Bitacora de la Practica No. 7 Efecto de la concentración del sustrato y de los inhibidores sobre la velocidad de la reacción PDF

Preview

Summary

Escuela Nacional de Ciencias BiológicasLaboratorio de Bioquímica3er Semestre3OMReyes Jimenez Nathan UlisesDocente: Dr. Gabriel Betanzos Cabrera.Fecha de entrega: 28-09-Ciclo escolar 2021-Introducción:En cualquier reacción catalizada, el sustrato debe unirse primero con la enzima para formar el compl...

Description

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas Laboratorio de Bioquímica 3er Semestre 3OM4 Reyes Jimenez Nathan Ulises Docente: Dr. Gabriel Betanzos Cabrera. Fecha de entrega: 28-09-2021 Ciclo escolar 2021-2 Practica No.7 Efecto de la concentración del sustrato y de los inhibidores sobre la velocidad de la reacción Introducción: En cualquier reacción catalizada, el sustrato debe unirse primero con la enzima para formar el complejo enzima-sustrato. Para una concentración de sustrato particular, un aumento en la concentración enzimática aumenta la velocidad de la reacción catalizada. A concentraciones enzimáticas más altas, más moléculas están disponibles para unirse al sustrato y catalizar la reacción. Mientras la concentración de sustrato sea mayor que la concentración de la enzima, hay una relación directa entre la concentración de la enzima y la actividad enzimática. En muchas reacciones catalizadas por enzimas, la concentración del sustrato es mucho mayor que la concentración de la enzima. Cuando la concentración de enzima se mantiene constante, la adición de más sustrato aumentará la velocidad de la reacción. Si la concentración del sustrato es alta, puede saturar todas las moléculas de la enzima. Entonces la velocidad de la reacción alcanza su máximo y la adición de más sustrato no aumenta más la velocidad de la reacción. En el caso de los inhibidores, una de las formas de regulación de la actividad de una enzima es a través de moléculas que disminuyen su velocidad de reacción. Los inhibidores pueden encontrarse de manera natural en las células para controlar la velocidad de una reacción metabólica, o bien pueden ser compuestos sintéticos que se utilizan como herramientas experimentales para el estudio de las reacciones enzimáticas. Muchos compuestos tóxicos como antibióticos, pesticidas o herbicidas son inhibidores de enzimas responsables de reacciones vitales para la célula. La interacción de un inhibidor y una enzima varía dependiendo de la naturaleza química del inhibidor y de la reacción química que cataliza la enzima. Para dilucidar el tipo de interacción entre ambas moléculas se determina el efecto del inhibidor en las constantes cinéticas de la enzima.

Objetivos:   

Analizar el efecto de la concentración del sustrato sobre la velocidad de la reacción enzimática. Determinar la constante de Michaelis-Menten (Km) de forma gráfica por los métodos de Michaelis- Menten y Lineweaver- Burk. Determinar el tipo de inhibición producido por una sustancia (anilina) sobre la actividad de la invertasa.

Diagrama de flujo: Practica No.7 Efecto de la concentración del sustrato y de los inhibidores sobre la velocidad de la reacción

Procedimiento para el efecto de la concentración del sustrato sobre la velocidad de reacción.

NOTA: Antes de iniciar este experimento revise el procedimiento general

a) Preparar una serie de tubos de acuerdo con el siguiente cuadro:

Procedimiento para el efecto del inhibidores sobre la velocidad de reacción.

a) Preparar una serie de tubos de acuerdo con la siguiente tabla. La solución de inhibidor (anilina 1.6 mM) será proporcionada por el profesor:

FIN

Bibliografía:   



Mathews C. 1992. Bioquímica, 2da edición, Ed. McGraw-Hill pp. 398-433. Voet D, Voet JG. 1992. Bioquímica. Ed. Omega S.A. pp. 342-378. Bennett NG, Gutfreund H. 1973. The Kinetics of the interconversion of intermediates of the reaction of pig muscle lactate dehydrogenase with oxidized nicotinamide-adenine dinucleotide and lactate. Biochemistry Journal 135, 81-85. Nelson D. 2004. Principles of Biochemistry. 2004, 4a edition Ed. Freeman and company, pp.202-233....