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Histologia – Células do Sangue    

O sangue é uma variedade de tecido conjuntivo, ou seja, formado por células e matriz extracelular. As células são os elementos figurados e a matriz o plasma, líquido que confere as propriedades do sangue. Funções: Transporte de gases, hormônios, age como tampão na homeostase, participa na coagulação, transporte de células de defesa e nutrientes. O sangue está contido em um compartimento fechado que o mantém em movimento regular e unidirecional, devido às contrações rítmicas do coração. É formado pelos glóbulos sanguíneos e pelo plasma, parte líquida. Os glóbulos vermelhos são os eritrócitos ou as hemácias, as plaquetas e diversos tipos de leucócitos ou glóbulos brancos.

Estudo histológico das células sanguíneas: extensão ou esfregaço. Leitura dos esfregaços: três tipos de carregura (screening): -1º tipo: horizontal; -2º tipo: vertical (mais recomendado); -3º tipo: usado em revisão de lâminas previamente negativas, pelo menos 30 campos em 1 ou 2 min. Hematócrito: resultado do processo pelo qual o sangue é centrifugado, separando-se em várias camadas que refletem sua heterogeneidade.    

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O componente amarelo, translúcido e sobrenadante é o plasma. A camada inferior tem cor vermelha e é composto pelos eritrócitos. A camada imediatamente superior tem cor acinzentada e contém os leucócitos, que são menos densos que os eritrócitos. O sangue é principalmente um meio de transporte. Sendo assim, pode transportar leucócitos, ou seja, células que desempenham funções de defesa, atravessando a parede de vênulas e capilares por diapedese. Diapedese é a saída ativa de leucócitos do sistema circulatório, por movimentos ameboides. O plasma também transporta nutrientes e metabólitos dos locais de absorção ou síntese, distribuindoos pelo organismo. Transporta hormônios, possibilitando a troca de mensagens químicas entre os órgãos distantes. Tem ainda papel regulador na distribuição de calor, no equilíbrio acidobásico e no equilíbrio osmótico dos tecidos.

Composição do Plasma:  

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O plasma é uma solução aquosa que contém componentes de pequeno e de elevado peso molecular. Composto por proteínas plasmáticas, sais inorgânicos, aminoácidos, vitaminas, hormônios, glicose, entre outros. Os componentes de baixo peso molecular estão em equilíbrio com o líquido intersticial dos tecidos, através das paredes dos capilares. Por isso, a composição do plasma é um indicador da composição do líquido extracelular. As principais proteínas do plasma são albuminas, as alfa, beta e gamaglobulinas, lipoproteínas e as proteínas que participam da coagulação do sangue, como protrombina e fibrinogênio.

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As albuminas desempenham papel fundamental na manutenção da pressão osmótica do sangue, portanto, deficiência em albuminas causa edema generalizado. As gamaglobulinas são anticorpos, portanto, também chamadas de imunoglobulinas.

Eritrócitos:  

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Os eritrócitos, ou hemácias, são anucleados e contém grande quantidade de hemoglobina, proteína transportadora de O2 e CO2. Não saem do interior dos vasos, diferente dos leucócitos. Os eritrócitos humanos possuem a forma de disco bicôncavo, o que proporciona grande superfície em relação ao volume, facilitando as trocas gasosas. São flexíveis, passando pelas bifurcações dos capilares mais finos, onde sofrem deformações temporárias, porém não se rompem. Por serem ricos em hemoglobina, que é uma proteína básica, os eritrócitos são acidófilos, corando-se pela eosina. A forma bicôncava é mantida por proteínas estruturais do citoesqueleto ligados à membrana da hemácia, como, por exemplo, espectrinas, anquirinas, actinas, proteína 4.1 e banda 3. Anormalidades ou deficiências dessas proteínas causam formação de eritrócitos deformados, como ocorre na esferocitose e eliptocitose hereditária. Eritrócitos usam apenas energia derivada da glicose. A hemoglobina é a proteína básica e apresentam uma palidez central quando observada com corantes de Romanowski. A hemoglobina é formada por quatro subunidades, cada uma contendo um grupo heme ligado a um polipeptídeo. O grupo heme é um derivado porfirínico que contém Fe 2+. Devido a variações nas cadeias polipeptídicas, distinguem-se as hemoglobinas A1, A2 e F. A A1 e A2 representam, respectivamente, 97% e 2% da hemoglobina do adulto normal. A hemoglobina F é característica do feto. Ao fim de 120 dias, os eritrócitos são digeridos pelos macrófagos, principalmente no baço. A membrana plasmática é rica em enzimas, proteínas integrais (glicoforinas e banda 3) e periféricas (espectrias alfa e beta, aducina, aniquirina).

Leucócitos:  

São incolores, de forma esférica quando em suspensão no sangue e têm função de proteger o organismo contra infecções. São produzidos na medula óssea ou em tecidos linfoides e permanecem temporariamente no sangue. São classificados em dois grupos: os granulócitos e os agranulócitos.

Granulócitos: núcleo de forma irregular e mostram no citoplasma grânulos específicos que aparecem envoltos por membrana. Distinguem-se três tipos de granulócitos: Neutrófilos, eosinófilos e basófilos. Além disso, possuem grânulos azurófilos que se coram em púrpura, são lisossomos. Agranulócitos: núcleo com formato mais regular e o citoplasma não tem granulações específicas, podendo apresentar grânulos azurófilos, inespecíficos, presentes também em outros tipos celulares. Há dois tipos: os linfócitos e os monócitos.

Neutrófilos: 

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Também chamados de leucócitos polimorfonucleares, são células arredondadas com núcleos formados por dois a cinco lóbulos (mais frequentemente três) ligados entre si por finas pontes de cromatina. A célula muito jovem possui núcleo não segmentado em lóbulos, sendo chamado de neutrófilo com núcleo em bastonete, ou simplesmente, bastonete. Apresentam grânulos específicos e azurófilos. Enquanto os azurófilos (lisossomos) contêm proteínas e peptídios destinados à digestão e morte de microorganismos, os específicos, além de apresentar enzimas importantes no combate aos microorganismos, também têm componentes para reposição de membrana e auxiliam na proteção da célula contra agentes oxidantes. Granulações Azurófilas ou Primárias: lisossomos contento fosfatase ácida, peroxidase e diversas outras hidrolases. Isso é característico de todos os leucócitos. Granulações específicas ou secundárias: síntese continua durante toda a vida do neutrófilo. Contém fosfatase alcalina, colagenase, lisozima e substâncias bactericidas e bacteriostáticas. Defesa celular – emitem pseudópodos e fagocitam microorganismos invasores. O núcleo apresenta heterocromatina periférica e no centro eucromatina. A célula pode estar fazendo síntese de enzimas lisossomais. Apresenta organelas pouco desenvolvidas e dentro dos grânulos azurófilos há proteoglicanos sulfatados, importantes para manter os diversos componentes do grânulo em estado quiescente.

Eosinófilos:

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São muito menos numerosos do que os neutrófilos e possuem o mesmo tamanho que os neutrófilos, aproximadamente. Seu núcleo em geral é bilobulado. O RER, as mitocôndrias e o complexo de Golgi são pouco desenvolvidos. Apresentam granulações ovoides que se coram pela eosina (acidófilas). Cada grânulo tem uma parte central discoide e densa aos elétrons, denominada internum. O principal componente do internum é a proteína básica arginina, que corresponde 50% das proteínas do grânulo. A camada que envolve o internum é menos densa aos elétrons, denominada externum e é rica em proteínas catiônicas eosinofílicas, peroxidase eosinofílica e neurotoxina derivada de eosinófilos. Essas proteínas possuem como atividade principal a antibacteriana e antiparasitária. Os eosinófilos secretam citocinas e mediadores inflamatórios lipídicos (leucotrienos), que exacerbam na resposta inflamatória. Também apresentam antígenos para os linfócitos.

Internum: elétron-densa. Proteína básica – arginina; Externum: menos elétron-densa – fosfatase ácida, peroxidase, arilsulfatase.

Basófilos:      

Possuem núcleo volumoso, com forma retorcida e irregular, geralmente com aspecto de letra de S. O citoplasma é carregado de grânulos maiores do que os dos outros granulócitos. Sua meia vida no sangue é estimada em 1 a 2 dias. Assim como os grânulos dos mastócitos, são metacromáticos. Contêm histamina, fatores quimiotáticos para eosinófilos e neutrófilos, heparina (responsável pela metacromasia do grânulo). Sua membrana plasmática, assim como a dos mastócitos, apresenta receptores para a imunoglobulina E (IgE). Os basófilos também secretam citocinas e leucotrienos, que são mediadores inflamatórios.

Linfócitos: 

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São responsáveis pela defesa imunológica do organismo. Reconhecem moléculas estranhas existentes em diferentes agentes infecciosos, combatendo-as por meio de resposta humoral (produção de imunoglobulinas) e resposta citotóxica mediada por células. São células esféricas. Os linfócitos pequenos possuem núcleo esférico, as vezes com chanfradura. Cromatina disposta em grumos grosseiros, tornando o núcleo escuro. Citoplasma escasso e presenta basofilia discreta, corando-se em azul-claro, sendo pobre em organelas. São divididos em linfócitos B, T e NK e podem retornar dos tecidos para o sangue novamente.

Monócitos: 

São os maiores leucócitos circulantes.

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Possuem núcleo ovoide, em forma de rim ou de ferradura, geralmente excêntrico. Cromatina pouco condensada, portanto, o núcleo dos monócitos é mais claro do que o dos linfócitos. Seu núcleo contém 2 ou 3 nucléolos. Seu citoplasma é basófilo e contém grânulos azurófilos (lisossomos) muito finos. Esses grânulos podem preencher todo o citoplasma, dando-lhe uma coloração acinzentada. Contém pequena quantidade de polirribossomos e retículo endoplasmático granuloso pouco desenvolvido. Há muitas mitocôndrias e o complexo de Golgi é grande, formando azurófilos. Apresenta muitas microvilosidades e vesículas de pinocitose. O monócito faz parte do sistema mononuclear fagocitário ou sistema histiocitário.

Plaquetas:    

São corpúsculos anucleados, com forma de disco, derivados de células gigantes e poliploides da medula óssea, os megacariócitos. Promovem a coagulação do sangue e auxiliam a reparação da parede dos vasos sanguíneos, evitando perda de sangue. Permanecem no sangue por aproximadamente 10 dias. Apresentam uma parte transparente, azul-clara, o hialômero, o qual contém grânulos corados em púrpura, que constituem o cromômero.

As plaquetas têm um sistema de canais, o sistema canicular aberto, que se comunica com invaginações da membrana plasmática da plaqueta. Assim, facilita a liberação de moléculas ativas que são armazenadas nas plaquetas. HEMOCITOPOESE  

É o processo contínuo e regulado de produção de células do sangue, que envolve renovação, proliferação, diferenciação e maturação celular. As células do sangue são constantemente renovadas a partir de proliferação mitótica de células localizadas nos órgãos hemocitopoéticos. As primeiras células sanguíneas são originadas do mesoderma do saco vitelínico. Essa fase da hemocitopoese é denominada mesoblástica, caracterizada por eritroblastos primitivos. Após isso, ocorre migração para o fígado das células dos vasos em desenvolvimento, fazendo o órgão funcionar temporariamente como órgão

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hemocitpoético, processo chamado hemocitopoese definitiva ou hepática. É nessa fase que desenvolve-se eritroblastos, granulócitos e monócitos; as primeiras células linfoides e megacariócitos aparecem. Com o início da ossificação, começa a fase medular da hemocitopoese. Após o nascimento, as células sanguíneas se originam a partir de células-tronco da medula óssea vermelha.

Fases: Mesoblástica – mesoderma do saco vitelino (eritroblasto).   

Hepática: eritroblastos, granulócitos e monócitos. Medular – medula óssea. Na vida pós-natal – células tronco na medula óssea vermelha.

Modelo Estocástico: é aleatório. Não existe um fator que determina essa célula a se auto-renovar ou a se auto-diferenciar. As células que apresentam capacidade de diferenciação apresentam o modelo indutivo, que através de interações célula-célula e fatores secretados (FC/citocinas), fazem expressão de diferentes genes, sendo induzidas a se transformarem em um determinado tipo de célula. Células tronco, fatores de crescimento e diferenciação: As células-tronco originam células filhas que possuem dois destinos: permanecem como células-tronco (autorrenovação) e outras se diferenciam em outros tipos celulares. Acredita-se que a decisão inicial de autorrenovação ou diferenciação seja aleatório (modelo estocártico) e depois o microambiente induza a diferenciação específica em determinada célula (modelo indutivo). Células-tronco pluripotentes: as células do sangue derivam todas desta célula. Forma duas linhagens: a das células linfoides e a das células mieloides. As células-tronco pluripotentes formam as células progenitoras multipotentes que originam células precursoras (blastos). A frequência da mitose aumenta muito nas células progenitoras e precursoras. A hemocitopoese depende de fatores de crescimento hemocitopoéticos, que regulam a proliferação, diferenciação, apoptose de células maduras. Dentre eles, encontram-se interleucinas, fatores estimuladores de colônia e citocinas. Medula Óssea:    

Órgão difuso, porém volumoso e muito ativo. É encontrada no canal medular dos ossos longos e nas cavidades dos ossos esponjosos. Distingue-se em medula óssea vermelha, hematógena e medula óssea amarela, rica em células adiposas e não produz células sanguíneas. A medula óssea não tem vasos linfáticos.

Medula óssea vermelha: constituída por células reticulares associadas a fibras reticulares (colágeno tipo III). O endotélio dos capilares e as células reticulares são fontes de citocinas hemocitopoéticas. A matriz extracelular, além de colágeno tipo I e III, contém fibronectina, laminina, tenascina, trombospondina, vitronectina, glicosaminoglicanos, proteoglicanos e Hemonectinas. Maturação dos eritrócitos: O processo básico é a síntese de hemoglobina e a formação de um corpúsculo pequeno e bicôncavo, que oferece o máximo de superfície para as trocas de oxigênio. De acordo com o

grau de maturação, as células eritrocíticas são chamadas de: proeitroblastos, eritroblastos basófilos, eritroblastos policromáticos, eritroblastos ortocromáticos (ou acidófilos), reticulócitos e hemácias. 

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O proeritroblasto é uma célula grande que apresenta todas as características de uma célula que sintetiza proteínas. Possui núcleo esférico central, cromatina com estrutura delicada e um ou dois nucléolos grandes. O citoplasma é intensamente basófilo, com uma região clara ao redor do núcleo. O ferro é levado para eles pela transferrina, uma proteína plasmática transportadora de ferro. O eritroblasto basófilo possui cromatina condensada em grânulos grosseiros. Não há nucléolos visíveis. O eritroblasto policromático possui um núcleo com uma cromatina ainda mais condensada. Possui hemoglobina suficiente para aparecer uma acidofilia citoplasmática. O eritroblasto ortocromático ou normoblasto possui núcleo com cromatina muito condensada, é picnótico. É rico em hemoglobina, tornando o citoplasma acidófilo, podendo apresentar traços de basofilia, devido a restos de RNA. Após a expulsão do núcleo, a parte anucleada passa a ser chamada reticulócito, que apresenta algumas mitocôndrias e muitos polirribossomos, que ainda sintetizam hemoglobina. O reticulócito difere do eritrócito por conter vestígios de RNA. Saem da medula óssea vermelha e vão para o sangue, onde se diferenciam em eritrócitos.

Granulocitopoese:    

Ocorrem modificações citoplasmáticas caracterizadas pela síntese de muitas proteínas, que são acondicionadas em grânulos azurófilos e os específicos. São sintetizadas no retículo endoplasmático e endereçadas no aparelho de Golgi, em dois estágios sucessivos. O primeiro resulta na produção de grânulos azurófilos, que se coram por corantes básicos (Giemsa, Wright) e contêm enzimas do sistema lisossomal. No segundo estágio, ocorre modificação na atividade sintética da célula, com a produção de proteínas dos grânulos específicos. Tais grânulos possuem diferentes proteínas dependendo do tipo de granulócito.

Maturação dos granulócitos:     

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O mieloblasto é a célula mais imatura determinada para formar os três tipos de granulócitos. Quando nela surgem granulações, passa a ser chamada de promielócito neutrófilo, eosinófilo ou basófilo, conforme o tipo de granulação existente. Os estágios seguintes são: mielócito, metamielócito, granulócito com núcleo em bastão e o granulócito maduro. O mieloblasto possui citoplasma basófilo e grânulos azurófilos. Núcleo grande, esférico, com cromatina delicada e um ou dois nucléolos. O promielócito é menor. Núcleo esférico, as vezes com reentrância. Cromatina mais grosseira, nucléolos visíveis em esfregaços corados com misturas tipo Romanowsky. Contém grânulos específicos ao lado dos azurófilos. O metamielócito possui núcleo com chanfradura profunda, indicando o início da formação dos lóbulos.  Policitemia (câncer de medula óssea, produção exagerada de hemácias), Anemia, Leucocitose, Leucopenia, Trombocitopenia, Trombocitose e Aplasia....