Informe LAB N°2 (2) (2) - Microbiología de un laboratorio final grupal donde se habla del compost PDF

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Microbiología de un laboratorio final grupal donde se habla del compost...

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INFORME LABORATORIO N° 2 DE MICROBIOLOGÍA AMBIENTAL “ANÁLISIS BACTERIOLÓGICO” Apellidos y Nombres Contreras Ramos, Esther Meza de la Cruz, Wendy Yohana Molina Quiñones, Katherine Lizbeth Rodríguez Melgarejo, Milagros

Código U19211313 U18100700 U19202232 U18300616

Objetivos -

Aplicar la siembra por agotamiento o estrías para realizar el análisis bacteriológico de las manos en agar nutritivo. Evaluar la eficacia de diferentes marcas de jabones en la desinfección de manos. I.

Descripción de las actividades en el laboratorio. (2 puntos)

EXPERIMENTO 1: Análisis bacteriológico 1. Preparación del agar  4 gramos de agar  150 mililitros de agua destilada 1. Preparar el agar  Mezclar el agua con el agar en el matraz. Tapar con el papel aluminio y disolver en fuego para el cual se puede usar el mechero bunsen o cocina eléctrica. 2. Realizar proceso de autoclave por 15 min o

Autoclave automática (121 °C con 15 libras de presión)

3. Retirar de la autoclave 4. Dejar enfriar a 40 °C 5. Añadir 15 mililitros de la mezcla a 10 placas Petris 6. Señar con el plastigrafo 2. Siembra

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1. Esterilizar el área de trabajo con alcohol de 70% 2. Esterilizar el aire con mecheros 3. Esterilizar las manos

 Área de la mesa Materiales o

Marca o señalizador

o

Hisopos estériles

Procedimiento 1) Dibujar un cuadrado de 10x10 en una hoja y recortar 2) Humedecer el isopo con suero fisiológico 3) Tomar muestra 4) Pasar el hisopo por la placa Petri en forma de zigzag o por agotamiento 5) Tapar y rotular

 Baranda de la escalera Materiales Hisopo Papel Procedimiento -

Dibujar un rectángulo de 10 x20 cm y recortar

-

Humedecer el isopo con suero fisiológico

-

Tomar muestra

-

Introducir el hisopo en suero fisiológico debido a la carga

-

Pasar el hisopo por la placa Petri en forma de zigzag o por agotamiento

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-

Tapar y rotular

 Lavatorio y manija de la taza del baño Materiales -

Hisopo

Procedimiento -

Humedecer el isopo A con suero fisiológico

-

Tomar muestra del lavado Figura 1

Nota. Se tomaron muestra de dos lavados. -

Pasar el hisopo por la placa Petri en forma de zigzag o por agotamiento

-

Tapar y rotular

-

Humedecer el hisopo B con suero fisiológico

-

Tomar muestra de la manija Figura 2

Nota. Se tomaron muestras solo de una taza de baño -

Pasar el hisopo por la placa Petri en forma de zigzag o por agotamiento

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-

Tapar y rotular

 Frutas a) Manzana sin legía Materiales -

Hisopo

Procedimiento -

Humedecer el isopo A con suero fisiológico

-

Tomar muestra de la fruta sin lavar Figura 3

Nota. Manzana sin legía -

Pasar el hisopo por la placa Petri en forma de zigzag o por agotamiento

-

Tapar y rotular b) Manzana con legía

-

Medir 12.5 mililitros de legía con una pipeta

-

Colocar en el vaso precipitado de 500 ml

-

Llenar el vaso precipitado hasta los 500 mililitros

-

Dejar 5 min

-

Humedecer el isopo con suero fisiológico

-

Tomar muestra de la fruta lavada

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-

Pasar el hisopo por la placa Petri en forma de zigzag o por agotamiento

-

Tapar y rotular

 Lavado de manos a) Agua del lavado de manos cultivado en Agar Materiales -

Bolsa

-

Suero fisiológico esterilizado

-

Placa Petri

-

Agar

Procedimiento -

Realizar el lavado de manos con el agua durante un min

-

Retirar con la pipeta 1 ml

-

Colocar el liquido en la Placa Petri

-

Calentar hasta el rojo vivo el asa de siembra

-

Extender la siembra

-

Tapar y rotular

b) Agua del lavado de manos cultivado en Maconkey -

Realizar el lavado de manos con el agua durante un min

-

Retirar con la pipeta 1 ml

-

Colocar el líquido en la Placa Petri

-

Calentar hasta el rojo vivo el asa de siembra

-

Extender la siembra

-

Tapar y rotular

 HUMUS

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Materiales -

Humus

-

Suero fisiológico esterilizado

-

Placa Petri

-

Agar

Procedimientos -

Pesar un gramo de humus

-

Mezclar con suero fisiológico

-

Esterilizar el as de siembra

-

Retirar la muestra de la mezcla

-

Pasar el hisopo por la placa Petri en forma de zigzag o por agotamiento

-

Tapar y rotular

 Sellar las placas Petris con el plastifill  llevar todas las placas a la estufa a 37 °C durante un periodo de 48 a 72 horas  Tener una placa de control EXPERIMENTO 2: Evaluacion de pH de sustancias y liquidos 1. Medir el pH del jabón de ropa: Marca Bolívar Materiales -

Peachimetro

-

Jabón

-

Agua destilada

-

Vaso precipitado

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-

Tijera

Procedimientos 1. Raspar el jabón el jabón con la tijera en el vaso precipitado. 2. Agregar 100 ml de agua destilada 3. Mover con el peachimetro 2. Medir el pH del jabón de tocador: Marca Heno de Pravia Materiales -

Peachimetro

-

Jabón

-

Agua destilada

-

Vaso precipitado

-

Tijera

Procedimientos 4. Raspar el jabón el jabón con la tijera en el vaso precipitado. 5. Agregar 100 ml de agua destilada 6. Mover con el peachimetro 3.

Medir el pH del jabón de tocador: Jabón de hotel Materiales -

Peachimetro

-

Jabón

-

Agua destilada

-

Vaso precipitado

-

Tijera

Procedimientos 7. Raspar el jabón el jabón con la tijera en el vaso precipitado. 8. Agregar 100 ml de agua destilada

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9. Mover con el peachimetro 4. Medir el pH de la coca cola Materiales -

Peachimetro

-

50ml de coca cola

-

Vaso precipitado

Procedimientos 1. Agregar 50ml de coca cola en el vaso precipitado. 2. Mover con el peachimetro 3. Tomar nota 5. Medir el pH de vinagre Materiales -

Peachimetro

-

50ml de vinagre

-

Vaso precipitado

Procedimientos 1. Agregar 50ml de vinagre en el vaso precipitado. 2. Mover con el peachimetro 3. Tomar nota 6. Medir el pH del Bicarbonato de sodio Materiales -

Peachimetro

-

50ml de agua destilada

-

10 g de bicarbonato de sodio

-

Vaso precipitado

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Procedimientos 1. Colocar los 10g de bicarbonato de sodio en el vaso precipitado 2. Agregar 50ml de agua destilada. 3. Mover con el peachimetro 4. Tomar nota 5. Agregar 10 g de bicarbonato de sodio 6. Tomar nota 7. Medir el pH de la cal Materiales -

Peachimetro

-

50ml de agua destilada

-

10 g de bicarbonato de sodio

-

Vaso precipitado

Procedimientos 1. Colocar los 10g de la cal en el vaso precipitado 2. Agregar 50ml de agua destilada. 3. Mover con el peachimetro 4. Tomar nota

II.

Presentación de resultados obtenidos. (5 puntos) EXPERIMENTO 1: ANALISIS BACTERIOLOGICO Después de 48 horas estos fueron los resultados 1. Área de la mesa: 14 unidades formadoras de colonias Figura 4

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2. Baranda de la escalera: 11 unidades formadoras de colonias en 20 cm en 48 horas Figura 5

3. Lavatorio: 7 colonias Figura 6

4. Manija de la taza del baño: 8 unidades formadoras de colonias (Colonias de color rosado y blanco) Figura 7

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5. Manzana sin legía: 27 unidades de colonias por manzana Figura 8

6. Manzana con legía: limpio sin colonias Figura 9

7. Lavado de manos -En AGAR: Bacilus, se encontró crecimiento de bacterias Figura 10

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8. Humus: Incontables, dos tipos de bacterias de color rojo y blanco Figura 11

9. Placa de control: En la placa de control no se formo unidades de colonias, ello quiere decir que no hubo contaminación en las muestras.

EPERIMENTO 2: ANALSIS DE pH de jabón a) Jabón de ropa: Se mostró un resultado de pH de 10, muestra que es un compuesto alcalino. b) Jabón de tocador: Dio como resultado un pH de 10, muestra que es un compuesto alcalino. c) Jabón de hotel: Dio como resultado un pH de 10 Muestra que es un compuesto alcalino Los tres jabones son alcalinos ya que muestran un pH de 10. En el jabón de ropa es tolerable es te pH, sin embargo, es peligroso que los jabones de tocador tengan este pH.

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d) Coca cola: Se mostro un resultado de pH de 2.4 es un liquido acido e) Vinagre: Dio como resultado un pH de 2.7, es un liquido acido f) Bicarbonato de sodio: Se mostró un resultado de pH de 7.4, es un compuesto ligeramente alcalino. g) Cal: Se mostro que es un compuesto alcalino ya que mostro un resultado de 11.7, Es un compuesto alcalino III. Análisis e interpretación de resultados. (10 puntos) El aire muestreado se hace incidir sobre un medio de cultivo determinado, según se pretendan valorar bacterias u hongos. Posteriormente se procede a la incubación a una temperatura adecuada y finalmente se efectúa el contaje de colonias expresando el resultado en ufc/m3 (unidades formadoras de colonias por metro cúbico (Martí, C., 1995, p. 1) Pasadas las 48 a 72 horas de las muestras en la estufa a 37° se obtuvieron los siguientes resultados:  Hisopado de 10 cm2 de mesa: se encontraron 14 UFC, debido a que la mesa al ser de un material de cemento tiende a capturar a una considerable cantidad hongos y/o bacterias, resaltando la importancia de la limpieza de estas superficies.  Hisopado de 20 cm de baranda: Se encontraron 11 UFC, cantidad cercana al de la mesa.  Hisopado de dos caños: Se encontraron 7 UFC, cantidad cercana a la muestra de la manija de la taza del baño, lo cual representa una similar contaminación.

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 Hisopado de 1 manija de la taza de un urinario: Se encontraron 8 UFC, entre colonias de color rosado y blanco  Hisopado de una manzana sin lavar: Se encontraron 27 UFC, además observamos que la cantidad de bacterias supera a las que hay en la taza de urinario, lo cual resalta la importancia del lavado de alimento para su consumo  Hisopado de una manzana con lejía: Placa limpia, indicando que la lejía tiene un alto poder desinfectante y bactericida.  Hisopado de agua luego del lavado de manos: No se realizó un conteo, pero probablemente por el color blanquecino estaría presente un Bacillus, bacteria no dañina.  Hisopado de una muestra de humus: Incontable, encontramos una potencial mezcla de dos tipos de bacterias por la presencia de dos colores: rojo y blanco. Esta muestra supera notablemente la cantidad de bacterias que encontramos en las demás debido a que la muestra del humus está en descomposición lo cual genera una mayor carga bacteriana ya que estas son descomponedores. La metodología de recuento en placa por plaqueo es una metodología ampliamente utilizada (Hoben y Somasegaran, 1982), que consiste en realizar diluciones seriadas 1:10 y extender 100µl de cada dilución en una placa; las placas se incuban hasta que las colonias son apreciables para su recuento. (Scielo, 2012, pg. 2) Análisis del pH de los jaboncillos:

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El pH es una medición de acidez o alcalinidad de una solución acuosa de compuestos o sustancias puras. (Alvarado, E., 2012, p.16)  Jabón de ropa al diluir en agua destilada y medir con el sensor de pH, obtenemos un pH=10, que si es bueno para el lavado de ropa (es alcalino).  Jabón de tocador (Heno de Pravia) diluida en agua destilada y medir con el sensor de pH, obtenemos un pH=9.9, no es bueno para el aseo personal (es alcalino), ya que, el pH recomendado para el aseo se encuentra entre 7 y 8 de pH. Según los estudios realizados informan que el pH que puede ser tolerado por la piel debe estar entre 5 y 9 para que no afecte la capacidad buffer de la piel, es decir, que no afecte el manto ácido de la piel que es la principal barrera de defensa de nuestro organismo y que no tenga efecto irritativo. (Alvarado, E., 2012, p.17)  Jabón de Hotel diluido en agua destilada y medir con el sensor de pH, obtenemos un pH=10, el cual no es recomendado para el aseo personal (es alcalino).  La Coca Cola, después de agitar y medir con el sensor de Ph, se obtuvo un pH=2.4 el cual no es bueno para la salud de las personas (es extremadamente acido).  El Vinagre, después de agitar y medir con el sensor de pH se obtuvo un pH=2.7, podemos decir que es extremadamente acida, es malo para la salud en grandes cantidades.

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 El bicarbonato de Sodio (2 y 4 g aproximado), después de diluir con agua destilada y medir con el sensor de pH se obtuvo un pH=7.4, podemos decir que es medianamente básico.  La Cal (4 g), después de diluir en agua destilada y medir con el sensor de pH obtuvimos un pH=11.7, es fuertemente alcalino donde la actividad microbiana

es

escasa

y

se

encuentra

poca

disponibilidad

de

micronutrientes. La OMS recomienda un pH entre 6.5 A menudo se dice que la escala de pH va de 0 a 14 y la mayoría de las soluciones entran en este rango, sin embargo, es posible encontrar soluciones con pH menor a 0 o mayor a 14. Cualquier valor menor a 7.0 es ácido y cualquier valor mayor a 7.0 es básico o alcalino (Khan Academy, 2010)

IV. Conclusiones y recomendaciones. (3 puntos) Hemos llegado a la conclusión de que cada cultivo llega a ser necesario debido que con esto logramos obtener la “carga bacteriana” de una superficie ya sea viva o inerte. 

En el caso del alcohol etílico se ya llegado a presentar una cierta actividad bacteriana, sin embargo, es eficaz hacia los hongos e ciertos virus. Actualmente, por época de pandemia se ha estado usando el alcohol de 95% que se refiere a 96° pero también se puede usar desde el alcohol de 70% debido a que tiene más agua por lo que llega a penetrar la misma pared bacteriana (con esto estaríamos matando a la bacteria que se encuentra en nuestra superficie).

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

Para mayor desinfección en diferentes lugares, se puedo optar por el uso de la lejía debido a que tiene diferentes concentraciones como desde porcentajes de 0.01% aproximadamente de su uso en varias superficies (piso, comedor, objetos, entre otros) y para cosas que digerimos nosotros que serían los alimentos.



Otro complemento para la conclusión sería el pH de los jabones que van entre (8 a 10 de pH) por lo que no ayuda a nuestra piel debido a que puede causar irritación o problemas cutáneos. Nuestra piel varía dependiendo de nuestro tipo de piel como, por ejemplo: o Piel Normal tienen un pH de 5.5 pero en mujeres, en hombres van desde un pH 5.8. o Piel Seca tiene un nivel de pH más alcalino, en otras palabras, sus pH serían mayor a 5.5 o 5.8. o Piel Graso tiene un nivel de pH más ácido, eso quiere decir que será menor al pH 5.5 de mujeres o 5.8 en varones. o Piel mixta varia su pH debido a que la concentración de grasa se encuentra en la zona T y las otras partes serían secas.

Extraído de Soko

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Por lo que es recomendable usar un jabón neutro para no causar daños a futuro en nuestra piel. Recomendaciones 

Se recomienda seguir las normas de seguridad del laboratorio debido a que al no seguirlas podría ocasionar algún incidente.



Tener precaución del ingreso de los materiales hacia la autoclave



Usar correctamente la autoclave debido a que funciona a presión de 15 lb min.

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Bibliografía 

Documento de procedimiento (2015). “Procedimiento para el uso de autoclave”. Comité Interno de Seguridad, Salud Ocupacional y Calidad.



Orlandi, M. (2004). “Piel sana y manto ácido”. Revista médica. Santiago de Chile.



Jesús. L. (2017). “El pH de la piel y los productos cosméticos”. Departamento de Farmacia y Tecnología Farmacéutica. Facultas de Farmacia. UNIVERSIDAD DE SEVILLA.



Ilse, D. y Vivas, M. (1996). “El pH de los jabones”. Revista de Dermatología. Vol.34.



Graziano MU, Graciano KU, Pinto FMG, Bruma CQM Queiroz RQ, y Lascala CA. (2013) “Eficacia de la desinfección con alcohol al 70% (p/v) de superficies

contaminadas

Enfermagem . Mar- abr. 2013

sin

limpieza

previa”.

Rev.

Latino-Am....