análisis de la cebolla, sabila y tomate bajo el microscopio PDF

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fotografías de la cebolla, tomate y sabila bajo el microscopio, descripción de como ocurre una tinción. ...

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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD LABORATORIO DE AMBIENTE E INSTRUMENTAL NÚMERO DE PRÁCTICA: B.F.24.04 NOMBRE DE LA PRÁCTICA: CÉLULA VEGETAL 1. DATOS INFORMATIVOS: ALUMNO: Bellanina Isamar Armijos Tigre CARRERA: Bioquímica y Farmacia CICLO/NIVEL: Segundo Semestre “A” FECHA: 28/05/2019. DOCENTE RESPONSABLE: B.F. Jessica Alvarado Cáceres Mg. Sc.

2. FUNDAMENTACIÓN CÉLULA VEGETAL La organización que exhiben los seres vivos puede verse desde varios niveles, algunos de ellos son el nivel celular y el de tejidos, en estos la célula es la unidad anatomofisiológica básica de la vida y hay diferentes formas de células de acuerdo a su función, sin embargo casi todas las células tienen similitudes fundamentales. La célula vegetal es un ejemplo de célula eucariótica, consiste de una pared que la envuelve denominada membrana celulósica o cápsula de secreción y un protoplasto que es la parte viva, el protoplasto incluye la membrana plasmática, el citoplasma y el núcleo; el citoplasma a su vez contiene diversos tipos de plastidios, mitocondrias, vacuolas y sustancias ergasticas. Las células vegetales varían en forma, tamaño y contenidos; sin embargo son las unidades estructurales. a) Membrana Plasmática: Es la primera capa que cubre a toda la célula y se encarga de mantener el equilibrio entre los líquidos que se encuentran en su interior y el exterior de la célula. b) El núcleo: Mantiene la identificación genética de toda célula, en él se encuentra toda la información genética necesaria para su posterior división celular. c) Aparato de Golgi: En este orgánulo se producen las proteínas necesarias para el organismo d) Retículo Endoplásmatico: Son capas plegadas que se encargan de sintetizar proteínas, podemos encontrarlo en dos formas, retículo endoplásmatico liso y retículo endoplásmatico rugoso. e) La mitocondria: Que interviene en la respiración celular, pero es un organelo secundario en la célula vegetal, en cambio en la célula animal está mucho más desarrollado.

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD f) Pared celular: Está compuesta por celulosa y su función es darle tanto rigidez como protección a la planta, la célula animal solo posee membrana plasmática g) Plastidios: Estos Plastidios se encargan de almacenar sustancias químicas encargadas de producir energía, en el caso de las plantas encontramos a los cloroplastos, un tipo de plastidio con función primordial para las plantas, es donde se produce la clorofila que hará el proceso de la fotosíntesis, función que no tienen los animales, la célula vegetal produce su propio alimento por lo que son organismos autótrofos. Los cloroplastos también le confieren el color verde característicos de las plantas. h) Vacuola: En la célula vegetal podemos encontrar una vacuola que pueden ocupar gran parte de la célula y ella se encarga de almacenar grandes reservas de líquidos para ser utilizada por la planta, la coloco en este apartado porque la célula animal a pesar de tener también vacuolas estas son muy pequeñas y en la mayoría de los casos poco funcionales i) El citoplasma: facilita el movimiento de los organelos y transporte de sustancias formando un medio acuoso en todo el interior de la célula.

Fig. 1: Estructura de una célula vegetal típica (Murray W. 2016) Las células están unidas una con otra por la lámina media la cual está compuesta principalmente de substancias pépticas y une la pared primaria de una célula a la de las células adyacentes ya que actúa como cementante. La pared celular puede ser solo una pared primaria o puede estar constituida por pared primaria y secundaria; la pared primaria se compone de celulosa, hemicelulosa y substancia pépticas; en los casos en que también está presente la pared secundaria, además presenta lignina. Rodeando al citoplasma y estableciendo el límite entre él y la pared está la membrana plasmática o plasmalema la cual no es visible con el microscopio de luz, está compuesta de proteína y lípidos.

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD La continuidad citoplasmática se establece por interconexiones llamadas plasmodesmos que pasan de célula a célula a través de poros en la pared; en las áreas donde se forman los plasmodesmos se forman campos circulares llamados punteaduras primarias, las cuales pueden llegar a tener gran especialización. 3. OBJETIVOS - Identificar mediante el microscopio las estructuras que presentan las siguientes muestras biológicas - Manejar adecuadamente la técnica de preparar y observar muestras en gota fresca y utilizando tinciones simples. 4. MATERIALES E INSUMOS EQUIPOS

Microscopio

MATERIALES Porta objetos Bisturí Cubreobjetos Toalla de papel Tabla de madera o plástico

REACTIVOS O SUSTANCIAS

MUESTRAS BIOLÓGICAS

Azul de metileno Lugol Solución salina al 0.1 % (Suero fisiológico)

Cebolla Sábila Tomate

5. PROCEDIMIENTO CEBOLLA Las cebollas son bulbos formados por células vivas de las cuales pueden crecer raíces y hojas cuando las cebollas se plantan o se almacenan en un sitio húmedo. # ACTIVIDADES PARA LA CEBOLLA 1 Instalar los equipos a utilizar 2

Limpiar el microscopio

OBSERVACIONES Preferible con una toalla desechable.

Corte un bulbo de cebolla en cuatro partes. Se observa que cada parte se separa por sí sola en capas llamadas catáfilos. Realizar el corte de 3 Tome uno de estos catafilos con la superficie cóncava hacia transversal usted y rómpala, entonces se desprende con facilidad una capa muy delgada y transparente que es la epidermis. La muestra debe ser muy Tomar la muestra de la cebolla con el bisturí y colocarla en el 4 portaobjeto delgada Colocar una gota de lugol en la muestra, extraiga el líquido 5 sobrenadante con papel toalla. 6 Con un capilar mezclar la muestra con el reactivo 7 Colocar el cubreobjetos 8 Observar las estructuras con cada opción de aumento que Mientras más aumenta el permita el microscopio. Empiece primero con el de menor lente se observa mejor la

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD aumento. Usted mismo enfoque con los lentes del microscopio (4x, 10x, 40x y 100x ) Vuelva a hacer el procedimiento antes descrito desde el paso 9 3, pero esta vez en vez de adicionar lugol, adicione una gota de azul de metileno.

parte interna de la muestra. La observación nos da el color del metileno.

SÁBILA La sábila o también conocida como la planta de aloe vera, es una de las más apreciadas por los beneficios que aporta a la salud, belleza y hogar. Tiene un extenso contenido nutricional que incluye vitamina A, C, E y B1, B2, B3, B6 y B12, ácido fólico, minerales y otros. # 1 2

ACTIVIDADES PARA LA SÁBILA Instalar los equipos a utilizar Limpiar el microscopio

3

Tomar una sección de epidermis de sábila (se puede extraer con el bisturí)

4

En un portaobjeto colocar una gota de azul de metileno

5

6

7

OBSERVACIONES Preferible con una toalla desechable Realizar un corte sagital para la obtención de la muestra.

Tomar la muestra de la sábila, procurar que la epidermis esté completamente extendida para que pueda ver las células. Coloque sobre él un cubreobjetos. Extraiga el líquido sobrenadante con papel toalla. Observar las estructuras con cada opción de aumento que permita el microscopio. Empiece primero con el de menor aumento. Usted mismo enfoque con los lentes del microscopio. Observar al microscopio con la lente 4x, 10x, 40x y 100x

Colocar la muestra en la parte central del porta objeto.

Hacer dibujos para cada observación y calcular el tamaño real de la muestra que está observando.

Es una técnica para poder ver los cambios que se dan al aumentar de lente.

Mientras más aumenta el lente se observa mejor la parte interna de la muestra.

TOMATE El tomate riñón es uno de los cultivos más importantes en invernadero, por ser una hortaliza de consumo masivo, su popularidad aumenta debido a su alta producción y rentabilidad. # 1

ACTIVIDADES PARA EL TOMATE Instalar los equipos a utilizar

2 3

Limpiar el microscopio Cortar la capa fina del tomate con la ayuda de un bisturí

OBSERVACIONES Con una toalla seca Colocarse los guantes para no contaminar la

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4 5 6

8

En un portaobjeto colocar una gota de azul de metileno Tomar la muestra del tomate con el bisturí y colocarla en el portaobjeto Con un capilar mezclar la muestra con el reactivo. Colocar el cubreobjetos

Observar las estructuras con cada opción de aumento que permita el microscopio. Empiece primero con el de menor aumento. Usted mismo enfoque con los lentes del microscopio. Observar al microscopio con la lente 4x, 10x, 40x y 100x.

muestra a cortar No echar demasiado metileno. Colocar la muestra en la parte central del porta objeto. Al colocarlo ver que no queden burbujas de aire dentro de la muestra. Al aumentar los lentes se obtiene una mejor resolución de la muestra colocada.

6. CUADROS DE RESULTADOS 6.1. ESQUEMAS 6.1.1. Elabore esquemas de los distintos tipos de células que observe en el microscopio (fotografía), señalando detalles sobre la muestra. LUGOL Cebolla

Tomate

sabila

Pared celular Cromoplasto

Vacuola

AZUL DE METILENO Cebolla

Citoplasma

Tomate

Cromoplastol

Sabila

Vacuola

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD MUESTRA CEBOLLA LUGOL

TOMATE

SABILA

CEBOLLA AZUL DE METILENO

TOMATE

SABILA

DETALLES En cada tejido podemos observar a varias especies de celdas, las cuales se encuentran organizadas por eslabones o cuadros complementarios, cada una es de tipo alargada con el núcleo en forma de un punto oscuro en el centro, lo más diferencial fue el citoplasma de cada célula, pues éste es de gran tamaño en comparación al núcleo, Las células presentes en el tejido tienen una forma semejante a pequeñas pelotas, pues es redonda, su coloración es rojiza en la mayor parte y en ciertos lugares es rosada, se puede observar que sus células son de menor tamaño que las de la cebolla, también posee pared celular, la cual le da mayor rigidez y consistencia. El tejido de la sábila va acompañado de fragmento de la pared celular que s e sitúan junto al cloroplasto de la célula La tinción de la muestra cambio azul, y se observó las mismas estructuras que cuando se agregó el lugol. Pero la vacuola se logra apreciar mejor. Aquí es mucho más apreciable la presencia de la vacuola. También se puede observar el citoplasma, que rodea a toda la célula. Se pudo tener una vista impresionante de las células, estas se encontraban bien estructuradas también se logró observar la vacuola, ya que este vegetal están compuesto en su mayoría por agua.

6.2. CUESTIONARIO 6.2.1. Investigue y explique cómo ocurre una tinción La mayoría de los tejidos, sobre todo los de los animales, son incoloros y por ello necesitamos teñirlos para observar sus características morfológicas con el microscopio óptico. Ello se consigue con el uso los colorantes, sustancias coloreadas que son capaces de unirse de manera más o menos específica a estructuras del tejido aportándoles color. Se utilizan normalmente para teñir a las células y componentes tisulares que van a ser observados con el microscopio óptico y por ello se realizan habitualmente sobre secciones de tejido.[ CITATION Atl70 \l 12298 ] Químicamente, el colorante está constituido de un componente cromóforo y un auxócromo. El cromóforo es todo grupo aislado, covalente e insaturado, que tiene una

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD absorción característica en la región ultravioleta o visible; dicho de otra forma, es la capacidad que tiene la molécula para que sus electrones absorban energía o luz visible, se exciten y emitan diversos colores de acuerdo con la longitud de emitida como resultado del cambio en el nivel energético. Los auxócromos son grupos funcionales o radicales que constituyen una molécula y poseen carga parcial positiva; tienen la función de intensifi car la formación de color mediante la acción de grupos de átomos no saturados; su función es desplazar a los cromóforos hacia longitudes de ondas largas para aumentar la intensidad. [ CITATION Lui14 \l 10250 ] 6.2.2. Señale en donde actúa cada reactivo y el motivo de usarlos 6.2.3. REACTIVO COLOR TIÑE USO El azul de metileno, cuyo nombre científico es cloruro de metiltionina, es un colorante orgánico que se usa Azul de Metileno. Azul. Conectivo. para tratar una enfermedad llamada metahemoglobinemia. Cromosomas y depósitos de almidón y Sirve para identificar polisacáridos glucógeno. Lugol. Amarillo. como los almidones, glucógeno y Bacterias ciertas dextrinas. Gram. Protozoos. 6.2.4. Elabore un cuadro comparativo de las distintas especies, sus células observadas relacionándolas con su forma, los organelos más prominentes y la función que realizan en la planta. ESPECIE

Cebolla (Allium cepa)

CÉLULA

ORGANELOS

 Membrana celular.  Citoplasma.

FUNCIÓN La membrana celular es una barrera física y su función es que separa el medio celular interno del externo. Una de las funciones de la vacuola es la desintegración de macromoléculas y el reciclaje de sus componentes

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 Vacuola.  Citoplasma

Sábila (Aloe vera)

Tomate (Solanum lycopersicu m)

dentro de la célula. La principal función del citoplasma es contener los orgánulos celulares y permitir su movimiento.

El Cloroplasto tiene una función crítica en los organismos vegetales: es el lugar donde ocurren los procesos fotosintéticos, donde  Cloroplasto.  Pared celular. la luz solar es transformada en carbohidratos, teniendo como producto secundario el oxígeno. La pared celular tiene una función mecánica. Es la responsable de la forma y tamaño a las células de las plantas y a su vez la estructura que las protege y las mantiene a modo de exoesqueleto.  Parénquima. [ CITATION MEd03 \l 12298 ] El Parénquima está implicado en una gran variedad de funciones como la fotosíntesis, el almacenamiento, la elaboración de sustancias orgánicas y la regeneración de tejidos.[ CITATION DEE03 \l 12298 ]

Los cromoplastos son plásticos especializados en la síntesis y el almacenamiento de

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD diferentes pigmentos de la  Cromoplasto. clorofila, sirven para darle coloración a ciertos frutos, verduras, plantas y algas [ CITATION Jar13 \l 12298 ]

6.2.5. Describ áles son los principales organelos de una célula vegetal  Pared celular: esta es rígida rodea la membrana plasmática de casi todos los procariontes. Las sustancias disueltas atraviesan con facilidad esta capa permeable de camino hacia la membrana plasmática procedente a ella. La pared celular de la mayoría de las bacterias consta de peptidoglicano, el cual es un polímero que contiene péptidos entre cruzados y polisacáridos. La pared de la mayoria de las arqueas consta de proteínas.  Laminilla media (Lm): formada por sustancias pécticas principalmente pectato de calcio y magnesio.  VACUOLA/S (representan desde el 0 al 95% del volumen celular) Sustancias ergásticas (inclusiones de material relativamente puro contenidas frecuentemente en la vacuola)  CITOPLASMA Es una sustancia viscosa, más o menos transparente que rodea al núcleo; a pesar del alto porcentaje de agua su composición es compleja. Suele denominarse citosol a la matriz en que están suspendidos los orgánulos citoplasmáticos. Si bien, la mayoría de los procesos vitales se producen en el protoplasto, hoy se conoce que ocurren procesos químicos en la pared celular y la vacuola (antes consideradas partes muertas).  Núcleo contiene la mayor parte de la información genética de la célula. En este compartimiento se realiza la síntesis y ensamblaje de las subunidades ribosomales. El nucléolo reúne partes de uno o más cromosomas donde se encuentran los genes que codifican el ARN ribosomal (rARN), tanto de la subunidad pequeña como grande de los ribosomas. [ CITATION Lil07 \l 10250 ]  Membrana plasmática: Formada por una doble capa fosfolipídica con los extremos hidrófilos (cabezas) hacia el exterior y los extremos hidrófobos (colas) hacia el interior, constituyendo el “fluido” donde están suspendidas las proteínas (P) formando un “mosaico”. Este conjunto forma la Unidad de Membrana. En la plasmalema que limita al citoplasma la unidad de membrana presenta la cara interna en contacto con el citoplasma lisa y la cara externa en contacto con la pared primaria con rugosidades producidas por la presencia de glucolípidos y glucoproteínas. La plasmalema permite el pasaje de iones, agua y

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD otras sustancias ejerciendo su función selectiva, es decir, la plasmalema es semipermeable.  Aparato de Golgi; las proteínas llegan a su vesícula procedente del retículo endoplasmatico están unidas por grupos fosfato 0 azucares, y escinden ciertas cadenas de polipeptidos.  Peroxisomas: contienen enzimas que digieren ácidos grasos y aminoácidos. Estas vesículas se forman y se dividen por si solas, tienen diversas funciones, como inactivar el peróxido de hidrogeno, un subproducto tóxico de la descomposición de ácidos grasos. Las enzimas de los paroxismas transforman el peróxido de hidrogeno en agua y oxígeno, 0 10 usan en reacciones para descomponer alcohol y otras toxinas.  Ribosomas (polisomas o poliribosomas) Orgánulos esferoidales formados por dos subunidades (sub1 y sub2), constituídos por ácido ribonucleico ribosómico o ribosomal (ARNr) y moléculas de proteínas. Se encuentran adheridos al RE y libres en el citoplasma formando cadenas denominadas polisomas o poliribosomas. Su función es la síntesis de proteínas. Los cloroplastos y las mitocondrias poseen ribosomas de menor tamaño que los del citoplasma.  Mitocondrias (condrioma) Pequeñas esferas, barritas o filamentos, con forma y dimensiones variables. Presentan dos membranas rodeando la matríz (ma). La membrana externa (m ext) es lisa. La membrana interna (m int) con invaginaciones que forman las crestas (cr) y túbulos (tub) mitocondriales. Al microscopio electrónico se observa una estructura interna elaborada. Contienen ácido desoxiribonucleico (ADN) que forma el genoma mitocondrial, y ribosomas (rib). Las enzimas contenidas catalizan procesos de intercambio de energía, participando en la respiración. 6.2.6. Describe que son los plastidios, como se clasifican y cuál es su función. ¿Qué son?  Son orgánulos propios de las células vegetales, limitados por una doble membrana que rodea la matriz o estroma. En la matríz poseen ADN (genoma del cloroplasto) y ribosomas, por lo que poseen al igual que las mitocondrias la capacidad de auto reproducirse y sintetizar parte de sus proteínas, el resto de las proteínas las importa del citoplasma. Los plastidios derivan de los plastidios iniciales que se encuentran en el huevo o cigota, varían en su forma, estructura, dimensiones, color y funciones de acuerdo a su contenido. Clasificación Cloroplasto: La función del cloroplasto es producir alimentos mediante el proceso fotosintético, que consiste en la combinación de moléculas de agua y anhídrido carbónico en presencia del pigmento clorofila, utilizando la energía de la luz solar para elaborar hidratos de carbono (azúcares), con la liberación de oxígeno, agua y energía. Los azúcares simples (monosacáridos) producidos son transformados en una forma más ...