Práctica 6 - Fundamento del método de Ritchie PDF

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Fundamento del método de Ritchie...

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Práctica 6 Método concentración Ritchie "Sedimentación" Heces humanas y de perro Objetivo 

Realizar el examen directo para la búsqueda de parásitos intestinales en una muestra de heces recientes.



Identificación de parásitos en una muestra de heces frescas.



Adquirir habilidad para realizar técnicas de concentración por sedimentación o formol – éter y el manejo de muestras biológico-infeccioso.

Ritchie (Formalina – Éter) Existe un elevado número de técnicas de exámenes coproparasitoscópico, con fines diferentes, con ventajas y desventajas relativas. En general, podemos clasificar las distintas técnicas según la capacidad de concentrar elementos, cuantificar la carga parasitaria, utilidad para diagnosticar distintos estados evolutivos y la posibilidad de preparar frotis permanentes a partir de la muestra. La selección de una o más técnicas dependerá de qué especie parasitaria y qué fase de su ciclo evolutivo es necesario diagnosticar, dada las diferentes cualidades de cada método. En todas las técnicas el rendimiento mejora si se examinan varias muestras (al menos tres) por cada paciente, obtenidas en días alternos, dado que los elementos parasitarios se eliminan en forma irregular. La técnica de Ritchie, es una técnica que por medio de la sedimentación, concentra huevos y larvas de helmintos y quistes de protozoarios. El procedimiento es rápido y tiene la ventaja de remover materias líquidas, y disolver grasas y coloidales para obtener un sedimento más claro. Además, la formalina conserva los huevos, larvas y quistes, por lo que el material puede examinarse horas e incluso días después.

Fundamento Esta técnica forma parte de una serie de análisis coproparasitoscopicos considerados de concentración fue descrita por Ritchie en 1948, es de utilidad para la búsqueda de huevos quistes y larvas. Es empleada cuando no se observan parásitos en el método directo y para aumentar la probabilidad de observar parásitos en las muestras estudiadas. Algunas referencias no indican el uso de malla o gasa al aplicar el método (ver apartado de técnica) por lo que se pueden obtener sedimentos sucios y no con la calidad requerida para un optima observación. Es fundamento de la técnica se basa en el uso de la fuerza centrífuga que obligara a los parásitos a ir al fondo del tubo, del éter que elimina los detritus orgánicos, mientras que el formol ayuda a mantener la integridad de las formas parasitarias que se concentran. Material  Asa de nicromo.  Aplicadores de madera y abatelenguas  1 Coladera de plástico de malla

Reactivos:  Solución Formalina al 10 %  Solución de Lugol 

Éter de petróleo

fina.  Gasas dobles en lugar de coladera  Embudo de vástago corto.  1 Gradilla.  2 Tapones de hule para tubo. Otros:  Muestras de heces fecales de humano y de perro.

Equipo  Microscopio óptico  Centrífuga

Procedimiento Técnica Ritchie 1. Homogeneizar la materia fecal con agua o solución salina, en suspensión uno a uno. 2. Tamizar la muestra con la coladera, o con gasa doble 3. Centrifugar a 2000 revoluciones por minuto de dos minutos. 4. Decantar. 5. Resuspender con SSF agitando con un palillo. 6.

Esto debe repetirse repetirse dos o tres veces.(sólo se lavará una vez) 1. Al tubo lavado una vez, se le agrega: 2. Formalina al 10% 2.5 mL 3. Agitar hasta homogenizar y reposar 5-10 min (8 min) 4. Agregar de 2.5 mililitros de éter de petróleo a la suspensión. 5. Tapar el tubo y agitar vigorosamente 30 segundos; destapar con cuidado para evitar que se proyecte, recordar que el éter es muy volátil y centrifugar 1500 -2000 r.p.m. durante 3 minutos (sin tapón). 6. Retirar el tubo de la centrifugar y observar las cuatro interfaces. 7. Decantar (puede introducir la pipeta Pasteur a través de las interfaces y extraer una gota del sedimento o despejarlo con palillos largos y decantar).luego se tomará del sedimento una gota con pipeta pasteur, palillo o aza de nicromo. 8. Colocar una gota sobre un portaobjetos previamente con lugol. 9. Teniendo la muestra con el lugol extenderla 10. Colocar el cubreobjetos. 11. Observar al microscopio en el objetivo 10 x y 40 x. 12. Reportar presencia o ausencia de parásitos.

OPCIONAL: SE PUEDE UTILIZAR ACETATO DE ETILO EN LUGAR DE ÉTER, AMBOS TIENEN DENSIDAD SIMILAR.

NOTA: No Olvidar Procesar Igualmente La Muestra Control. Reporte Nombre del paciente: Muestra heces

Olga Martínez Fecha

25/09/19

: Fundamento (interpretación): Se observó una cantidad moderada de almidones tanto parcialmente digeridos como no digeridos, escasa cantidad de fibras vegetales y animales; y abundante grasa. No se observó la presencia de parásitos pero serían necesarias más muestras para descartar su presencia.

Observaciones microscópicas

Almidón digerido

Objetivo 40x

Celulosa

Objetivo 40x

Rojo: grasa. Azul: almidón digerido

Objetivo 40x

Objetivo 40x

Muestra de heces de perro

Pelo vegetal

Almidón parcialmente digerido

Ácidos grasos Ácidos grasos

Objetivo 40x

Objetivo 40x

Almidón digerido

Objetivo 40x

Almidón no digerido

Objetivo 40x

CONCLUSIONES: Se lograron los objetivos plateados al inicio, se logró conocer todos los aspectos necesarios para poder llevar a cabo la técnica de concentración por sedimentación de Ritchie, además que me di cuenta de que en realidad es una técnica muy fácil, rápida y económica de realizar, por lo que es un buen plus para realizar en cada muestra positiva que podamos obtener; como fuente de investigación y para poder observar las formas parasitarias más claras. BIBLIOGRAFÍA: Magaró H. (2019) Técnicas de diagnostico parasitológico, recuperado el 18/09/19 en: www.diagnosticoparasitario.pdf Peréz G. Métodos de concentración, recuperado el 18/09/19 en: Sharon. parasitología.blogspot.com

Anexos:...