TÉcnica DE Sedimentacion DE Ritchie PDF

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sedimentacion de Ritchie ...

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Universidad Autónoma de Tamaulipas

Unidad Académica Multidisciplinaria Reynosa-Aztlán

LABORATORIO DE PARASITOLOGIA CLINICA

INVESTIACION SESION #7: TÉCNICA DE SEDIMENTACION DE RITCHIE

Luis Gabriel Marin Andrade

Q.F.B. Ramsés Orlando Lara Medina

7° “D”

METODO DE SEDIMENTACION DE RITCHIE La sedimentación es menos eficaz que la flotación para la concentración de quistes de protozoarios y abundantes huevos, pero es más útil para la búsqueda de huevos de esquistosoma y operculados. El método de Ritchie o también llamado método de concentración en éterformalina es una técnica de sedimentación que se basa en la concentración de huevos de helmintos, larvas y quistes de protozoarios mediante la centrifugación, con la ayuda de formol y éter para separar y visualizar los elementos parasitarios. Sustancias: 

Solución salina isotónica



Solución de formaldehído al 10%



Éter etílico



Solución de yodo-lugol



Muestra biológica: heces fecales frescas

Procedimiento: 1. Tomar con el abatelenguas aproximadamente 1 gr de materia fecal y colocar en el vaso de precipitados, añadir 10 ml de solución salina y homogeneizar 2. Se filtra la suspensión a través de la gasa doblada en cuatro partes y colocada en el embudo, recogiendo el filtrado en el tubo cónico. 3. Centrifugar el filtrado a 2000 rpm por 2 minutos 4. Decantar el líquido sobrenadante y resuspender con el aplicador de madera el sedimento con solución salina. Centrifugar nuevamente, decantar y resuspender dos veces más. 5. Al último sedimento se agregan 5 ml de solución de formaldehído al 10%, se mezcla y se deja reposar durante 10 minutos en la gradilla 6. Se añaden 0.5 ml de éter, se tapan los tubos y se agitan enérgicamente durante 30 segundos. 7. Centrifugar durante 2 minutos a 2000 rpm.

8. Después de centrifugar se observan cuatro capas: El método de Ritchie es uno de ellos, y se basa en el principio de la densidad. Usa sustancias químicas, como lo son el formaldehído y el éter, que permiten remover material lípido y coloidal y obtener así un sedimento más “puro”. Además, la formaleina conserva huevos, larvas y quistes, por lo que el material puede examinarse horas o incluso días después. 9. Decantar el sobrenadante 10.Introducir la pipeta Pasteur hasta el sedimento, extraer con cuidado una gota del sedimento y colocarla en el portaobjetos. 11. Añadir una gota de lugol y con uno de los ángulos del cubreobjetos homogeneizar, y cubrir con el mismo. 12.Observar la preparación con al microscopio con objetivos 10x y 40x. DISCUSION Entre las muchas ventajas que tiene este procedimiento están: 1.Reune y no deforma las posibles formas parasitarias 2. Permite que se pueda transportar y almacenar la materia fecal procesada antes de ser examinada, pues los agentes químicos conservan a los parásitos que existan en la muestra. 3. Se usa cuando necesitan una técnica para evaluación de tratamiento y determinación de frecuencia. La finalidad de repetir el proceso de centrifugación con solución salina es porque de esa manera también se elimina la mayor cantidad de restos fecales, vegetales y grasas que estén presentes, que intervienen la mayoría de las veces en la visualización microscópica. La función de la centrifuga en esta práctica fue de suma importancia, puesto que utiliza la fuerza centrípeta para separar sustancias de diferentes densidades.

Metodo de Faust

Metodo de SheaterMetodo de Ritchie Sugar Útil para recuperar Útil para quistes y La sedimentación es quistes de protozoos y huevos livianos menos eficaz que la huevos de helmintos flotación para la concentración de quistes de protozoarios y abundantes huevos una técnica de Los elementos Los ooquistes flotan de Es parasitarios se recogen manera diferencial a las sedimentación que se del a superficie de un levaduras en una capa basa en la concentración líquido denso, a la cual de líquido más arriba que de huevos de helmintos, ascienden por su menor éstas exhibiendo una larvas y quistes de tonalidad rosada protozoarios mediante la peso específico. centrifugación, con la característica. ayuda de formol y éter para separar y visualizar los elementos parasitarios. Es ideal para el método Se lo recomienda para la Útil para la búsqueda de de huevos de esquistosoma de diagnóstico de concentración de y operculados. huevos livianos de ooquistes helmintos y quistes de Cryptosporidium sp protozoario Al momento de realizar El tiempo en que debe La formaleina conserva esta técnica debe se hacerse la observación huevos, larvas y quistes, examinarse la muestra lo microscópica es menor por lo que el material antes posible. debido a que la película puede examinarse horas superficial puede o incluso días después. destruirse y los parásitos caer al fondo del tubo. El contacto prolongado con el sulfato de zinc puede deformar los quistes y dificulta su identificación, entonces

Aquellos parásitos con mayor peso específico que la solución empleada no flotarán (que es lo que a veces sucede con huevos infértiles de Ascaris lumbricoides o huevos operculados)

La observación microscópica puede dificultarse se debido a los elemento no parasitarios

BIBLIOGRAFIA Manual de laboratorio de parasitología, documento formato pdf, consultado el día 15

de

septiembre

enhttp://es.scribd.com/doc/5275620/MANUAL-DE-

LABORATORIO-DE-PARASITOLOGIA Vanesa, C. G. (s.f.). SCRIBD. Recuperado el 2018 de Septiembre de 21, de https://es.scribd.com/document/345323935/Metodo-Faust Hortensia

Magaró,

A.

U.

(s.f.).

TECNICAS

DE

DIAGONOSTICO

PARASITOLOGICO . Santa Fe, Argentina : Departamento de Microbiolagia: Area de Parasitologia....