Práctica #4.- Tinción Ziehl Neelsen PDF

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Universidad de SonoraDIVISIÓN DE: Ciencias Biológicas y de la Salud LICENCIATURA EN: Química en AlimentosPRÁCTICATINCIÓN DE ZIEHL - NEELSENLABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA GENERALDra. Ana Karenth López Meneses GRUPO: 11ALUMNO:Gómez Cornejo Perla BeatrizHermosillo, Sonora 13 de septiembre de 2021OBJETIVO...

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Universidad de Sonora

DIVISIÓN DE: Ciencias Biológicas y de la Salud LICENCIATURA EN: Química en Alimentos

PRÁCTICA #4 TINCIÓN DE ZIEHL - NEELSEN

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA GENERAL Dra. Ana Karenth López Meneses GRUPO: 11

ALUMNO: Gómez Cornejo Perla Beatriz

Hermosillo, Sonora

13 de septiembre de 2021

OBJETIVO Llevar a cabo la tinción de Ziehl – Neelsen en una muestra de expectoración para la observación de bacilos ácido-alcohol resistente.

INTRODUCCIÓN La tinción de Ziehl – Neelsen es la técnica comúnmente usada en el diagnóstico rutinario de tuberculosis. El agente etiológico de la tuberculosis fue descrito por Heinrich Hermann Robert Koch, basándose en las características de las micobacterias, desarrolló una de las primeras tinciones utilizando azul de metileno seguido de la tinción de Bismarck. Fueron los trabajos de Paul Ehrlich los que definieron la resistencia a la decoloración por alcohol-ácido, y las últimas modificaciones a la tinción fueron realizadas por los científicos alemanes Franz Ziehl y Karl Adolf Neelsen (Gallegos, 2018). La tinción permite diferenciar a las bacterias en dos grupos: aquellos que son capaces de resistir la decoloración con ácido-alcohol y aquellos que no los son (López, 2014). Las paredes celulares de ciertas bacterias contienen ácidos grasos que se hacen llamar ácidos micólicos, que les confieren la propiedad de resistir a la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Las micobacterias como Mycobacterium tuberculosis y M. marinum se caracterizan por sus propiedades de ácido-alcohol resistencia. La coloración clásica de Ziehl – Neelsen requiere de calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras. Las bacterias que resisten la decoloración son de color rojo, sobre un color azul (que proviene del colorante de contraste: Azul de metileno) (Anónimo, 2016). Los reactivos que se utilizan durante la tinción se consideran como: Colorante primario. Se usa carbol fucsina al 0.3%, este colorante se prepara a partir de una mezcla de alcoholes: fenol en etanol (90%) o metanol (95%) y en esta mezcla se disuelven 3 g de fucsina básica (Briceño, 2021). Solución decolorante. En este paso se pueden emplear soluciones de ácidoalcohol al 3% o H2SO4 al 25% (Briceño, 2021).

Colorante secundario (contra-colorante). El colorante más empleado para realizar el contraste en las muestras suele ser azul de metileno al 0.3%. Sin embargo, también se pueden emplear otros, como el verde de malaquita al 0.5% (Briceño, 2021).

MATERIALES Y MÉTODOS

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Muestra A (40 X)

Muestra B (100 X)

Tanto en la muestra A como en la muestra B se pueden observar los bacilos que resistieron al reactivo decolorante ácido-alcohol, ya que estos toman un color rojo sobre un fondo de color azul. Como la muestra es de esputo, lo que se puede mostrar en las imágenes pequeños puntitos de color morados, podrían ser las bacterias que se pueden encontrar en la flema que no pudieron resistir la decoloración se ve como una masa que cubre a los bacilos de AAR.

CONCLUSIÓN Este reporte se llevó a cabo de acuerdo con el objetivo, se realizó la tinción de Ziehl – Neelsen en una muestra de expectoración para observar a los bacilos ácido-alcohol resistente a la tinción, que te tiñen de color rojo debido al reactivo de carbol fucsina y que contrastan con el fondo de color azul por el colorante azul de metileno.

CUESTIONARIO I.

¿Qué características debe de tener la muestra de expectoración para obtener un resultado confiable?

Se debe de observar (SIN ABRIR ENVASE) la calidad y cantidad de la muestra que debe ser mucopurulenta y de 3-5 ml, pero no se debe rechazar la muestra que aparentemente correspondan a la saliva. Se debe de conservar las muestras en una caja, para protegerlas de la luz solar o calor excesivo hasta el momento del envío al laboratorio (Seraquive, 2009)

II.

¿Todas las bacterias ácido resistentes son patógenas?

Esta tinción es muy importante porque muchas de las bacterias ácido-alcohol resistentes son patógenas, como M. tuberculosis o M. leprae, con lo que permite distinguirlas fácilmente (Romero, 2014) III.

La persona de una bacteria ácido resistente en esputo, ¿puede

significar la presencia de tuberculosis en el paciente? Explique. La presencia de bacilos acidorresistentes (BAAR) en un cultivo de esputo a menudo indica que la persona está enferma de tuberculosis. El análisis microscópico de bacilos acidorresistentes es una técnica fácil y rápida, pero no confirma

el

diagnóstico

de

la

tuberculosis

porque

algunos

bacilos

acidorresistentes no son M. tuberculosis. Un resultado positivo en el cultivo de M. tuberculosis confirma el diagnóstico de la enfermedad de la tuberculosis.

(Anónimo, 2012) IV.

¿Qué

componentes

celulares

son

responsables

de

las

características acidorresistentes? La pared celular y la membrana plasmática (Sherris, s. f.) V.

Mencione 2 organismos, los cuales posean propiedades ácido

resistente. Mycobacterium bovis. Mycobacterium avium-intracellulare (Anónimo, s. f.)

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Anónimo. (s. f.). BIOLOGÍA DE LAS MICOBACTERIAS. FCQ. URL: http://www.fcq.uach.mx/phocadownload/DOCENCIA/MATERIAL-DEESTUDIO/micobacterias/biologia/biologia_de_las_micobacterias.html Anónimo. (2012, 24 de abril). Diagnóstico de la enfermedad de tuberculosis. Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades. URL: https://www.cdc.gov/tb/esp/publications/factsheets/testing/diagnosis_es.h tm Anónimo. (2016, 15 de diciembre). PRÁCTICA 10 – TINCIÓN DE ZIEHL – Wordpress.

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