Histo - Cours 2 - partie 1 - Tissu conjonctif . PDF PDF

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tissu conjonctif...

Description

Cours 2 : Tissu conjonctif :

Le prélèvement tissulaire permet de faire de l'histologie ou de la pathohistologie. L'inclusion en paraffine (liquide et chaude) permet la solidification (ou congélation rapide) Paraffine = matériel hydrophobe -> nécéssité de deshydrater l'échantillon (bains d'alcool de force croissante) Coupe de 3 à 4 µm d'épaisseur puis colorations :

- type HES : Hématéine-Eosine-Safran (la plus utilisée) - Immunohistochimie : réaction Anticorps-Antigène --> expression d'un protéine au sein d'un tissu spécialisé - Hybridation in situ en fluorescence FISH : sur l'ADN

Important volume intersticiel (mec) : Ces cellules paraissent isolées mais peuvent communiquer entre elles. Grandes distances intercellulaires (cellules apparemment isolées)

Etude du tissu conjonctif : ils dérivent tous d'un même tissu embryonnaire : le mésenchyme embryonnaire (issu du mésoblaste). Ce sont des cellules indifférenciées totipotentes (= peuvent encore se différencier).

Matrice extracellulaire : substance fondamentale riche en hyaluronane et dépourvue de fibres matures Persistance après la naissance de Cellules Souches Mésenchymateuses (CSM), pluripotente

Persistance dans les tissus conjonctifs de quelques cellules pluripotentes = Cellules souches mésenchymateuses adultes, qui ont encore la possibilité de se différencier en cellules osseuses, ou chondrocytes (cartilages) ou à du tissu adipeux (adipocytes)

Le tissu conjonctif est innervé et vascularisé : nerfs et vaisseaux inclus dans la gaine du tissu conjonctif (ex : squelette : TC avec une composante osseuse et cartilagineuse)

Résistance tension/pression

ou

rôle de cohésion et de remplissage.

Stockage de métabolites, d'eau et d'électrolytes. Remplissage-lien-cohésion Enveloppe conjonctive autour des nerfs

Protection : Formation de capsules --> Protection des organes parenchymateux (ex : la ratte). Invagination de temps en temps pour cloisonner la ratte : protection très limitée --> Rupture de la ratte --> Hémorragie intra-abdominale importante.

Consistance solide dans le cas du squelette.

Défense : micro-organismes pathogènes ou corps étranger (non spécifique ou spécifique --> système lymphocytaire)

Métabolique : Diffusion de molécules (électrolytes, facteurs de croissance...) et réservoir (énergétique, hydro-électrolytique...)

* Les cellules fixes/résidentes du tissu conjonctif Elles ont des caractéristiques communes : - dérivent toutes du mésenchyme - synthèse et entretien (Destruction ?) des différentes macromolécules de la matrice extra-cellulaire - possèdent des mécanismes d'adhérence à cette matrice extra-cellulaire.

Phase active

Phase quiescente

Tissu conjonctif commun

Fibroblaste

Fibrocyte

Tissu adipeux

Lipoblaste

Adipocytes

Tissu cartilagineux

Chondroblaste

Chondrocyte

Tissu osseux

Ostéoblaste

Ostéocyte

Fibroblaste --> extremement sensible, grande activité de synthèse organisée selon des messages. Lipoblaste --> Peu présent chez l'adulte Chondroblaste --> peu chez l'adulte Tissu osseux --> en perpétuel renouvellement TC --> caractérisé par des vimentines

Fibroblaste / Fibrocyte

Filaments intermédiaires de vimentine

Fibroblaste = grande activité de synthèse (précurseurs des GAG, du collagène, de l'élastine, de fibronectine, facteurs de croissance...) Important volume cytoplasmique Appareil de Golgi et REG développés Mitochondries plus nombreuses Ancrées à la matrice (interactions intégrine-fibronectine) Sensibles à leur environnement ++ (interactions-directionnelles bi par l'intermédiaire de récepteurs de type intégrine) Prolongements cytoplasmiques unis par des jonctions communicantes et adhérentes --> Formation d'un réseau Ne sont pas entourés d'une lame basale

Les fibroblastes (cellules extremement complexes) interagissent avec la mec par l'intermédiaire des intégrines. Leurs prolongements cytoplasmiques sont unis par des jonctions communicantes et adhérentes Fonctions des fibroblastes : * Production/Synthèse des constituants de la matrice extra-cellulaire (collagène, élastine, Glycosaminoglycanes, protéoglycanes, Glycoprotéines d'adhérence ou de liaison)

* Dégradation des constituants de la matrice extra-cellulaire (synthèse des métalloprotéases (collagénases...), capacité de phagocyter les fibres)

* Participation à la synthèse de la lame basale séparant les cellules (épithéliales/endothéliales, musculaires, adipeuses du tissu conjonctif)

* Coopération avec kératinocytes / organisation jonction dermo-épidermique : Co production de collagène IV (lame basale) et de collagène type VII

* Cellules immunomodulatrices (synthèse de cytokines, de facteurs chimiotactiques)

Les myofibroblaste : Cellules présentant des propriétés à la fois des fibroblastes (capacité proliférative et synthèse de collagène (mec)) et des cellules musculaires lisses (capacité de contraction)

Contiennent des protéines contractiles (actine/corps denses, Myosine) et de la desmine N'ont pas de lame basale Peu nombreux dans les tissus normaux (éparpillés dans les tissus conjonctifs lâches : cloisons des alvéoles pulmonaires, pourtour des glandes du tube digestif) mais apparaissent dans le tissu cicatriciel. Cellules fusiformes Ne peuvent pas être distingués des fibroblastes à l'aide des colorations usuelles (Hématéine Eosine Safran) Ultrastructure et immunohistochimie (anticorps dirigé contre l'actine musculaire lisse)

Lésion tissulaire : Cicatrisation :

Coupure = perte de substance : derme et épiderme * Activation et multiplication des fibroblastes (certains se transforment en myofibroblastes) * Multiplication des myofibroblastes Synthèse d'une nouvelle matrice extracellulaire pour combler la perte de substance. * Réparation des pertes de tissu par production de collagène (cicatrice) * Contraction des myofibroblastes entrainant une rétraction de la zone tissulaire lésée ("rapprochement" des berges) * Apoptose des myofibroblastes

Pathologie : Si les myofibroblastes ne font pas d'apoptose, on a une prolifération des myofibroblastes, une augmentation de collagène : production excessive de matrice extracellulaire => Cicatrice cheloïde (= hypertrophique)

* Les cellules libres

- Mastocytes : Cellules ubiquitaires (= dans tous les tissus) Mais majoritairement sous les épithéliums, au pourtour des vaisseaux et des nerfs (épinèvre) : peau (derme : autour des follicules pilo-sébacés et des glandes sudorales), chorion des muqueuses (intestinale, bronchique) et sous les séreuses (Péritoine).

Ils viennent du tissu ostéo-médullaire (dont moelle osseuse) avec des précurseurs (précurseurs mastocytaires qui subit sa maturation terminale dans le tissu conjonctif) : il n'y a pas de mastocytes matures dans le sang, que des précurseurs

CSM : Maturation terminale Durée de vie longue, Capacité de prolifération

Dans tissu conjonctif : * Inflammation à médiation Ig E (Hypersensibilité immédiate, Inflammation, Manifestations allergiques (L'histamine intervient dans les réactions allergiques). * Cicatrisation des plaies (modulation phases inflammatoires, de contraction, de prolifération, de dépôts de MEC, modifications vasculaires...)

Cytoplasme avec de nombreuses granulations

Beaucoup de point commun avec les polynucléaires basophiles : Mastocyte et polynucléaire basophile = nombreuses ressemblances structurales et fonctionnelles = acteurs majeurs de la réaction allergique

Mastocytes : Noyau N central, non masqué par les granulations (une vingtaine de microns) Polynucléaire basophile : le noyau est masqué par les granulations (G) (12 microns)

Mastocyte

Polynucléaire basophile

Localisation

Tissulaire

Sanguine

Maturation terminale

Dans les tissus périphériques

Dans la moelle osseuse

Durée de vie

Plusieurs mois

Quelques jours

Capacité de prolifération dans les tissus conjonctifs

Oui

Non

Forte augmentation de leur nombre dans : * Rhinites allergiques * Urticaire, asthme * Parasitoses

Mastocyte

Granulations

Contenu des granulations

Polynucléaire basophile

Basophiles, bleu-violet foncé (May-Gründwald-Giemsa/MGG) Rouge pourpre avec certains colorants basiques (bleu de toluidine) → Métachromasie (Propriétés de certains colorants d'émettre des couleurs différentes en fonction des composants avec lesquels ils interagissent)

Héparine (anti-coagulant)/chondroïtine sulfate Histamine (vasodilatateur, augmente la perméabilité vasculaire, contraction muscle lisse des voies bronchiques Leucotriènes

Récepteurs de suface + de haute affinité Réaction d'hypersensibilité immédiate pour les IgE Complexes IgE-allergène = dégranulation Histamine = molécule très basoactive (effet important sur les vaisseaux). Son action sur la contraction du muscle lisse peut expliquer les crises d'asthme Pour traiter les allergies : anti-histaminiques ou anti-leucotriènes . Ou promoglycates (empêchent la dégranulation des mastocytes) Mécanisme de dégranulation : en rapport avec les récepteurs de surface de haute affinité. Le patient rencontre un allergène, il fabrique des IgE dirigés contre cet allergène qui se fixent sur les récepteurs du mastocytes Au 2e contact : complexe IgE/allergène => Dégranulation Les Ig E se fixent sur le mastocyte lors du 2eme contact avec l'allergène => Déversement dans le tissu --> Possibilité de choc anaphilactique.

Lymphocytes - Plasmocytes Monocytes - Macrophages : phagocytes mononuclées

Granulocytes/Polynucléaires (un seul noyau polylobé) --> 12 µm

Eosinophile : granulation colorée par éosine : bilobé Basophile : granulation bleuté : bilobé mais masqué par les granulations intercytoplasmiques

* Polynucléaires neutrophiles = Polynucléaires les plus nombreux dans le sang circulant = Première ligne de défense contre les infections bactériennes Les premiers polynucléaires neutrophiles arrivent sur le site lésé quelques minutes après l'agression, attirés par des molécules chimiotactiques : diapédèse. (Chimiotactisme/attirés par substances chimiques produites les tissus lésés et les bactéries) ou

par le biais des macrophages qui sont des sentinelles et peuvent envoyer des signaux aux PNN pour que ceux ci arrivent rapidement sur le site de l'agression . Phagocytose et destruction des bactéries . Résorption des tissus endommagés

Précurseurs des granulocytes dans le tissu ostéomédullaire. Les granulocytes / polynucléaires gagnent le tissu conjonctif par diapédèse. Ce processus est augmenté au cours de l'inflammation Ne peut pas survivre plus de quelques jours dans les tissus. Au niveau du site d'infection bactérienne : amat de polynucléaire = Pus (normalement mort par apoptose)

Les polynucléaires neutrophiles :

Ont peu d'organites (faible activité de synthèse protéique) Sont adaptés au métabolisme anaérobie (quelques mitochondries, réserves de glycogène) Contiennent des granulations délimitées par une membrane : * substances bactéricides (myélopéroxydase, lysozyme) * substances bactériostatiques (lactoferrine) * enzymes de dégradation de la MEC (gélatinases)

Arthrite septique --> détruit le cartilage par réaction inflammatoire :

Attaque bactérienne de la synoviale : si elle n'est pas prise à temps : destruction totale de l'articulation en une semaine => C'est une urgence thérapeutique

Ces cellules n'ont plus de noyaux parce qu'elles sont mortes. On voit les polynucléaires neutrophiles qui nettoient les cellules nécrosées. Valable dans le cas de petit infarctus.

* Polynucléaires éosinophiles (PNE) - peu nombreux dans le sang circulant (demi-vie de 4-5 heures) - Passent dans les tissus (peau, poumons et appareil digestif) Proportion d'éosinophiles dans les tissus cent fois plus importante que celle du sang - Cellules mobiles : Capables de phagocytose Pouvoir anti-bactérien inférieur à celui des polynucléaires neutrophiles

Les granulations éosinophiles correspondent à des lysosomes riches en hydrolases et en péroxydases

Augmentation des polynucléaires éosinophiles Dans les infections parasitaires : Rôle anti-parasitaire ++ Phagocytose, libération du contenu des granulations Récepteurs de surface pour les IgE (absents sur les polynucléaires neutrophiles) qui pourraient être impliqués dans la destruction des parasites. Dans les réactions inflammatoires liées à l'allergie

Polynucléaires éosinophiles et parasites (parasitoses à helminthes)

Maladie = bilharziose. Le parasite entre par voie cutanée, les femelles pondent des centaines d'oeufs dans l'organisme humain => Réaction inflammatoire des tissus = influx de polynucléaires éosinophiles qui essaient de détruire le parasite.

* Les lymphocytes Ils sont à l'origine de réaction immunitaire dirigée / spécifique

C'est la seule cellule qui a une possibilité de retour dans la circulation sanguine. Noyau occupant 80 à 90% du volume de la cellule. Cytoplasme basophile réduit à un étroit liseré : fort rapport nucléo-cytoplasmique = gros noyau et tout petit cytoplasme

- Lymphocytes B : différenciation dans la moelle hématopoietique - Lymphocytes T : différenciation dans le thymus

Les lymphocytes L vont dans les organes secondaires : ratte et ganglions lymphatiques Dans les tissus : Attaque d'un antigène spécifique --> Capable de diapédèse. Lymphocyte B et lymphocyte T se différencient grâce à l'immunohistochimie (Anticorps spécifique d'une série B ou T) : Impossible avec une coloration MGG (= May-Gründwald-Giemsa) Lymphocytes B circulent dans les organes lymphoïdes (rate, ganglions lymphatiques . . . --> rencontre un antigène --> active le lymphocyte B --> Dans le tissu conjonctif : Plasmocytes --> Synthèse d'anticorps spécifique : Immunoglobuline (chaines lourdes + chaines légères)

Ganglions lymphatiques, rate, tissu lymphoïde associé aux muqueuses/MALT LB "activé" Ne se multiplient pas

Chaines lourdes : A, G, M, D, E

Chaines légères : κ, λ

Meurent par apoptose (qqs jours/sem) Etape finale de maturation d'une sous population de LB ayant rencontré un Ag A l'état normal : pas de plasmocytes dans le sang (sauf tumeurs plastocytaires)

* Les plasmocytes Plasmocytes = Stade de maturation terminal --> apoptose au bout de quelques jours Normalement rares au sein du tissu conjonctif, excepté Dans le chorion de la muqueuse du tube digestif (production d'IgA, déversées dans la lumière digestive et ayant pour rôle la reconnaissance et la neutralisation des agents pathogènes)

Deviennent nombreux en cas d'inflammation chronique (situation pathologique) L'inflammation s'est poursuivie (soit antibiothérapie ou chirurgie) dans le temps : les cellules qui prédominent sont les plasmocytes Noyau excentré : Chromatine condensée en mottes (M) (disposées en rayon de roue) --> Transcription +++ Cytoplasme basophile (riche en réticulum endoplasmique granuleux) Halo clair périnucléaire (arcoplasme : A) --> Appareil de Golgi

Prolifération tumorale plasmocytaire (myélome ou plasmocytome = ne touche qu'un seul os)

Population de plasmocytes exprimant uniquement un type de chaîne légère d'immunoglobuline ("normalement", 2 chaines légères possibles κ ou λ)

Tumeur plasmocyte = myélome (ou plasmocytome si localisé) --> Un seul type de chaine légère (au lieu de 2) Maladie qui touche le squelette --> "Trou dans les os"

* Système des monocytes-macrophages / des phagocytes mononuclées

Précurseur dans la moelle hématopoiétique qui donne un monoblaste puis un monocyte Les monocytes passent 1 à 3 jours dans le sang puis font une diapédèse = migration dans les tissus Différenciation dans les organes lymphoïdes secondaires, dans sinus musculaires --> Phagocyte les antigène puis le préente aux lymphocytes Macrophages tissulaires : Dans le foie : cellules de Küpffer Dans les os : Ostéoclastes Dans le cerveau : Microglie Dans les poumons : Macrophages alvéolaires Macrophages des sinus des ganglions lymphatiques, de la rate Macrophages péritonéaux

Cellules présentatrices d'antigènes : Cellule de Langerhans Cellule dendritique interdigitée Cellule folliculaire dendritique Activation : Macrophages activés : Cellules épithélioïdes Cellules géantes

Monocyte : Cellule de grande taille (20µm). Noyau incisuré, réniforme. Cytoplasme vacuolisé. Mobilité, phagocytose

Macrophages : 20 à 50 µm. Noyau excentré. Cytoplasme vacuolisé. Mobilité, phagocytose

Fonctions des macrophages : Rôle de sentinelles : interviennent dans les infections ou lors d'intrusion de particules étrangères Activation (par cytokines, lipoprotéines bactériennes, protéines des parasitres, hypoxie, produits de dégradation de la MEC,...) Phagocytose (microorganismes, débris cellulaires, cellules en apoptose, complexes antigèneanticorps)

Récepteurs permettant la détection de micro-organismes

Orchestrent les réponses immunitaires (recrutent les autres cellules de défense en secrétant des chimiokines pro-inflammatoire)

Coopèrent avec les polynucléaires neutrophiles (phagocytose des bactéries et des débris tissulaires)

Coopèrent avec les lymphocytes (cellules présentatrices d'antigènes aux lymphocytes T)

Participent à la réaorganisation et l'homéostasie tissulaires - stimulation de l'angiogenèse et de la prolifération des fibroblastes - sécrétion de métalloprotéases (permettent de dégrader la MEC et de phagocyter les

cellules mortes) , élimination des cellules nécrotiques, apoptotiques ou sénescentes

Echange entre alvéole et sang, mais pour cela il faut que les alvéoles soient vides (rôles des macrophages) Si saignement intrapulmonaire : les alvéoles se remplissent de sang, les échanges gazeux ne se font plus.

Certaines bactéries (comme le bacille? de la tuberculose) ou des particules étrangères peuvent entrainer la transformation des éléments macrophagique : plusieurs macrophages fusionnent = cellule géante plurinucléée

Ou cellule épithélioïdes qui semblent jointives : ce sont des macrophages transformés en réponse à une aggression

Tuberculose = infection par un bacilochore(?) Destruction/nécrose de toute une partie du poumon

Bilharziose hépatique : Cellules macrophagiques géantes multinucléées (CMGM) autour des oeufs de bilharzie (OB)

On aura transformation d'une macrophage en cellule géante plurinucléée pour isoler les oeufs du reste des tissus.

* La matrice extra-cellulaire Substance fondamentale : gel matriciel, hydraté, transparent, riche en eau, visqueux : comble les espaces entre cellules et fibres Protéines fibrillaires (fibres) Seules les fibres de la matrice extra-cellulaire sont visibles sur coupe histologique (coloration par Hématéine Eosine Safran) Beaucoup de substance fondamentale --> TC lâche Substance fondamentale : Glycosaminoglycanes (GAG) Protéoglycanes (GAG + protéines) Glycoprotéines de structure/d'adhérence (fibronectine, laminines) Liquide extracellulaire (plasma) Eau (99%) Ions Protéines de très bas poids moléculaire AA, ... Glycosaminoglycanes (GAG) Volumineux polysaccharides * très hydrophiles (retiennent l'eau) * portant de nombreuses charges négatives (retiennent les ions positifs (Na+)) * Peuvent se lier de manière covalente à des protéines : protéoglycanes - 4 groupes : GAG

Liaison covalente à une protéine Distribution

Hyaluronane
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