Practica 03 fermentacion alcoholica PDF

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Fermentación alcohólica cuestionario...

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Practica 03 Fermentación alcohólica de la glucosa Introducción La fermentación alcohólica es un proceso que se da anaeróbicamente, es realizada por microorganismos que son capaces de degradar carbohidratos simples (glucosa, manosa, entre otros). El microorganismo más conocido es la Saccharomices cerevisiae, que se utiliza para la producción de productos como cerveza, vino, entre otros. El proceso se realiza cuando una molécula de glucosa se transforma en piruvato, y este último es descarboxilado por la enzima piruvato descarboxilasa formando acetaldehído. El acetaldehído es reducido por la enzima alcohol deshidrogenasa transformándola a etanol. Se tiene que tomar en cuenta que se estan utilizando 2 moléculas de piruvato, y vamos a obtener como productos 2 moléculas de CO2 (generados en la descarboxilacion del piruvato), 2 moléculas de etanol y 2 moléculas de ATP (prevenientes de la glicolisis). Para la determinación del etanol se puede utilizar una solución sulfocromica diluida, que nos va a dar una coloración verde cuando hay presencia de etanol. Para la determinación del acetaldehído se utiliza nitroprusiato de sodio y piperina acuosa, si hay acetaldehído presente toma una coloración azul.

Interrogantes 1. Explique el fundamento de la determinación de acetaldehído. El acetaldehído se encuentra en el sobrenadante, este va a ser atrapado por el sulfato de calcio, tomando una coloración azul. Esta reaccion del cambio de color es por la reaccion del nitroprusiato de sodio con la piperina. 2. Explique la como se realizó la determinación de etanol en la práctica. Indicar las diferencias con el método propuesto en la práctica. El etanol fue en base al peso de los frascos. Cuando se realizó la fermentación hubo producción de etanol y este al ser menos denso que el agua el peso va a disminuir y eso nos indica la producción de etanol. En la práctica se propone usar solución sulfocromica diluida para cuantificar la cantidad etanol presente, dando como positivo el etanol, cuando esta toma una coloración verde. 3. Esquematice la secuencia de reacciones de la fermentación alcohólica de la fructosa. (2) ADP (2) ATP

FRUCTOSA

GLUCOLISIS

Colocar lo del NADH

PIRUVAT (2)

(2) CO2

Piruvato descarboxila sa

ACETALDEHIDO (2) (2) NADH + H+ (2) NAD+

Alcohol deshidrogen asa ETANOL (2)

4. Escriba las coenzimas y/o cofactores que necesita el piruvato descarboxilasa y el alcohol deshidrogenasa. La piruvato descarboxilasa necesita como cofactores a la TPP y al Mg2+. Y el alcohol deshidrogenasa necesita como cofactor a un NADH +H+. 5. Indique para que se utilizan los siguientes compuestos o sustancias en la presente práctica:  Sulfito de calcio: Se utiliza para atrapar al acetaldehído producido, evitando que reaccione con otras sustancias.  Solución sulfocromica diluida: Es para determinar la cantidad de etanol presente. Da positivo, en presencia de alcohol, cuanto toma una coloración verde y negativo cuando es naranja. 6. Mencione las diferencias entre la fermentación láctica y fermentación alcohólica. En la fermentación alcohólica se obtiene como productos a 2 CO2 + 2 etanol + 2 ATP. Los organismos que intervienen son levaduras. En la fermentación láctica se obtiene como productos 2 lactato + 2 ATP + 2H2O. Los organismos que intervienen son bacterias del genero Lactobacillus y tambien ocurre en algunos tejidos, como el musculo. 7. ¿Qué otros compuestos se pueden formar durante la fermentación alcohólica? Al descarboxilarse el piruvato obtenemos acetaldehído. Tambien se obtiene NAD+, por acción del alcohol deshidrogenasa, para utilizarlo en otras reacciones.

8. ¿Cómo preparar una solución de 6g/L de un estándar? De la concentración madre preparar estándares 1, 2, 3, 4 y 6 g/L. Presente cálculos. C1 ×V 1=C 2 × V 2

 6g en 1000 ml 1. 2. 3. 4. 5.

6 g ×1000 ml=1 g ×V 2 ∴V 2 =6000 ml 6 g ×1000 ml=2 g ×V 2 ∴V 2 =3000 ml 6 g ×1000 ml=3 g × V 2 ∴ V 2=2000 ml 6 g ×1000 ml=4 g ×V 2 ∴V 2=1500 ml 6 g ×1000 ml=6 g × V 2 ∴ V 2=1200 ml...