Biologie cellulaire 3 PDF

Preview

Summary

2e année de Licence Biologie
RE et Théorie du signal...

Description

Cours 3 : Théorie du Signal et Réticulum Endoplasmique

TOUTES les protéines codées par le génome nucléaire commencent leur synthèse dans le cytosol. Certaines protéines terminent leur synthèse dans le réticulum endoplasmique → Une expérience historique a permis de mettre en évidence la traduction dans le Réticulum Endoplasmique Les

protéines destinées à la sécrétion sont fabriquées dans le RE.

Blobel et Dobbenstien ont découvert que les protéines ont un signal intrinsèque qui détermine leur transport et leur localisation dans la cellule Question: Existe-t-il un contrôle du ciblage des protéines au RE ? Approche expérimentale : Reconstitution in vitro du transport, vers le RE, des protéines en cours de traduction

→ Un signal de ciblage vers le RE a été identifié Reconstitution in vitro 1. Lyse mécanique des cellules par la technique du Potter - Autres techniques: Ultra-sons Lyse hypotonique Passage par un trou d’aiguille Bombe à cavitation (pression) 2. Centrifugations différentielles : voir fiche technique !! → Séparation des organites selon leur masse → Ne permet pas de séparer le RE de l’AG 3. Centrifugation sur gradient de densité (de saccharose) voir fiche technique !! → Séparation des organites selon leur densité

4. Traduction in vitro avec ou sans microsomes

5.

Résultats :

Revoir fiche

technique SDS-PAGE !!

Protéases dégradent les protéines accessible

ETAPE 1 : Séquence signal en N-ter reconnu par la SRP présente dans le cytosol. Cette SRP arrête la traduction. ETAPE 2 :Sur la face cytosolique du RE il les récepteur de la SRP → Fixation à la mb du RE ETAPE 3 :Récepteur de la SRP et proche d’un canal appelé complexe de translocation. ETAPE 4 :Reprise de la traduction ETAPE 5 :Une peptidase signal va cliver la protéine et et libérer de la protéine dans la lumière du RE Les protéines dans le RE peuvent subir des modification : 1. La N-glycosylation est une modification co-traductionnelle

2. Certaines cystéines sont impliquées dans la formation de ponts disulfures permettant la stabilisation de structure 3D 3. La glypiation (ancre GPI) permet à des protéines de s’ancrer dans la membrane Les protéines avec une ancre GPI ont une affinité pour les rafts (lieu ou les protéines sont très proche et peuvent déclencher un signal) Les cavéoles sont recouvertes de cavéoline RAPPEL : Existence de domaines membranaires

Les protéines transmembranaires synthétisées dans le RE ont différentes topologies

Schéma 15 :

Contrôle Qualité des protéines : les chaperonnes spécifiques des Glycoprotéines

Le Réticulum Endoplasmique est un compartiment hétérogène régionalisé

Le

Réticulum Endoplasmique et Bourgeonnement de vésicules → Identification du manteau et de son régulateur Analogues non hydrolysables du GTP : outils pour l’étude des GTPases

Reconstitution in vitro du bourgeonnement de vésicules à partir du RE et des protéines du cytosol

→ Analogue du GTP, on obtient des vésicules dense en électron

Manteaux COP 2 = Protéines sec + Sar 1 Les protéines Sec sont codées par les gènes sec identifiés lors des cribles génétiques de Randy Schekman

RE - AG Schéma 18 : RE → AG : - Sar 1 - COP 2 AG → RE - Arf 1 - COP 1

Les protéines résidentes du RE possèdent un signal et un récepteur de retour depuis le Golgi vers le RE BIP et PDI doivent retourner dans le RE car ce sont des protéines résidentes du RE. Elles portent un signal KDEL. (K= Lysine, D= Aspartate et E= Glutamate, L= Leucine ) La protéine transmembranaire est un récepteur au KDEL, donc fait partie de la membrane des vésicules qui retourne au RE La capacité d’interaction entre Rec KDEL ET KDEL dépend du pH Forte interaction dans l’AG...