar el dato numérico.

Limpiar y secar las nuevas celdas, tapar y presionar ok.

Presionamos botón Ok. Obtención de espectro

Balance de blancos.

Sacamos una celda y colocamos dos gotas de óxido de holmio.

Realizar cálculos de desviación. Sacar las celdas vacías y preparar las nuevas celdas.

Limpiar y secar las nuevas celdas, tapar y presionar ok.

Balance de blancos.

Sacamos una celda Presionamos botón y colocamos dos Ok. Obtención de gotas de benceno. Conespectro la fórmula de equivalentes: Lavar y secar las Modificar de estándares Balance Modificar datos deV*N=V*N Preparación Cubrir con papel Mezclar con10 ácido veces de celdas; tapar y Aforar Modificar datos muestra de de landa, muestra a Rd y colocar aluminio. presionar Ok sulfúrico. blancos. de Kintervalos, cada matraz. 2Cr 2O7 P 3 t Etiquetar las longitudes de onda y sacar el dato numérico.

Realizar cálculos de desviación.

Preparar Tres soluciones.

Etiquetar picos y realizar los cálculos correspondientes.

Hacer un balance de blancos.

Aforar con ácido de sulfúrico.

Sacar una celda u colocar la muestra empezando por la de menor concentración, limpiar, meter y tapar.

Presionar Ok.

Cálculos Intervalo λ Modo Ordenada al límite Lámpara Velocidad de barrido Oxido de Hosmio

700-200 nm ABS 0-3 UV- Vis 120 nm/min

Datos Teóricos No. Longitud de onda (nm)

1 279

2 287

3 333.5

4 360.5

5 418

6 445

7 453

8 459.5

9 536

10 637

11 648.5

Datos Experimentales No. Longitud de onda(nm)

1 279.05

2 287.35

3 333.6

4 360.87

5 418.97

6 445.85

7 453.75

8 460.06

9 536.76

10 637.94

11 649.41

Calcular el % de desviación:

| |

d t −d e 279−279 .05 ∗100 %= ∗100 %=0.0179 279 dt

%d=

|

|

Donde: dt

= dato teórico

d e = dato experimental No. % de desviación

1 0.0179

2 0.1219

3 0.0299

4 0.1026

5 0.2320

6 0.1910

7 0.1655

8 0.1218

Benceno Intervalo λ Modo Ordenada al límite Lámpara Velocidad de barrido

280-230 nm ABS 0-1 UV 15 nm/min

9 0.1417

10 0.1475

11 0.1403

Datos Teóricos No. Longitud de onda (nm)

1 237

2 242.2

3 247.8

4 253.6

5 259.6

6 266.8

Datos Experimentales No. Longitud de onda(nm)

1 236.84

2 241.98

3 247.59

4 253.44

5 259.64

6 266.42

Calcular el % de desviación: %d=

d t −d e ∗100 dt

Donde: d t = dato teórico d e = dato experimental No. % de desviación

1 0.0675

2 0.0908

3 0.0847

4 0.0630

5 0.0154

6 0.1424

Porcentaje de desviación promedio 0.077336 K2Cr2O7 Intervalo λ Modo Ordenada al límite Lámpara Velocidad de barrido

450-250 nm ABS 0-1.5 UV- Vis 120 nm/min

Gráficos: Absorbancia(nm) vs C(ppm)

Observaciones:

Durante la práctica se observó que el espectrofotómetro es un instrumento muy utilizada para el análisis de varias muestras en el laboratorio actual, por lo que saber usarlo desde el encendido, la calibración, hasta el ajuste de distintas muestras es muy importante, ya que pudimos notar que cada una de las muestras tenia rangos de longitud distintas por lo que cada un mostro una gráfica distinta.

Conclusiones:

Se puede concluir que la calibración y ajuste de un equipo es esencial para garantizar un mejor análisis, a su vez se debe conocer todo el equipo de trabajo y su funcionamiento ya que conocer el proceso nos ayudara a comprender como se llevo a cabo dicho análisis. También deben de analizarse el origen de las muestras para conocer los estándares de trabajo y los limites permitidos ya que si estos son rebasados o muy bajos el análisis será erróneo y entre mas cerca este el ajuste del 1 será más preciso.

En los gráficos se pueden apreciar de mejor manera las longitudes de onda y poder colocar las etiquetas en ellas nos dieron los valores numéricos necesarios para realizar nuestros cálculos de desviación que no estuvieron fuera de rango.

Bibliografía:



https://www.youtube.com/watch?v=ad8e5jdTk2c

Práctica

1:

Rutinas

de

diagnóstico

(Espectrofotómetro de luz UV-Vis) Parte1. Luis Camacho. 

https://www.youtube.com/watch?v=TKcrckS0t4Y Práctica 1: Rutinas de diagnóstico (Espectrofotómetro de luz UV-Vis) Parte 2. Luis Camacho.



https://www.youtube.com/watch?v=nH3s5aHZllI . Práctica 1: Rutinas de diagnóstico (Espectrofotómetro de luz UV-Vis) Parte 3. Luis Camacho.



https://www.youtube.com/watch?v=0OVUfhjZxgU Práctica 1: Rutinas de diagnóstico (Espectrofotómetro de luz UV-Vis) Parte 4. Luis Camacho.



https://www.youtube.com/watch?v=RUIlwDM0BOU Práctica 1: Rutinas de diagnóstico (Espectrofotómetro de luz UV-Vis) Parte 5. Luis Camacho.



https://www.youtube.com/watch?v=Qsze0KaART4

204

-

UV

Visible

(Lambda 35 ). Canal: Chris Ambidge. 

F.C. Jentoft, Diffuse Reflectance IR and UV-vis Spectroscopy Fritz-HaberInstitut der Max-Planck-Gesellschaft. 2004....