Informe DE Practica No. 5 Grupo N°2 PDF

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DIFERENTES TÉCNICAS DE SIEMBRA...

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ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO INFORME DE PRACTICA DE LABORATORIOS ASIGNATURA MICROBIOLOGIA Dra. Nelly Guananga

INFORME DE PRÁCTICA N° 5 DIFERENTES TÉCNICAS DE SIEMBRA INTEGRANTES:

CÓDIGOS:

AGUIAR YESSENIA

3671

CAMINO JOCELYNE

3600

CHICAIZA MISHELL

3562

INSUASTI KEVIN

3678

MAJI EDISON

3488

GRUPO No.: 2 PARALELO: CUARTO “B” FECHA DE ENTREGA: 2021-01-16

1. OBJETIVOS: GENERAL Aplicar las diferentes técnicas de siembra en medios de cultivo solido ESPECÍFICOS ▪

Preparar medios de cultivos sólidos.

▪

Aplicar los diferentes métodos de siembra.

▪

Evaluar los cultivos obtenidos.

2. RESULTADOS 2.1. TABLA RESULTADOS Y OBSERVACIONES TÉCNICA DE SIEMBRA 0 HORAS Inoculacion de muestra de superficie de baño El tipo de siembra que se observa es el de superficie.

TÉCNICA DE SIEMBRA 24 HORAS

TÉCNICA DE SIEMBRA 48 HORAS

TÉCNICA DE SIEMBRA 72 HORAS

OBSERVACIONES

0 HORAS: No se observa cambios. 24 HORAS: Se puede visualizar la presencia del crecimiento de colonias alrededor de la muestra 48 HORAS: Se observa que las colonias están esparcidas y son de color blanco 72 HORAS: Hay presencia de colonias que las distingue de color blanco, son planas, de forma circular y con margen ondulado. 0 HORAS: No se observa cambios. 24 HORAS: Se observa la presencia de pequeños puntos blancos 48 HORAS: Se observa el crecimiento aumentado 72 HORAS: Se puede observar las colonias en todas las placas de un color blanco, son planas, de forma circular.

2.2. CUESTIONARIO -

¿Se pueden observar formación de colonias en los medios de cultivos solidos elaborados?

Si, si se pueden observar la formación de colonias en los medios solidos que se elaboraron en casa de manera casera. -

¿Cuál muestra del caldo de cultivo selecciono para esta práctica? ¿Por qué?

Seleccionamos la muestra que contenía NaCl con la muestra del medio ambiente en este caso, la del baño y la escogimos porque tenía un crecimiento exponencial y turbio. -

¿De acuerdo con la facilidad de observar la morfología y demás características de las colonias, cual técnica considera adecuada (sustente)?

Técnica de siembra por estría en placa, por ser el método más fácil para poder aislar un tipo de microrganismos en un cultivo que contiene varios, pues este proceso se realiza en forma di zigzag con un asa (hecha en casa) la cual se esteriliza cada cierto tiempo para que así se vayan escogiendo un solo tipo de células las cuales se dividirán formando colonias visibles. En donde estos microorganismos sean un clon derivado. (Nacional, 2009) -

¿Con cuál de las técnicas puede apreciarse individualmente las colonias?

Técnica de extensión en placa -

¿De acuerdo con la facilidad de observar la morfología y demás características de las colonias, cual técnica considera adecuada (sustente)?

Siembra en superficie o siembra en placa con asa Digralsky Esta técnica de siembra, además de permitir el aislamiento de colonias, permite el recuento de bacterias viables en la muestra, Este tipo de siembra se recomienda para microorganismos aerobios estrictos (CBtis28, 2019)

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¿Con cuál de las técnicas puede apreciarse individualmente las colonias?

Siembra en profundidad o por vertido en placa.

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¿Para qué casos específicos se aplican cada una de las técnicas de siembra?

Técnica de siembra por estría en placa: Forman estrías sobre la superficie en varios sentidos cada célula aislada se multiplica formando una colonia. Técnica de extensión en placa: Para obtener un mayor número de colonias aisladas, se eligen cuando se ha de seleccionar una cepa a partir de una mezcla con varios tipos de microorganismos, las células diseminadas sobre la superficie forman colonias aisladas. (Torre, 2016) Siembra en superficie o siembra en placa con asa Digralsky: Este tipo de siembra se recomienda para microorganismos aerobios estrictos. Siembra en profundidad o por vertido en placa: Esta técnica tiene la finalidad de obtener colonias aisladas para la obtención de un cultivo puro, o bien para la cuantificación. (Urzúa, 2014) Siembra con isopo hisopo: recomendado para estudiar superficies muy contaminadas, ya que permite realizar diluciones decimales de la muestra.

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¿De acuerdo a los componentes utilizados, cual es la composición química del medio de cultivo solido preparado? ¿A cuál de los medios solidos comerciales se semeja?

Componen utilizados ✓ Grenetina. ✓ Azúcar.

✓ Caldo papa

de

✓ Cubo Maggi ✓ Carne

Tripteina Soya Agar( TSA): Medio utilizado para propósitos generales, favorece el desarrollo y aislamiento de una gran variedad de microorganismos aerobios y anaerobios facultativos y estrictos, contienen el agente solidificante (generalmente agar al 1,5-2%).

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¿De acuerdo a la clasificación de los medios de cultivos según su consistencia, composición, utilización y origen, a cuál pertenece el medio de cultivo preparado en esta práctica?

Según su consistencia: medio sólido Según su composición: medios complejos Según su utilización: enriquecidos Según su origen: medio natural

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En la práctica anterior (No.4) uds describieron el/los tipo(s) de microorganismos que crecieron según los nutrientes del tipo de caldo de cultivo y medio ambiente de crecimiento, partiendo de este análisis, indiquen que tipo(s) de microorganismo inocularon en esta práctica? y que tipo(s) de microorganismos se desarrollaron (considere las condiciones y elementos de nutrición?

✓ Microorganismo que Inocularon Microorganismos Aerobios y Anaeróbicos ✓ Microorganismos que se desarrollaron Anaerobios Facultativos como la Actinobacillus y Staphylococcus: Estos microorganismos se desarrollaron tuvieron una variación de temperaturas entre 20 y 25°C, no en toda la placas se desarrollaron, específicamente fueron en las técnicas en tubo Siembra por punción y estría y en placa Siembra en superficie o siembra en placa con asa Digralsky, 3. CONCLUSIONES ▪

Al realizar el medio de cultivo sólido tomamos en cuenta todos los pasos a seguir empezando con una correcta esterilización de todos los implementos que vamos a utilizar para la preparación del mismo cultivo, se parte de un medio líquido al que se le añade un agente solidificante como el agar, la gelatina o la sílicagel.

▪

Para las diferentes técnicas de siembra en medios de cultivo solido encontramos la técnica de Tubos con agar inclinado: Este tipo de siembra permite el cultivo de microorganismos aerobios o anaerobios facultativos y además se utiliza para almacenar cultivos durante cortos períodos de tiempo a temperaturas de 4ºC, o para la amplificación de un inóculo pequeño, y la técnica de Siembra en placas: Puede ser en superficie (utilizando espátula de Drigalski, ansa o hisopo) o por mezcla (el inóculo con el medio de cultivo agarizado aún fundido, a temperatura de unos 45ºC, se mezclan y se vierte en la placa de Petri, como se explica en detalle más adelante).

▪

Al observar los distintos medios de cultivo conseguimos los resultados deseados, la visualización de las colonias en la superficie, en un tiempo dado de 0 horas, 24 horas, 48 horas y 72 horas donde se valora el crecimiento de estas colonias, su coloración y turbidez en el caso de Siembra por punción donde se hace presente esta característica, además de la presencia de ciertos microorganismos en los diferentes medios de cultivo como Staphylococcus y Actinobacillus y el último haciéndose presente tanto en Siembra con isopo como En tubo Siembra por punción.

4. RECOMENDACIONES ▪

Debemos tener mucho cuidado durante la desinfección de todos los materiales que serán utilizados en la realización de la práctica de laboratorio ya que estos pueden ser un interferente al momento de la realización de esta.

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Se debe tener muy claro la técnica de siembra en medios de cultivo solido en el cual todos los microorganismos que se utilizaron en esta práctica se desarrollan.

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Etiquetar debidamente el material de vidrio antes de verter los medios de cultivo en ellos.

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Utilizar las medidas de higiene necesarias para no contaminar el cultivo con el cual se va a trabajar ya que esto conllevaría a que obtengamos datos erróneos o en otros casos la muestra a analizar no se desarrolle.

5. BIBLIOGRAFIA CBtis28. (2 de Noviembre de 2019). labdemicrobiologia. Obtenido de labdemicrobiologia: https://labdemicrobiologia.wixsite.com/scientist-site/tcnicas-y-tipos-de-sembrado Nacional, U. T. (2009). https://www.frro.utn.edu.ar/. Obtenido de https://www.frro.utn.edu.ar/repositorio/catedras/quimica/5_anio/biotecnologia/p racticoIII.pdf Torre, J. D. (20 de Abril de 2016). Slideshare. Obtenido de Slideshare: https://es.slideshare.net/jareddelatorre/tecnicas-de-siembra-61122322 Urzúa, C. (2 de Diciembre de 2014). Universidad Nacional Utónoma de México . Obtenido de Universidad Nacional Utónoma de México : http://mediacampus.cuaed.unam.mx/node/4254

6. ANEXOS Anexo N°1. Colocación de la papa, carne y cubito de caldo en 500 ml de agua

Anexo N°2. Filtración del preparado anterior

Anexo N°3. colocación de la gelatina sin sabor en el filtrado de la mezcla

Anexo N°4. Tapamos el envase con papel film

Anexo N°5. Preparación de los envases para verter el medio de cultivo sólido

Anexo N°6. colocación de la mezcla en los recipientes

Anexo N°7. Esperando que los medios de cultivo se solidifiquen

Anexo N°8. Poniendo la muestra en los medios de cultivo

Anexo N°9. Dejando reposar las muestras en la caja de cartón durante 3 días...