Verslag Antibiotica Resistentie en antiseptica microbio 2 PDF

Preview

Summary

dit is het verslag dat gemaakt is voor labo microbio 2 met feedback. antibiotica resistentie en antiseptica zijn hier getest...

Description

Verslaggevers: Naomi Bauwens, Chama Bouzidi en Ahlam El Jafouf Lector: Flore Wouters Vak: Labcluster Microbiologie II

Klas: 2FBTA Labgroep 1 Datum: 16 december 2021

VERSLAG ANTIBIOGRAM EN RESISTOGRAM

DOEL Het opstellen van een antibiogram en resistogram om de gevoeligheid voor verscheidene antibiotica en antiseptica te bepalen van verschillende microorganismen a.d.h.v. de Kirby Bauer test.

PRINCIPE Het controleren van antiseptica- en antibioticaresistentie is noodzakelijk omdat dit duidt op een afname van de gevoeligheid van een bepaald micro-organisme t.o.v. een bepaald antibiotica of antiseptica. Dit resulteert in het niet meer kunnen afremmen of doden van deze bacterie, de antiseptica of antibiotica zullen dus minder goed of helemaal niet meer werken in situaties dat ze echt nodig zijn. Voor het bepalen van deze resistentie wordt een antibiogram en resistogram opgesteld, in dit geval voor de micro-organismen E. coli, Salmonella, S. aureus, S. epidermidis en P. aeruginosa. Er wordt hiervoor gebruik gemaakt van de gestandaardiseerde Kirby Bauer test. Hierbij worden met antibiotica en antiseptica geïmpregneerde filterpapier-schijfjes (disks) aangebracht op een Mueller-Hinton agar plaat, een algemene voedingsbodem, die is uitgestreken met een bacteriële suspensie[ CITATION Jac21 \l 1043 ] [ CITATION die21 \l 1043 ].Tijdens de incubatietijd van 24-48u bij 37°C vindt er diffusie van het antibiotica of antiseptica plaats. Indien de bacterie niet resistent is tegen een bepaald antibiotica of antiseptica zal er een heldere halo zichtbaar zijn rondom het filterpapier, dit duidt op inhibitie of remmende groei van de bacterie. Deze halo wordt ook wel de remzone genoemd, hiervan wordt de diameter opgemeten in mm om de graad van gevoeligheid te bepalen a.d.h.v. de standaarden uit de bijhorende tabel [ CITATION Cli08 \l 1043 ]. Er kan echter ook een synergetisch effect worden waargenomen bij de inhibitie, hierbij zijn er meerdere antibiotica of antiseptica die samen de remgroei of inhibitie versterken. Indien dit het geval is zullen deze naast elkaar liggende disks een grotere remzone (straal) vertonen aan de kant waar de synergetische disk gelegen is [ CITATION Raf12 \l 1043 ]. De antibiotica die getest zullen worden zijn Penicilline, Ampicilline, Chloramphenicol, Erythromycine, Gentamicine en tetracycline. De disks met antiseptica bevatten zeep, handgel, wasmiddel, surfa safe, Kristalviolet en lugol.

Verslaggevers: Naomi Bauwens, Chama Bouzidi en Ahlam El Jafouf Lector: Flore Wouters Vak: Labcluster Microbiologie II

Klas: 2FBTA Labgroep 1 Datum: 16 december 2021

BEREKENINGEN EN RESULTAAT Resultaten Kirby Bauer test antibiotica (A) en antiseptica (B): E. coli

Salmonella

S. aureus

P. aeruginosa

S. epidermidis

Penicilline (1A)

Geen remzone = R

Geen remzone = R

Geen remzone = R

Geen remzone = R

Geen remzon = R

Ampicilline (2A)

Remzone 15mm =I

Geen remzone = R

Remzone 18mm =R

Geen remzone = R

Remzone 13mm = R

Chlorampheni col (3A)

Remzone 29mm =S

Remzone 26mm =S

Remzone 35mm =S

Geen remzone = R

Geen remzone =R

Gentamicine (4A)

Remzone 20mm =S

Remzone 16mm =S

Remzone 25mm =S

Remzone 14mm =I

Geen remzone =R

Erythromycine (5A)

Geen remzone = R

Geen remzone = R

Geen remzone = R

Geen remzone = R

Geen remzone =R

Tetracycline (6A)

Remzone 25mm =S

Geen remzone = R

Remzone 35mm =S

Geen remzone = R

Remzone 25mm

Zeep (1B)

Geen remzone = R

Geen remzone = R

geen remzone = R

Geen remzone = R

Geen remzone =R

Handgel (2B)

Geen remzone = R

Geen remzone = R

Geen volledige remzone, kolonies zichtbaar = I

Geen remzone = R

Geen volledige remzone, kolonies zichtbaar = I

Wasmiddel (3B)

Geen remzone = R

Geen remzone = R

Geen remzone = R

Geen remzone = R

Geen volledige remzone, kolonies zichtbaar = I

Surfa Safe (4B)

Remzone 14mm =S

Geen remzone = R

Geen volledige remzone, kolonies zichtbaar = I

Geen remzone = R

Remzone 15mm = S, synergetisch effect met kristalviolet

Kristalviolet (5B)

Remzone 20mm =S

Remzone 12mm =S

Remzone 20mm =S

Remzone 20mm =S

Remzone 12mm = S

Lugol (6B)

Geen remzone = R

Geen remzone = R

Geen volledige remzone, kolonies zichtbaar = I

Geen remzone = R

Remzone 5mm =S

Verslaggevers: Naomi Bauwens, Chama Bouzidi en Ahlam El Jafouf Lector: Flore Wouters Vak: Labcluster Microbiologie II

Klas: 2FBTA Labgroep 1 Datum: 16 december 2021

Resistent = R; Intermediair = I; Gevoelig = S volgens Tabel 44.2 “Zone diameter interpretive standards for organisms”, Cursus Lab microbiologie II pg 43/45 De gemeten diameter van de remzone in mm

Foto’s van bekomen resultaten: E.

coli antibiotica

Salmonella antibiotica

S.aureus antibiotica

E. co antisep En S epidem antisep

P.aeruginosa antibiotica

S. epidermidis antibiotica

Verslaggevers: Naomi Bauwens, Chama Bouzidi en Ahlam El Jafouf Lector: Flore Wouters Vak: Labcluster Microbiologie II

Salmonella antiseptica

S. aureus antiseptica

Klas: 2FBTA Labgroep 1 Datum: 16 december 2021

P.aeruginosa antiseptica

BESLUIT Penicilline en Erythromycine zijn antibiotica waar alle onderzochte microorganismen resistentie bij vertonen. Alle micro-organismen blijken echter gevoelig te zijn voor het antiseptica Kristalviolet. E. coli is zeer gevoelig voor antibiotica Chloramphenicol, Gentamicine en Tetracycline en vertoont een intermediair resultaat voor Ampicilline. Verder is deze ook licht gevoelig voor antiseptica Surfa Safe. Salmonella blijkt niet resistent te zijn tegen antibiotica Chloramphenicol en Gentamicine en P.aeruginosa geeft een intermediair resultaat voor Gentamicine. S. aureus vertoont inhibitie bij alle antibiotica met uitzondering op Penicilline en Erythromycine. Echter kan het resultaat bij Tetracycline in twijfel getrokken worden aangezien de tablet verpulvert was en uitgesmeerd over de agar. Er is een vermoeden van inhibitie maar kan niet met zekerheid bevestigd worden. Verder is er bij S. aureus ook waar te nemen dat bij antiseptica lugol, Surfa Safe en handgel er wel remming van bacteriële groei aanwezig is maar geen inhibitie. Tenslotte is S. epidermidis gevoelig voor antibiotica Ampicilline en Tetracycline. Er is ook sprake van remming van bacteriële groei bij antiseptica handgel en wasmiddel maar geen inhibitie. Verder wordt het effect van Surfa Safe versterkt door Kristalviolet, er is sprake van er synergetisch effect.

VERDIEPINGSVRAGEN Wat is het werkingsmechanisme van de gebruikte antibiotica? Geef ook de referenties van de geraadpleegde literatuur. Penicilline doodt vnl. Grampositieve bacteriën waarvan de DD-transpeptidaseactiviteit het hoogst is. Dit gebeurt door binding van de β-lactamring aan DD-

Verslaggevers: Naomi Bauwens, Chama Bouzidi en Ahlam El Jafouf Lector: Flore Wouters Vak: Labcluster Microbiologie II

Klas: 2FBTA Labgroep 1 Datum: 16 december 2021

transpeptidase, waardoor de cross-linking activiteit geremd wordt en nieuwe celwandvorming wordt voorkomen. Zonder celwand is een bacteriële cel kwetsbaar voor water van buitenaf en moleculaire druk, waardoor de cel snel afsterft [ CITATION new \l 1043 ]. Ampicilline is een breedspectrum aminopenicilline met een semisynthetische groep β-lactamringen die zowel kan inwerken op de celwand van Grampositieve als Gramnegatieve bacteriën [ CITATION htt3 \l 1043 ]. Chloramphenicol stopt de bacteriegroei door zich te binden aan het bacteriële ribosoom. Het blokkeert het enzym peptidyltransferase en remt zo de eiwitsynthese van de bacterie. Chloramphenicol is niet bacteriedodend, tenzij in zeer hoge concentraties, maar wel groeiremmend [ CITATION dru \l 1043 ]. Gentamicine wordt gebruikt voor de behandeling van verscheide aërobe Gramnegatieve bacteriën. Gentamicine gaat door het Gramnegatieve membraan via het zuurstofafhankelijke actieve transport. Dit is waarom dit enkel bij aërobe bacteriën mogelijk is omdat zuurstof aanwezig moet zijn. Eenmaal in het cytoplasma bindt gentamicine zich aan het 16s rRNA in de ribosomale subeenheid waardoor translatie van het mRNA wordt verstoord, hierdoor zijn de gevormde eiwitten niet meer finctioneel [ CITATION ncb \l 1043 ]. Erythromycine bindt aan het 23S ribosomale RNA-molecuul in de 50S subeenheid van de ribisomen en stopt zo de bacteriële eiwitsynthese [ CITATION dru1 \l 1043 ]. Tetracycline diffundeert passief door de poriën van het membraan van de bacteriecel en bindt op de 30S subeenheid. Zo voorkomt deze de binding van tRNA op het mRNA complex wat de eiwitsynthese stopzet [ CITATION dru2 \l 1043 ]. Welke van deze kiemen zijn vanuit medisch oogpunt belangrijk? Beschrijf de infecties die deze m.o. veroorzaken. S. epidermidis is één van de grootste oorzaken van nosocomiale bloedinfecties of ziekenhuisinfectie. Patiënten met prothetische kleppen, hartapparatuur, katheters, etc. of pasgeborenen lopen een groot risico op een infectie. De symptomen van deze infecties zijn erytheem, pijn, poeling rond de plaats van infectie [ CITATION Ezr \l 1043 ]. P. aeruginosa is een bacterie die vaak infecties veroorzaakt in het bloed, de longen en andere delen van het lichaam na een operatie. Ook mensen met brandwonden lopen een risico [ CITATION Cen19 \l 1043 ].

BIBLIOGRAFIE

Bibliografie (sd). Opgehaald van https://eur02.safelinks.protection.outlook.com/?url=https%3A%2F%2Fldh.la.gov %2Fassets%2Foph%2FCenter-PHCH%2FCenter-CH%2Finfectious-epi%2FVetInfo %2FVetAntibioResSen%2FLADDL%2FAntimicrobialClasses%2Fbeta-lactams%2Fpenicillins %2Fampicillin.pdf&data=04%7C01%7

Verslaggevers: Naomi Bauwens, Chama Bouzidi en Ahlam El Jafouf Lector: Flore Wouters Vak: Labcluster Microbiologie II

Klas: 2FBTA Labgroep 1 Datum: 16 december 2021

drugbank. (sd). Opgehaald van https://go.drugbank.com/drugs/DB00446 drugbank. (sd). Opgehaald van https://eur02.safelinks.protection.outlook.com/?url=https%3A%2F %2Fwww.ncbi.nlm.nih.gov%2Fbooks%2FNBK557550%2F&data=04%7C01%7Cnaomi.bauwens %40student.ap.be %7C5e86cc865f4d49c9c7cb08d9c0cdb610%7C33d8cf3c2f1448c09ad65d2825533673%7C0% 7C0%7C637752813074449547%7 drugbank. (sd). Opgehaald van https://eur02.safelinks.protection.outlook.com/?url=https%3A%2F %2Fgo.drugbank.com%2Fdrugs%2FDB00759&data=04%7C01%7Cnaomi.bauwens %40student.ap.be %7C5e86cc865f4d49c9c7cb08d9c0cdb610%7C33d8cf3c2f1448c09ad65d2825533673%7C0% 7C0%7C637752813074449547%7CUnknown%7 institute, C. a. (2008). performance standards for antimicrobial disk susceptibility tests, tenth edition. Jackie Reynolds, P. o. (2021, augustus 1). biology libretexts. Opgehaald van https://bio.libretexts.org/Learning_Objects/Laboratory_Experiments/Microbiology_Labs/Mic robiology_Labs_I/09%3A_Kirby-Bauer_(Antibiotic_Sensitivity) Lee, E. (sd). Opgehaald van NCBI: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK563240/ ncbi. (sd). Opgehaald van https://eur02.safelinks.protection.outlook.com/?url=https%3A%2F %2Fwww.ncbi.nlm.nih.gov%2Fbooks%2FNBK557550%2F&data=04%7C01%7Cnaomi.bauwens %40student.ap.be %7C5e86cc865f4d49c9c7cb08d9c0cdb610%7C33d8cf3c2f1448c09ad65d2825533673%7C0% 7C0%7C637752813074449547%7 news medical. (sd). Opgehaald van https://eur02.safelinks.protection.outlook.com/?url=https%3A %2F%2Fwww.news-medical.net%2Famp%2Fhealth%2FPenicillinMechanism.aspx&data=04%7C01%7Cnaomi.bauwens%40student.ap.be %7C5e86cc865f4d49c9c7cb08d9c0cdb610%7C33d8cf3c2f1448c09ad65d2825533673%7C0% 7C0%7C Prevention, C. f. (2019, november 13). CDC. Opgehaald van https://www.cdc.gov/hai/organisms/pseudomonas.html Rafael Peña-Miller, D. L. (2012, mei 23). the royal society. Opgehaald van https://royalsocietypublishing.org/doi/10.1098/rsif.2012.0279 vlaanderen, d. (2021). DGZ. Opgehaald van DGZ: https://www.dgz.be/laboratorium/analyses/laboratoriumafdelingen/gevoeligheidsbepalingen

Verslaggevers: Naomi Bauwens, Chama Bouzidi en Ahlam El Jafouf Lector: Flore Wouters Vak: Labcluster Microbiologie II

Klas: 2FBTA Labgroep 1 Datum: 16 december 2021...