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Practica de como hacer la iluminación de kohler asi como el uso adecuado de un microscopio tomando en cuenta su limpieza...

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Universidad de Quintana Roo “Fructificar la razón: Trascender nuestra cultura” División de Ciencias de la salud

Tema: Práctica #2 Uso adecuado del microscopio y Práctica #3. Iluminación de Kholer (Realizadas el 13/09/2019) Asignatura: Ecología Humana Docente:

Chetumal Quintana Roo a 19 de septiembre de 2019 Objetivo 1. Que el estudiante: a) Conozca e identifique las partes de un microscopio óptico y sus funciones. b) Adquiera habilidad en la utilización eficiente del microscopio. c) Comprenda la utilidad que tiene el microscopio, en el campo de investigación. 2. Configuración del microscopio: Los componentes ópticos deben de ser alineados correctamente para la obtención de imágenes óptimas.

Introducción El siguiente reporte es acerca del uso adecuado del microscopio y la iluminación de Kholer. Antes de comenzar debemos definir que es un microscopio, sabemos que este es un instrumento el cual nos permitirá observar objetos demasiado pequeños para ser vistos a simple vista. Existen diversos tipos de microscopios, pero el más común, así como el primero que se invento fue el microscopio óptico. Este se trata de un instrumento óptico que posee una o varias lentes que nos permitirán obtener una imagen aumentada del objeto y que funcionara por refracción. Hooke y Malpighi, emplearon lentes simples en el estudio de las características estructurales de ciertos micro objetos. En 1664 Hooke describió las estructuras de los mohos. Antón Van Leeuwenhoek fue la persona que logro ver con cierto detalle los microorganismos, en 1670 tuvo un microscopio de su propia fabricación. Por los años 1673-1723 pulía lentes pequeñísimos con tan perfección que logro obtener en algunas un aumento hasta de 270 diámetros. Se calcula que llego a construir 247 microscopios y diseñó y pulió 419 lentes para objetivos. En 1931 Knoll y Ruska fabricaron el primer microscopio electrónico, cuyo perfeccionamiento en 1950 permitió; la observación de tejidos; logrando así la facilitación en la comprensión de las relaciones estructurales y funcionales de los compuestos supra-macromoleculares, así como los diferentes niveles de organización biológica. El óptico John Marshall, creó la novedad del condensador de luz, el cual es un lente colector que se coloca bajo la platina, así mismo diseñó la columna articulable. Christian G. Hertel, aproximadamente en 1710, acondicionó por primera vez el espejo plano para la luz refracta y construyó una platina desplazable (platina móvil) en todos sentidos mediante tornillos, a la par que le dotaba de un micrómetro de tornillo para su consiguiente graduación focal. En esa misma época, James Wilson, perfecciono en algo las lentes y los medios de iluminación, llegando a dotar al aparato óptico hasta un aumento de cuatrocientos diámetros. En la segunda mitad del siglo XX, se incrementó en forma significativa el número de conocimientos relacionados con la estructura celular y molecular asociadas a su función, desde 1858 en que Virchow emitió el enunciado: “Las células son la unidades estructurales y funcionales de la vida y por lo tanto las unidades estructurales de la enfermedad”. Lo cual, aunado a los grandes avances tecnológicos permitió; vincular en forma sustentada la Biología, Bioquímica, Histología, Genética e Inmunología.

Metodología Materiales  

Microscopio Preparación de muestra (opcional)

Procedimiento 

Uso adecuado del microscopio

1. Observar el microscopio y describir o definir cada una de sus partes de forma individual. 

Iluminación de kholer

Seleccionar un microscopio y asefurarse de que este funcione

Encender el microscopio

Ajustar la la fuente de iluminación

Subir completamente el condensador con la lentilla puesta en 0.9

Enfocar una preparacion con objetivo de 10X (en este caso no se empleo dicha preparación)

Ajustar el condensador para campo claro

Cerrar el diafragma de campo y encontrar el haz luminoso (prisma hexagonal)

Una vez hecho esto bajar lentamente el condensador hasta observar nitidamente el hexagono

Centrar el hexagono utilizando los tornillos de portacondensador

Dar contraste a la imagen con el diafragma de iris

Abrir el diafragma hasta que el campo claro este iluminado de forma completa

Resultados y observaciones 

Uso adecuado del microscopio Se logro identificar cada parte del microscopio, así como su correcto uso 

Iluminación de Kholer Se identifico lo requerido en la práctica.

En ambas imágenes se observa el luminoso ya centrado.

prisma hexagonal o haz

En la segunda imagen se parecía el nitidez.

haz luminoso con mejor

Prisma hexagonal una vez abierto el diafragma y puesto el contraste.

Discusión Se realizo una comparación con la iluminación de Abbe en la cual para lograr la iluminación correcta este método utiliza un instrumento denominado refractómetro al método óptico el cual se encargara de determinar la velocidad de propagación de la luz en un medio contra la velocidad de la luz al vacío, esto a su vez tiene una relación directa con la densidad de este medio, por lo tanto, este instrumento en la iluminación es demasiado exacto (alta precisión) y también ayuda en la determinación del índice de refracción de las muestras sólidas, sustancias o fluidos, en comparación con la iluminación de Kholer solo es aplicado en microscopios ópticos para detallar la luz y esta no sea demasiado luminosa o con baja iluminación

Conclusión El microscopio es un instrumento de laboratorio que se utiliza para obtener una imagen aumentada de objetos minúsculos o detalles muy pequeños de los mismos. Este nos permitirá describir las características y funciones de los distintos organismos unicelulares y pluricelulares, es fundamental que sabe identificar las partes ópticas y mecánicas, lo cual sirve como conocimiento previo para subsecuentes prácticas.

La iluminación de Kholer funciona para poder observar un espécimen con un campo uniforme de luz igual al del diámetro del área de captura del objetivo.

Experiencias de aprendizaje En cuestión a la practica de uso adecuado del microscopio al momento de identificar las partes de este mismo se nos generaba la duda de si estábamos en lo correcto al momento de identificar las partes, así como su localización en el microscopio es por ello por lo que después de la practica acordamos volver a repasar las partes del microscopio. En el caso de la iluminación de Kholer tuvimos una cuantas dificultades debido a que dudábamos sobre las partes del microscopio y no estábamos del todo seguras; posteriormente a eso se siguió todo el procedimiento y aunque teníamos ciertas dudas sobre si estábamos en lo correcto por ende optamos por acudir con la profesora para la confirmación del progreso de la práctica, la primera vez fue un poco difícil el conseguir el haz luminoso pero se logró y se prosiguió la practica hasta la obtención del campo claro he iluminado de forma completa, sin embargo cuando tuvimos que volver a enfocar el campo fue difícil debido a que nos equivocamos y en vez de buscar el campo claro he iluminado de forma completa nosotras estábamos queriendo enfocar el haz luminoso, una vez ocurrido esto se le informo a la profesora la cual nos ayudó a conseguir el campo correcto.

Referencias EcuRed: Enciclopedia cubana, [Internet] Microscopio, [Citado el 16 Sept. de 2019] Disponible desde: https://www.ecured.cu/Microscopio Manual de parasitología, [Internet] Técnicas para Laboratorios de Atención Primaria de Salud y para el Diagnóstico de las Enfermedades Infecciosas Desatendidas [Citado el 17 Sept. de 2019] Disponible en: http://www.bvs.hn/Honduras/Parasitologia/ManualParasitologia/flash/files/res/downloads/page_003 7.pdf Anónimo. (2013) Microscopia [internet][Citado el 18 Sept de 2019] Disponible en: https://medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/conclusiones.htm Facultad de ciencias medicas y de la salud, Laboratorio de microbiología [Internet] Universidad Mariano Gálvez de Guatemala [Consultado el 18 Sept de 2019] Disponible en: https://www.academia.edu/10904828/Reporte-microbiologia-1 Euromex.com. (2019) Refractometro de Abbe para laboratorio – Euromex [Internet] [Consultado el 18 Sept de 2019] Disponible en: https://www.euromex.com/es/productos/productos/refractmetros/refractmetro-de-abbe-paralaboratorio/

1. ¿Por qué es útil el microscopio? Tiene diferentes usos, para la salud nos ayudara en el estudio de enfermedades, virus, bacterias o todo aquel microorganismo que sea un riesgo para la salud. 2. ¿Cuáles son los principales cuidados que se deben tener en cuenta en el uso del microscopio?

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Procurar dejar el microscopio en un mismo sitio. Cuando no esté en uso, mantenga el microscopio cubierto y protegido del polvo. No tocar el instrumento con manos sucias o grasosas. Economice la vida de la lámpara, asegurándose de ejecutar la iluminación correcta. Si el diafragma del condensador está cerrado, ya podrá darle toda la intensidad a la lámpara, gastándola innecesariamente, que no logrará mejor iluminación. Si no hace contraste, tampoco verá nada. No permita que líquidos, ácidos o aceites ensucien el microscopio. No utilizar lentes de mayor aumento sin cubrir la preparación con un cubreobjetos. No dejar el objetivo de inmersión lleno de aceite. Usar papel de lente, con movimientos suaves y circulares para limpiarlo luego de usarlo. Muchos recomiendan xilol para limpiar las lentes mal cuidadas, con aceite o sucio resecado sobre ellas. Es preferible, sin embargo, usar un poco de éter en vez de xilol para evitar despegar las lentes ya que el xilol es disolvente de pegamento. Utilice un aplicador con algodón en la punta humedecido en éter. Páselo por las lentes grasosas y limpie inmediatamente con papel de lentes limpio.

3. Explique las razones porque NO deben tocarse los lentes de un microscopio con los dedos Porque al hacerlo dejaríamos partículas propias de los dedos las cuales interferirían con los lentes del objetivo y el ojo humano, dando como resultado una imagen borrosa o no muy clara afectando así los resultados 4. Investigue sobre las buenas practicas en el uso de microscopio 1. Quitar la funda protectora del microscopio. 2. Enchufar el microscopio 3. Colocar en primera instancia el objetivo de menor aumento para lograr un enfoque correcto 4. Subir el condensador utilizando el tornillo correspondiente 5. Colocar la laminilla histológica sobre la platina, con el cubreobjetos hacia arriba y sujetándola con las pinzas 6. Colocar la lampara en la posición correcta y encenderla 7. Enfocar la lámina mirando a través del ocular y lentamente mueva el tornillo macrométrico 8. Realizar la observación (hacer anotaciones). Determinar cuál es la estructura que se va a observar a mayor aumento y colocarla en el centro del campo. 9. Cambiar el objetivo de mayor aumento. Si se realizó el enfoque de manera correcta con el objetivo anterior, al colocar el objetivo de mayor aumento la imagen solo se debe enfocar girando única y lentamente el tornillo micrométrico 10. Una vez finalizada la observación colocar nuevamente el objetivo de menor aumento para retirar más fácilmente el preparado histológico 11. Retirar el preparado histológico y colocarlo en el porta-laminas 12. Apagar la lampara, desenchufar y colocar el cable alrededor del microscopio de manera holgada y sin apretarlo y cubrir el microscopio con su funda protectora 5. Investigue sobre los diferentes tipos de microscopios y su utilización 

Microscopia de fluorescencia:

Conta de una fuente de luz (lámpara de mercurio o halógena) la cual debe emitir la mayor cantidad de luz ultravioleta, el microscopio y un sistema de filtros, tiene como objetivo permitir el paso de ondas de luz con longitud en el rango azul con el fin que el preparado sea alcanzado exclusivamente por la luz azul y produzca emisión de luz fluorescente.

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El microscopio confocal: Es un microscopio óptico que incorpora dos diafragmas: Un diafragma de iluminación localizado tras la fuente luminosa denominado Pinhole de Excitación, cuya utilidad es eliminar la luz proveniente de planos superiores e inferiores al plano focal, aumentando con ello la claridad y resolución de la imagen; y Un diafragma de detección, de tamaño variable situado delante del fotodetector, denominado Pinhole de Emisión.

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El microscopio electrónico: Utiliza electrones para iluminar un objeto. Dando que los electrones tienen una longitud de onda mucho menor que la de la luz puede mostrar estructuras mucho más pequeñas.

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Microscopio electrónico de transmisión (MET): Permite la observación de muestra en cortes ultrafinos, no mayores de un par de miles de ángstroms. Se coloca una placa fotográfica o una pantalla fluorescente detrás del objeto para registrar la imagen aumentada, pueden aumentar un objeto hasta un millón de veces.

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Microscopio electrónico de barrido: Crea una imagen ampliada de la superficie de un objeto. No es necesario cortar el objeto en capas para observarlo con un MEB, sino que puede colocarse en el microscopio con muy pocos preparativos. El MEB explora la superficie de la imagen punto por punto, al contrario que el MET, qué examinó una gran parte de la muestra cada vez....