Practica 03b. Demostracion DE LA Acción DE LA Lipasa Pancreática Y Sales Biliares PDF

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“AÑO DEL BICENTENARIO DEL PERÚ: 200 AÑOS DE INDEPENDENCIA ”DEMOSTRACION DE LAACCIÓN DE LA LIPASAPANCREÁTICA Y SALESBILIARESFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA DE MEDICINAIntegrantes: Calderón Carmen Yannira. Carrasco Naira Marilin. Chinguel Cardoza Stefani. Coaquira Ambulay Junhior. Febre Garcí...

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“AÑO DEL BICENTENARIO DEL PERÚ: 200 AÑOS DE INDEPENDENCIA”

DEMOSTRACION DE LA ACCIÓN DE LA LIPASA PANCREÁTICA Y SALES BILIARES FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA DE MEDICINA

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Integrantes: Calderón Carmen Yannira. - Carrasco Naira Marilin. Chinguel Cardoza Stefani. Coaquira Ambulay Junhior. - Febre García Rosita.

Docente: Medina Vásquez Katherine Marita Elizabeth

Curso: Bioquímica y biología molecular.

PIURA - 2021

Primera Unidad

Fundamentos Bioquímicos, Enzimología y Biología Molecular de las membranas biológicas

- DEMOSTRACION DE LA ACCIÓN DE LA LIPASA PANCREÁTICA Y SALES BILIARES ACCION DE SALES BILIARES Y DE LIPASA PANCREATICA INTRODUCCION: Los triglicéridos son los principales lípidos de la dieta. Las lipasas sublingual y gástrica actúan sobre los triglicéridos liberando los ácidos grasos, que si son de cadena corta o media son directamente absorbidos. Las contracciones gástricas contribuyen al fraccionamiento mecánico de las partículas grasas. La principal digestión ocurre en el duodeno y yeyuno por acción de la lipasa pancreática, en la interfase agua-lípido y su velocidad depende de la superficie de la interfase, la cual es muy incrementada por el movimiento peristáltico del intestino combinado con la acción emulsificante de las sales biliares. La lipasa pancreática cataliza la hidrólisis de los triglicéridos en las posiciones 1 y 3 para formar secuencialmente 1-2 diacilglicerol y 2 acilglicerol, junto con ácidos grasos. La unión de la lipasa a la interfase agua -lípido requiere de la colipasa, una proteína de 90 residuos que forma un complejo 1:1 con la lipasa, con cambios conformacionales que forma una superficie hidrofóbica y deja libre el centro activo. La finalidad de la práctica es demostrar la acción emulsificante de las sales biliares sobre las grasas comparando su efecto con el agua y demostrar la acción de la lipasa pancreática sobre los triglicéridos y el efecto de las sales biliares. PROCEDIMIENTO: Acción emulsificante de las sales biliares sobre las grasas.

1) Preparar el siguiente sistema, empleando tubos de ensayo de 15 x 125 mm. COMPONENTES Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Aceite de Oliva (gotas) 3 3 3 Agua destilada (ml) 5 3 Sales Biliares (ml) -2 -Cloroformo (ml) --2 Agitar enérgicamente los tubos por inversión y dejar en reposo por 10 minutos.

2) Anotar los resultados e interpretarlos.

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Primera Unidad

Fundamentos Bioquímicos, Enzimología y Biología Molecular de las membranas biológicas

Acción de la lipasa pancreática sobre los triglicéridos y efecto de las sales biliares.

1) Preparar el siguiente sistema, empleando tubos de ensayo de 25 x 150 mm. Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 COMPONENTES (ml) (ml) (ml) (ml) Emulsificación de aceite vegetal (ml) -3 3 3 Buffer fosfato 0.1 M pH 8.0 2 2 2 2 Solución de sales biliares 1% 2 2 -2 Solución de extracto pancreático 1% 2 -2 2 Agua destilada 3 2 2 -Mezclar cada uno de los tubos por inversión. Llevar a baño maría a 37 °C por 30 minutos, agitando de vez en cuando. Al finalizar el tiempo de incubación retirar los tubos y agregar a cada uno 3 gotas de fenolftaleína. Mezclar bien por inversión y realizar la titulación. Titulación: empleando una pipeta graduada de 1 ml dejar caer gota a gota, hidróxido de sodio (NaOH 0.1N) en el fondo de cada tubo, mezclar bien por inversión hasta la aparición de un color rosado tenue persistente.

2) Anotar la cantidad de NaOH empleado en cada tubo. 3) Interpretar los resultados encontrados.

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Primera Unidad

Fundamentos Bioquímicos, Enzimología y Biología Molecular de las membranas biológicas

CUESTIONARIO:

1) ¿Cuál fue el propósito y/o finalidad de la práctica?

- La finalidad de la práctica es demostrar la acción emulsificante de las sales biliares sobre las grasas comparando suefecto con el agua, la acción de la lipasa pancreática sobre los triglicéridos y el efecto de las sales biliares. 2) Identifique las variables que intervinieron en el experimento realizado en la práctica. Variables: Componentes en mililitros. • Prueba de triglicéridos.

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3) ¿Cuál de los métodos para medir la actividad enzimática fue empleado en esta práctica? 

El método que se empleó para medir la actividad enzimática fue La Colorimetría.

4) Explique el papel de la fenolftaleína en la titulación de los resultados.

- La fenolftaleína es un indicador de pH muy conocido que se utiliza sobre todo para valoraciones ácidobase en química analítica, aunque también puede usarse para medir el pH de una disolución, pero de forma cualitativa. 5) Explique que son sustancias anfipáticas, emulsión de solución. -

Sustancias anfipáticas: Se dice de la molécula con grupos hidrófilos e hidrófobos, lo que la capacita para estar parcialmente diluida en agua o en disolventes orgánicos.

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Emulsión de solución : Se entiende por emulsión química o simplemente emulsión a la unión más o menos homogénea de dos líquidos inmiscibles, o sea, que no se mezclan totalmente el uno con el otro. Las emulsiones consisten en la dispersión de un líquido en otro, ambos en diferentes fases líquidas. Son aquellas moléculas que poseen un extremo hidrofóbico, es decir, que es soluble en agua, y otro que es hidrófobo, lo cual significa que rechaza el agua.

6) Explique el proceso de emulsión de lípidos -

Las grasas de la dieta pasan a ser una emulsión descomponiéndose en ácidos grasos. Esto tiene lugar mediante una simple hidrólisis de los enlaces éster en los triglicéridos. Las sales biliares (tales como el ácido cólico) tienen una parte hidrofóbica (insoluble en agua) y otra hidrofílica (soluble en agua). Esto permite que se disuelvan en una interfaz óleo-acuosa, en la cual la superficie hidrofóbica está en contacto con el lípido y la superficie hidrofílica entra en contacto con el medio acuoso. Esto se llama acción detergente y emulsifica las grasas dando como resultado micelas mixtas. 8

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Fundamentos Bioquímicos, Enzimología y Biología Molecular de las membranas biológicas

Las grasas se descomponen en pequeñas partículas por la acción detergente y la agitación mecánica dentro del estómago.

7) En el ser humano, que enzimas participan en el proceso de digestión de lípidos, y cuál es su función de cada una de ellas. Las enzimas son sustancias segregadas por distintas glándulas, y están “especializadas” en distintos tipos de nutrientes. Se dividen en 3 grandes grupos: – Proteasas. Tienen la misión de romper las proteínas para hacerlas asimilables. – Carbohidrasas. Se encargan de los hidratos de carbono (almidón, azúcares, lactosa, etc.) – Lipasas. Especializadas en digerir las grasas. 8) Mediante un esquema, explique el proceso de absorción de lípidos, luego de su digestión.

9) ¿Cuántas clases de lipasas actúan en el tubo digestivo y cuál es su rol? ¿Cuál es la importancia de las sales biliares? - La lipasa pancreática participa en la digestión, la lipasa en el organismo para disgregar las grasas de los alimentos de manera que se puedan absorber. Su función principal es catalizar la hidrólisis de triacilglicerol a glicerol y ácidos grasos libres. Importancia: Las sales biliares están hechas de colesterol endógeno, la circulación enterohepática de sales biliares puede ser interrumpida para reducir el colesterol y los secuestradores de ácidos biliares se unen los ácidos biliares que forman las sales biliares y evitan la reabsorción. De esta manera, más colesterol endógeno se desvía a la producción de sales biliares, lo que reduce los niveles de colesterol, el colesterol secuestrado se excreta en las heces, y esta es otra función de las sales biliares. REFERENCIAS: 1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.

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