Pipeta - La técnica del pipeteo abarca diferentes herramientas y medios que se requieren PDF

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La técnica del pipeteo abarca diferentes herramientas y medios que se requieren para pipetear. El empleo de la técnica del pipeteo permite dosificar líquidos de forma rápida y precisa. Las herramientas utilizadas para ello se denominan pipetas. Debido a la elevada importancia de la técnica del pipet...

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Lo más importante es conocer el manejo de los instrumentos en este caso les explicaremos como se debe de manejar una pipeta:

1. Antes de usar la pipeta debes lavarla bien y enjuagarla con agua destilada, posteriormente debes secarla (en una estufa si fuera posible) por 5 minutos. 2. Después de que esté bien seca, debes colocarle la pro-pipeta, es un balón de goma con válvulas, su función es generar un vacío de tal manera que la pipeta pueda succionar la muestra líquida. 3. De ninguna manera se debe succionar una muestra con la boca, porque es peligroso. 4. Antes de succionar la muestra, debes apretar el botón de arriba (válvula de escape) y desinflar el balón de la pro-pipeta así eliminaras el aire del balón. 5.Sumerge la pipeta dentro de la muestra, para succionar aprieta el botón lateral (válvula de succión, es uno que sale por un costado), mantenlo apretado hasta obtener la cantidad deseada de líquido. 6.Una vez utilizada la muestra, el líquido sobrante lo eliminas con el botón de abajo, mantenlo apretado hasta eliminar todo el líquido. 7. Retiras la pro-pipeta, la pipeta se lava cuidadosamente, se enjuaga y se guarda.

Por otro lado, también es algo fundamental conocer algunas técnicas para emplear en el laboratorio sin embargo hay que tomar en cuenta que no en todos los instrumentos son las mismas técnicas por ejemplo las técnicas que se usan para una pipeta son las siguientes:

La técnica del pipeteo abarca diferentes herramientas y medios que se requieren para pipetear. El empleo de la técnica del pipeteo permite dosificar líquidos de forma rápida y precisa. Las herramientas utilizadas para ello se denominan pipetas. Debido a la elevada importancia de la técnica del pipeteo en laboratorios de cualquier tipo, desde la medicina hasta la química, a lo largo de los años se han desarrollado diferentes pipetas de múltiples tamaños y versiones. La versión más conocida es la pipeta de medición, se compone de un tubito de vidrio con una escala de volumen grabada, que se estrecha en la punta y lleva el otro extremo o bien abierto, o bien cerrado con una pera de succión. Con esta pipeta se pueden absorber cantidades variables de líquidos, de modo que ofrece una alta flexibilidad y puede así aplicarse en múltiples ámbitos. La desventaja de esta pipeta es sin embargo la imprecisión que conlleva esta flexibilidad.

Pipeta de medición

pera de succión

Si hay que conseguir una precisión muy alta en la dosificación, el empleo de una pipeta aforada es imprescindible. Una pipeta aforada no tiene escala de volumen, sino una sola marca para un volumen definido, estas pipetas son de 10 ml, 5 ml y 25 ml.

Otros

instrumentos de la técnica del pipeteo son, por ejemplo: La pipeta Pasteur: Se componen de un tubo de vidrio con un diámetro de unos 5 mm, que acaba en una punta muy fina y lleva una bola de goma en su parte superior. Las pipetas Pasteur no tienen marcas indicando el volumen. Sirven para la transmisión de pequeñas cantidades de líquido. Pipetas Pasteur también están disponibles como pipetas desechables.

la

micropipeta: Es modelo más moderno de la técnica del pipeteo es la micropipeta, su ámbito de aplicación es el pipeteo de cantidades muy pequeñas (pocas µl). Se compone de un sistema de pistonada y punta de pipeta sustituible. Bajando en pistón, se empuja afuera el aire de la punta de pipeta. En el movimiento ascendente a continuación, la columna atmosférica sube, y con ella el líquido. Una variante especial es la pipeta de pistonada de empuje directo. Esta variante utiliza puntas de pipeta con un pistón incorporado, que entra en contacto directo con el líquido. Esta variante permite el pipeteo de líquidos muy viscosos.

la pipeta multicanal: En la fabricación masiva, la técnica del pipeteo también es un medio importante. Un ejemplo para ello es la pipeta multicanal, que tiene la misma estructura que la micropipeta. La diferencia respecto a una micropipeta común es que aquí hay varios canales paralelos (habitualmente 8 o 12). Eso permite pipetear grandes cantidades de muestras con mucha más rapidez

pipeta desechable de plástico: Éstas se emplean sobre todo en la medicina. Se suelen utilizar para tareas de dosificación con exigencias bajas de precisión, como por ejemplo la dosis de colirio.

Ya que hayas concluido con dicha práctica lo siguiente es llevar acabo la limpieza de la pipeta es un procedimiento muy sencillo el cual se los explicaremos a continuación: Es de vital importancia este punto de manera de evitar que los contaminantes ingresen a la muestra. Descontaminación: Se puede realizar a través de 2 procedimientos: • Autoclavado: "Ningún instrumento de precisión es totalmente autoclavable" Someter la pipeta entera a 121° durante 20 minutos hace que se pierda su calibración.

Las partes autoclavables de la pipeta son el tip holder, el tip eyector y la rosca de conexión que son las únicas que están en contacto con la muestra. • Limpieza biológica: Se realiza sin desarmarla y evitando sumergir el contador. Se deben sumergir las pipetas en las siguientes soluciones en el orden indicado: 1) En Ácido Clorhídrico 10% durante media hora. Así se realiza la llamada "limpieza catiónica". 2) Con Agua destilada durante media hora. Este es el primer enjuague con agua destilada. 3) Con Hipoclorito de Sodio (16.5%) durante media hora. Se produce así la descontaminación biológica. 4) Luego Agua destilada durante media hora. Segundo enjuague con agua destilada. 5) Se coloca en un Baño Ultrasónico para realizar la limpieza a fondo. 6) Secar en estufa (40 – 50 ºC) aprox. 1 hora. 7) Rearmado y calibración.

Otras consideraciones importantes: Las pipetas deben ser almacenadas siempre en posición vertical, en el rango de medición máximo y en un área limpia. Guardarlas en el soporte (No en cajones). Limpiar bien las pipetas cuando se termina de trabajar. Sólo trabajar entre los rangos máximos y mínimos de cada modelo. Utilizar tips de calidad construidos en polipropileno puro que asegura un dispensado completo, sin contaminación. Recuerde siempre que la punta está en contacto directo con la muestra y puede contaminar la solución. El uso de filtros en las puntas ejerce también un efecto barrera contra los aerosoles generados durante el pipeteo. Verificar su esterilidad mediante el certificado que deben poseer en el envase.

Medida de una alícuota: Utilizar una pera de goma para tomar un pequeño volumen del liquido que se va a tomar con la pipeta y mojar bien toda su superficie interior. Repetir esto almenos con dos porciones mas de liquido. Luego llenar cuidadosamente la pipeta hasta un nivel por encima de la señal de enrase. Rápidamente sustituir la pera por el dedo índice. Para impedir la salida del liquido, asegurarse de que no hay burbujas en el liquido ni espuma en su superficie. Inclinar la pipeta ligeramente respecto ala vertical y limpiar el exterior de la pipeta si ha quedado adherido a ella algo del liquido. Tocar con la punta de la pipeta la pared del recipiente de vidrio de donde se tomo el liquido(no en el recipiente que se va a ver la alícuota) y dejar que baje poco a poco el nivel del liquido, aflojando un poco la presión del dedo. Interrumpir el flujo cundo la base del menisco coincida exactamente con la señal de enrase. colocar luego la punta de la pipeta dentro del recipiente receptor y dejar que drene el liquido. cuando deja de fluir libremente, apoyar la punta de la pipeta en la pared interior del recipiente receptor 10 s mas. Finalmente retirar la pipeta dándole

un pequeño movimiento de giro para desprender el liquido que haya podido quedar adherido ala punta el pequeño volumen que se queda en el interior de la punta....