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Miranda Estrada Areli Yazmin Laboratorio de Química Orgánica Practica 4

Cromatografia en capa fina Introducción La cromatografía de capa fina se conoce normalmente por sus siglas en inglés (TLC, thin layer chromatography). Es una técnica muy utilizada para la identificación y determinación de pureza de compuestos. También puede utilizarse como técnica de separación (cromatografía de capa fina TLC preparativa) a muy pequeña escala. En esta técnica la fase estacionaria es una capa fina de gel de sílice u otro soporte con propiedades adsorbentes (en nuestro caso de 25 mm de espesor) dispuesta sobre un soporte de vidrio o aluminio que denominaremos placa. El eluyente o fase móvil será la mezcla de disolventes adecuada. La cromatografia de capa fina es un procedimiento que se utiliza para separar moléculas relativamente pequeñas. La separación de mezclas de moléculas mediante la cromatografía de capa fina se basa en el principio del reparto entre dos fases. Al igual que otras cromatografías, consiste de una fase estacionaria y una fase móvil y el principio es el mismo: la sustancia de interés se adherirá a la fase estacionaria o se moverá con la fase móvil, viajando una distancia que es inversamente proporcional a la afinidad por la fase estacionaria. La fase estacionaria puede ser variada. Puede ser de papel, de celulosa o de un gel de silicato (vidrio molido bien fino) unido a una superficie sólida (una placa de vidrio, aluminio, plástico o papel). Esta superficie sólida puede ser rígida o flexible. El tipo de fase estacionaria que se utilice en un experimento dependerá del tipo de moléculas que se quieran separar. Incluso vienen algunas placas con indicadores fluorescentes. La fase estacionaria consiste de un solvente que puede ser agua, un solvente orgánico o una mezcla de ambos. Objetivos de aprendizaje ▪ Que el alumno comprenda los fundamentos de la cromatografía en capa fina, haga un análisis de los resultados que aporta esta técnica y conozca la aplicación de ésta en diversas áreas.

▪ Que el alumno haga uso de las TICs y adquiera habilidades tecnológicas y las aplique en el desarrollo de las actividades en las actividades a distancia. Preguntas de enganche

• ¿Qué es la cromatografía en capa fina? — Es una técnica muy utilizada para separar moléculas relativamente pequeñas, identificarlas y determinar la pureza de sus compuestos. Esta separa a los compuestos por su polaridad.

• ¿Cuáles son los tres componentes de la cromatografía en capa fina? — Fase estacionaria, fase movil y el soluto

• ¿Qué muestras biológicas podrías trabajar en la cromatografía en capa fina? ¿Cómo se visualizan los componentes en la placa cromatográfica? — Lípidos. Los componentes están dispuestos en una capa delgada en una placa en lugar de estar empaquetada en una columna.

• ¿Qué es el factor de retención? — Es la relación entre la distancia recorrida por un componente y la distancia recorrida por la fase móvil. Materiales — 3 frascos de 50 ml con tapa — Placas de gel de sílice — Tubos capilares — Regla — Lápiz — Camara de yodo — Pinzas — Lampara UV — Hexano — Acetato — Probeta — Toalla de papel

Diagrama de flujo

Actividad 2: Nombre Fenol

Estructura química

Rf 0

Nombre

Estructura química

Rf

Acido benzoico

0

Butil- fenil eter

Nombre

0.04

Estructura química

Rf

Aspirina

0.45

Acetaminofen

0.27

Nombre

Estructura química

Cafeina

Rf 0.07

Análisis de resultados En la primer tabla solo el butil-fenil eter se movió lo suficiente para considerarse una distancia medible, lo que significa que es la sustancia menos polar, mientras que el fenol y el acido benzoico apenas se movieron por lo cual son demasiado polares. Esa caracteristica es la que hace que el separado de estas sustancias sea menos eficaz en el solvente usado, en este caso el hexano. Los compuestos menos polares son los que siempre viajaran mas en la placa. En la segunda tabla fue la cafeína el compuesto mas polar de las tres sustancias que se utilizaron, por lo tanto fue la que menos viajo en la placa. El acetaminofen quedo en medio mientras que la aspirina, siendo la menos polar, viajo mas. Como se observa en las tablas es el Rf el que se relaciona también con la polaridad de las sustancias pues al ser este menor significa que ese compuesto es bastante polar, sin embargo si el Rf aumenta, entonces la polaridad disminuye. Actividad 3. Esta nueva técnica llamada cromatografia de capa fina bidimensional conduce a la pre concentración de las zonas de soluto durante los desarrollos de placas bidimensionales y se separan consecutivamente con el uso de los gradientes de fase movil y el cambio progresivo de desarrollo. Este método logra separar con una mayor fiabilidad los diferentes compuestos de una mezcla multi componente de acuerdo a su variación polar. Esto, claramente, facilita el aislamiento de los compuestos para su seguida identificación. Por lo tanto esta técnica es útil para separar los componentes de las plantas, como se ve en la experimentación, también ayuda a la determinación de pureza para los distintos compuestos que se tengan.

Bibliografía — Harry W. Lewis Daniela R.P & Christopher J. Moody (1989). Experimental Organic Chemistry: Principles and practice. — Zweig, G. and Sherma, J. (1978). Handbook series in chromatography. CRC Handbook Series in Chromatography. Section A: General data and principles. Vol II. CRC Press, USA. — Abbot D. y Andrews R. S. Introducción a la Cromatografía. 3a. Ed. Alhambra, Madrid, 1970 — Harris, D. C. 2001. Análisis Químico Cuantitativo. Ed. Reverté S. A., España. Ed. Mac Graw Hill Interamericana. — Luna-Rangel, R. 1981. Fundamentos de Química Analítica. Vol. I. Ed. Limusa México...