Reacciones Febriles y Brucella por Rosa de Bengala 2020-1 PDF

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Laboratorio de Inmunología 2020-1

Reacciones Febriles Equipo de Laboratorio:

Equipo 5

Grupo :

6C

Victor Manuel Mendoza Paúl Julián Escapita Salcedo Integrantes del equipo: Jocelyn Sarahi Rodriguez Moreno

I.

PREGUNTAS PRE REQUISITO 1. ¿Cuáles son las enfermedades que se pueden diagnosticar con las Reacciones Febriles?

Fiebre Tifoidea: Enfermedad infectocontagiosa de alta prevalencia a nivel mundial. La fiebre tifoidea está caracterizada por fiebre alta constante (40°C), sudoración profusa, gastroenteritis y diarrea. Menos comúnmente puede aparecer un sarpullido de manchas aplanadas de color rosáceo. Brucelosis: La brucelosis en el hombre se transmite por la ingesta de leche, sus productos y derivados contaminados, no pasteurizados, por contacto con productos, subproductos y desechos como tejidos o excreciones de animales enfermos, y por inoculación de brucelas o inhalación del polvo de corrales o mataderos. Rickettsiosis (Proteus 0 0X-19): X-19): Las Rickettsias son bacterias cocobacilares, muchas de ellas son transmitidas por vectores como pulgas, garrapatas y piojos. En general la Rickettsiosis se considera una zoonosis, siendo el humano un huésped accidental excepto por el tifo epidémico (transmitido por piojos). Son parásitos intracelulares estrictos, por eso existieron dudas mucho tiempo sobre si pertenecían a los virus o a las bacterias. Son muy sensibles y raramente sobreviven fuera del huésped, a excepción de Coxiella burnetii que es resistente a la desecación, al calor y la luz solar y se transmite fundamentalmente por vía aérea. Salmonelosis: La infección por salmonella (salmonelosis) es una enfermedad bacteriana frecuente que afecta el aparato intestinal. La bacteria de la salmonella generalmente vive en los intestinos de animales y humanos y se libera mediante las heces. Los humanos se infectan con mayor frecuencia mediante el agua o alimentos contaminados. 2. Considerando el diagnóstico de franca infección de las enfermedades que mencionó en la respuesta anterior, complete la siguiente tabla: Antígeno febril O (somático)

m.o. que identifica

Salmonella typhi

Título de importancia clínica 1:80 - 1: 160

Enfermedad Fiebre Tifoidea

Laboratorio de Inmunología 2020-1 H (flagelar)

Salmonella typhi

1:80 - 1: 160

Fiebre Tifoidea

A

Salmonella enteritidis

1:80 - 1: 160

Salmonelosis

B

Salmonella enteritidis

1:80 - 1: 160

Salmonelosis

Proteus

Rickettsia rickettsii

1:40 - 1:80

Rickettsiosis

Brucella

Brucella abortus

1:80 - 1: 160

Brucelosis

3. La prueba de reacciones febriles, ¿Detecta antígenos o anticuerpos? La prueba de reacciones febriles se usan para detectar anticuerpos en el suero del paciente contra salmonella, brucella y rickettsia.

4. En las reacciones febriles se realiza la detección de brucelosis mediante la técnica de Huddleson, sin embargo, existe también la prueba de rosa de bengala para la determinación de dicha enfermedad, ¿Cuál de las dos técnicas es la mejor opción? Fundamente su respuesta. La mejor opción para determinar si cuenta o no con Brucelosis, es la de la prueba Rosa de bengala ya que esta prueba es más eficaz y específica que la otra, ya que para identificar a la Brucella abortus y los otros tipos se usan Anticuerpos específicos contra

dicha bacteria.

II. VIDEO Vea el siguiente video para comprender la metodología a seguir. https://youtu.be/fe-5bV37N2I

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III. INTERPRET INTERPRETA ACIÓN DE RESUL RESULT TADOS 1. Paciente masculino de 6 años de edad consulta al servicio de urgencia por historia de fiebre de hasta 41 °C, de dos semanas de evolución, tratadas parcialmente con paracetamol, además presentaba los siguientes síntomas: dolor abdominal, cefalea y deposiciones acuosas fétidas sin sangre. En los días previos a la consulta presenta anorexia, astenia, náuseas y vómitos. Se le solicita realizarse unas Reacciones Febriles y los resultados fueron los siguientes: Tífico O = 1:320

Responda lo siguiente: ¿Cuál es la significancia clínica de cada uno de los resultados?

Tífico H = 1:320

● Tífico O = Positivo (+) ● Tifico H = Positivo (+) ● Paratifico A = Negativo (-)

Paratífico A = 1:40

● Paratifico B = Negativo (-) ● Proteus OX19 = Negativo

Paratífico B = 1:40

● Brucella: = Negativo Proteus OX19 = Neg ¿Qué decisión toma al respecto? Fundamente su respuesta Brucella = Neg

( x ) Efectuar el reporte del resultado (

) Reprocesar la muestra

(

) Realizar prueba semicuantitativa

(

) Solicitar nueva muestra al paciente

● Se reportará el resultado de la prueba como positivo (+) ya que si el tifico O y tifico H se encuentran a más de 1:160 es concluyente que cuenta con fiebre tifoidea. ● En la primer prueba (prueba cualitativa) que le realizaron al paciente esta salio positivo (aglutino) en el antígeno O, H, A y B. Con esta información realizaron la segunda prueba (prueba semicuantitativa) con los antígeno O, H, A y B realizando las pruebas hasta la dilución 1:320 y con esto se dieron cuenta que el paciente contaba con una alta concentración (1:320) de antígeno O y H indicando la

Laboratorio de Inmunología 2020-1 presencia de la Salmonella Typhi. Pero también de Salmonella enteritidis nomas que con esta se obtuvieron resultados positivos (aglutino) en las diluciones 1:40 este resultado no tiene importancia clínica ya que es menor a 1:80 pero es importante ya que nos indica que el paciente estuvo en contacto con dicha bacteria y ahora cuenta con Ac contra el. ● Otra cosa que hay tener en cuenta es que el paciente dejó pasar mucho tiempo para que se pudiera reproducir la Salmonella typhi (periodo incubación 8 a 14 días). ¿Se puede emitir un diagnóstico concluyente? Si o No, ¿Cuál es dicho diagnóstico? ● Si, se puede emitir un diagnóstico concluyente, el diagnóstico sería que el paciente cuenta con Fiebre tifoidea producida por la Salmonella Typhi.

2. Paciente femenino de 16 años de edad ingresó a urgencias por un cuadro clínico de ocho días de evolución manifestado por fiebre alta, cefalea intensa, escalofríos, mialgias, artralgias, vértigo, vómitos, dolor abdominal, confusión mental y pérdida de peso de aproximadamente 8 kg. Antecedentes de fiebre tifoidea en el padre. Hermanos con antecedente de infestación con piojos. Fue remitido al laboratorio par realización de reacciones febriles y los resultados fueron los siguientes: Tífico O = 1:40

Tífico H = 1:80

Responda lo siguiente: ¿Cuál es la significancia clínica decada uno de los resultados (un resultado negativo también se interpreta)? ● Tifico O = Negativo (-)

Paratífico A = 1:80

● Tífico H = Positivo (+) (período de incubación) ● Paratífico A = Positivo (+) (período de incubación)

Paratífico B = 1:40

● Paratifico B = Negativo (-) ● Proteus OX19 = Positivo (+)

Proteus OX19 = 1:640

● Brucella = Negativo (-)

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Brucella = Neg

¿Qué decisión toma al respecto? Fundamente su respuesta (

) Efectuar el reporte del resultado

(

) Reprocesar la muestra

(

) Realizar prueba semicuantitativa

( x ) Solicitar nueva muestra al paciente

● Se tendrá que solicitar una nueva muestra el día siguiente, para confirmar los resultados obtenidos en tifico H 1:80 y paratifico A 1:80, debido a que el título de 1:80 tifico H y paratifico A se encuentran en el periodo de incubación, el periodo de incubación es de 8 a 14 días y la paciente presenta un cuadro clínico de apenas 8 dias de evolucion. ● En la primer prueba (prueba cualitativa) que le realizaron al paciente, esta salio positivo (aglutino) en el antígeno O, H, A y B. Con esta información realizaron la segunda prueba (prueba semicuantitativa) con los antígeno O, H, A y B realizando las pruebas hasta la dilución 1:640 y con esto se dieron cuenta que el paciente contaba con una alta concentración (1:640) de Proteus OX19, los títulos de 1:160 son indicativo de enfermedad de fiebre Tifus.

¿Se puede emitir un diagnóstico concluyente? Si o No, ¿Cuál es dicho diagnóstico?

Si se puede emitir un diagnóstico concluyente, el diagnóstico sería que el paciente cuenta con fiebre tifus, debido a los valores obtenidos en los títulos en proteus OX19 = 1:640, además los síntomas que presenta el paciente son de fiebre tifus.

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3. Paciente masculino de 11 años de edad presenta fiebre, escalofríos, pérdida de apetito, sudores, debilidad, mialgias, artralgias y cefalea, acude a su médico y este le solicita Reacciones febriles y prueba de rosa de bengala. En el análisis que se le realiza en el laboratorio se muestra lo siguiente: Tífico O = 1:80

Tífico H = 1:40

Responda lo siguiente: ¿Cuál es la significancia clínica de cada uno de los resultados? ● Tífico O = Positivo (+) ● Tífico H = Negativo

Paratífico A = 1:40

● Paratífico A = Negativo ● Paratífico B = Negativo

Paratífico B = 1:0

● Proteus OX19 = Negativo ● Brucella=Positivo (+)

Proteus OX19 = Neg

● Rosa de bengala = Positivo (+) Brucella = 1:160

¿Qué decisión toma al respecto? Fundamente su respuesta ( x ) Efectuar el reporte del resultado

Rosa de bengala = 800 UI/mL

(

) Reprocesar la muestra

(

) Realizar prueba semicuantitativa

(

) Solicitar nueva muestra al paciente ● Se efectúa el reporte del resultado ya que estos son muy claros puesto que en la realización de la prueba cualitativa aglutino en el antígeno O, H, A y B. Con esto se procedió a realizar la segunda prueba semicuantitativa con los antígeno O, H, A y B, el caso del antígeno O se observó aglutinación hasta la dilución 1:80 lo que nos estaría indicando que la bacteria está en el período de incubación de fiebre tifoidea, sin embargo en el antígeno H se observó aglutinación hasta la dilución 1:40 confirmando que aún no hay anticuerpos para el antígeno de la Salmonella typhi por lo cual no hay una fiebre tifoidea. ● Luego, en la realización de la prueba cualitativa para titulaciones de aglutininas paratífico tipo A y B se

Laboratorio de Inmunología 2020-1 observó aglutinación en ambas, por lo que se procedió a realizar la prueba semicuantitativa donde se observó aglutinación hasta la dilución 1:40 arrojando un resultado negativo para ambos tipos, por lo cual no tendrán significancia médica, y se descarta una infección por Salmonella enteritidis. ● Por otro lado los anticuerpos del tífico (murino) y de la fiebre moteada de las montañas Rocallosas no reaccionaron con Proteus OX19 lo cual nos indica un resultado negativo, por lo que se elimina alguna sospecha contra fiebre tifoidea. ● Sin embargo en la realización de la prueba cualitativa para Brucelosis aglutino por lo que se procedió a realizar la prueba semicuantitativa donde se observó aglutinación hasta 1:160 lo que es indicativo de una infección ya que el paciente cuenta con síntomas clínicos. ● La prueba rosa de bengala nos ayuda a confirmar la presencia de anticuerpos anti Brucella abortus lo cual nos dio un resultado positivo tomando como referencia 25 UI/mL.

¿Se puede emitir un diagnóstico concluyente? Si o No, ¿Cuál es dicho diagnóstico? ● Si, se puede emitir un diagnóstico concluyente, el diagnóstico sería que el paciente cuenta con Fiebre producida por Brucella abortus.

4. Paciente femenino de 18 años de edad presenta fiebre, dolor abdominal, deposiciones acuosas fétidas sin sangre. Se le solicita realizarse unas Reacciones Febriles y los resultados fueron los siguientes: Tífico O = Positivo

Responda lo siguiente: ¿Cuál es la significancia clínica de cada uno de los resultados?

Tífico H = Positivo

● Tífico O = Positivo

Laboratorio de Inmunología 2020-1 ● Tífico H = Positivo ● Paratífico A = Positivo

Paratífico A = Positivo

● Paratífico B = Positivo ● Proteus OX19 = Neg

Paratífico B = Positivo

● Brucella = Neg Proteus OX19 = Neg ¿Qué decisión toma al respecto? Fundamente su respuesta Brucella = Neg

(

) Efectuar el reporte del resultado

(

) Reprocesar la muestra

( x ) Realizar prueba semicuantitativa (

) Solicitar nueva muestra al paciente ● Se necesita realizar la prueba semicuantitativa para el tifico O, tifico H, paratífico A y el paratifico B para asegurarnos si en realidad la paciente cuenta con la infección activa de la Salmonella typhi y S. enteritidis

¿Se puede emitir un diagnóstico concluyente? Si o No, ¿Cuál es dicho diagnóstico? ● No se puede emitir un diagnóstico concluyente hasta que la prueba semicuantitativa sea realizada. ● Pero en dado caso la paciente puede salir positivo en Salmonella typhi y S. enteritidis. Y si no es así entonces la paciente anteriormente estuvo en contacto con la bacteria y la aglutinación mostrada es por los Ac.

Bibliografía: ● Bush, L. (2018). Fiebre tifoidea (p. 1). Florida: Charles E. Schmidt. https://www.msdmanuals.com/es/hogar/infecciones/infecciones-bacterianasbacterias-gramnegativas/fiebre-tifoidea ● Mayo clinic. (2019) (p. 1). Minnesota. https://www.mayoclinic.org/es-es/diseasesconditions/typhoid-fever/symptoms-causes/syc-20378661?p=1

Laboratorio de Inmunología 2020-1 ● Wiener-Lab. (2000). Antígenos Febriles. Ref: 870090000 / 00 p. 2/6 https://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum %20espanol/antigenos_febriles_sp.pdf ● Mayo clinic. (2019). Infección por salmonela (p. 2). Minnesota https://www.mayoclinic.org/es-es/diseases-conditions/salmonella/symptomscauses/syc-20355329

Determinación cualitativ cualitativa a de anticuerpos antiBrucella por aglutinación con el antígeno rosa de bengala Equipo de Laboratorio:

Equipo 5

Grupo :

6C

Victor Manuel Mendoza Paúl Julián Escapita Salcedo Integrantes del equipo: Jocelyn Sarahi Rodriguez Moreno

PREGUNTAS PRE REQUISITO IV. 1. La brucelosis es una infección causada por diversas bacterias del Género Brucella, menciona las especies de este género que pueden ser detectadas por la técnica de aglutinación con el antígeno rosa de bengala. ● B. melitensis

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● B. abortus ● B. suis ● B. canis 2. ¿Qué anticuerpos detecta la prueba de rosa de bengala? El reactivo, debido a su formulación en un tampón de pH ácido,es capaz de reaccionar con anticuerpos IgG o IgM anti-Brucella en suero humano. 3. ¿Qué antígeno utiliza la prueba de rosa de bengala? Se utiliza una suspensión de Brucella abortus cepa S99, en Tampón Lactato 1 mol/L, fenol 5 g/L, Rosa Bengala,pH 3,6. 4. ¿Por qué a esta prueba se le conoce con el nombre de Rosa de Bengala? Porque se utiliza como antígeno en una suspensión bacteriana a la que se ha añadido el colorante rosa de bengala, enfrentándose al suero sin diluir del enfermo. Proporciona una aproximación diagnóstica en pocos minutos con una sensibilidad y especificidad muy altas. Presenta elevado grado de correlación con la seroaglutinación y, por su simplicidad, es muy útil como prueba de despistaje inicial o screening. Sus falsos negativos se limitan a enfermos con procesos de pocos días de evolución y a algunos casos de enfermedad de curso muy prolongado. 5. La prueba de rosa de bengala es muy útil para diagnosticar el estado crónico de la enfermedad, cosa que no se logra con la prueba de aglutinación en tubo (técnica de Wright). ¿Cierto o Falso? Justifique su respuesta Cierto, ya que la Serodiagnóstico de Wright permite el diagnóstico de las formas agudas de la Brucelosis Esta prueba cuantitativa se positiviza precozmente, desde el 10º o 12º día, en la forma aguda de la brucelosis, pero se negativiza rápidamente porque detecta las IgM. A veces da resultados negativos en la brucelosis subaguda y casi siempre en las brucelosis crónicas. No se recomienda para los estudios epidemiológicos ni para el diagnóstico de brucelosis crónica. Mientras que en la rosa de bengala, esta prueba cualitativa, que se positiviza un poco después que el serodiagnóstico de Wright, es útil en el despistaje, el diagnóstico y el seguimiento de la brucelosis (estudios epidemiológicos).

V. VIDEO Vea los siguientes videos para comprender la metodología a seguir. https://youtu.be/igAVQ-GiyGY y https://youtu.be/WaTE0bpPgSk

Laboratorio de Inmunología 2020-1 VI. INTERPRET INTERPRETA ACIÓN DE RESUL RESULT TADOS 5. Paciente femenino de 42 años de edad presenta fiebre, escalofríos, pérdida de apetito, sudores, debilidad y cefalea, acude a su médico y éste le solicita prueba de rosa de bengala. En el análisis que se le realiza en el laboratorio se muestra lo siguiente: Responda lo siguiente: ¿Cuál es el resultado de esta prueba? ● Positivo (+)

¿Qué decisión toma al respecto? Fundamente su respuesta (

) Efectuar el reporte del resultado

(

) Reprocesar la muestra

( x ) Realizar prueba semicuantitativa (

) Solicitar nueva muestra al paciente ● Se realiza la prueba semicualitativa ya que como la muestra aglutino esto significa que la concentración de la muestra es igual o mayor a 25 UI/ml. Y se define el título como la mayor dilución que haya tenido aglutinación.

¿Cuál es la interpretación de este resultado? ● Se puede observar a simple vista la presencia de aglutinación en los bordes de la muestra problema nos indica la presencia de la reacción Ag-Ac.

6. Paciente masculino de 25 años de edad que presenta fiebre, pérdida de apetito y debilidad, acude al laboratorio a realizarse prueba de rosa de bengala. En el análisis que se le realiza muestra lo siguiente:

Laboratorio de Inmunología 2020-1 Responda lo siguiente: ¿Cuál es el resultado de esta prueba? ● Negativo (-)

¿Qué decisión tomas al respecto? Fundamenta tu respuesta ( x ) Efectuar el reporte del resultado (

) Reprocesar la muestra

(

) Realizar prueba semicuantitativa

(

) Solicitar nueva muestra al paciente ● Se reporta el resultado como negativo ya que no se observó ninguna aglutinación en la muestra problema.

¿Cuál es la interpretación de este resultado? ● En la muestra problema no aglutino esto se debe a que no hubo reacciones Ag-Ac, indicando que el paciente no cuenta con Ac anti-brucella.

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7.

Paciente femenino de 37 años de edad es remitida al laboratorio por su médico tratante para realizarse la prueba de rosa de bengala. El QBP a cargo de ese departamento decide hacer diluciones a la muestra obteniendo los siguientes resultados:

Responda lo siguiente: ¿Cuál es el resultado de esta prueba? Incluya los cálculos para obtener el resultado semicuantitativo ● Concentración apro aproxx de Ac anti-Brucella: 25 (64)= 1600 Ul/mL

¿Por qué se tuvo que hacer diluciones a la muestra? ● Se realizaron diluciones ya que en la prueba cualitativa, el resultado de la muestra problema fue positivo, entonces al ser positivo se necesita realiza la prueba semi cuantitativa en el cual se realizan diluciones para saber la concentración de aprox. de los Ac anti-brucella.

¿Cuál es la interpretación de este resultado?

● El resultado es positivo (+) hasta la dilución 64, donde se puede apreciar la aglutinación en los bordes de cada dilu...