Apuntes, temario Hematología PDF

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INTRODUCCIÓN En un laboratorio necesitamos tener seguridad. Se trabaja con muestras humanas, 99% contaminadas. Todo lo que hay en un laboratorio es contaminante. Hay una serie de normas mínimas para evitarlo: saber con lo que trabajamos, es infeccioso siempre. Se ha de mantener cerrado, no ser un pasillo donde la gente entra y sale. El problema es que la gente se contamina y entra contaminación en un laboratorio. Mantener la seguridad propia y la del material. Ha de tener un orden. Prohibido comer, beber. Todo aquello que pueda entrar o salir del laboratorio es material contaminante. Son necesarios los elementos de protección, todos son pocos.

Manejo de desechos: Tener cuidado con lo que se trabaja y con los residuos generados.

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Organización

Cada hospital en general tiene una organización diferente. El servicio de hematología suele estar dirigido por médicos y se divide en clínica, banco de sangre, siendo este ultimo muy importante y laboratorio. Es el sitio donde todos los médicos piden determinaciones especiales. Los laboratorios funcionan con un sistema que es el SIL. Formamos parte de una cadena, que se inicia cuando hay una solicitud, y tenemos que decir cuando una solicitud es adecuada o no, también decidir si tiene que ir acompañado de otra prueba. Después se toma la muestra, donde la enfermería es la responsable, se necesitan distintos tubos, diferentes formas de pinchar. La fase termina con la clasificación de las muestras, se han de explotar esas muestras, se intentara utilizar para muchas cosas. Todo eso ha de estar coordinado, es una cadena. Hay una fase analítica y otra post analítica donde salen los resultados, que se cuelgan en red y el médico simplemente lo ve y sabe si está entre los rangos o no. Se ha de subir la analítica y se ha de explicar si ha habido algún problema y los rasgos de las personas. Esto es porque hay gran cantidad de errores, sobretodo en la primera fase, el cómo se extrae la muestra, donde se guarda, etc.

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Hoja de petición

Cuando se pide algo, se pincha, pero no sabemos la edad. Es necesario saber los factores que le acompañan; si está embarazada etc, esa parte n ola vemos. Se tiene que exigir formar parte del equipo que lleva al sujeto.

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Contacto con enfermería:

Existen códigos sobre los que se han de seleccionar.

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EDTA o sal disodica, potásica o tripotasica del acido etilendiaminoetraacetico: actúa un efecto quelante sobre el calcio. CITRATO TRISODICO: actúa impidiendo que el calcio ionice. Se utiliza mucho HEPARINA: es un anticoagulante fisiológico que actúa impidiendo que la protrombina se transforme a trombina.Tb se utiliza mucho GELOSA: sin aditivos. Se usan para determinación en el suero, no lleva anticoagulante. El resto de tubos son pruebas especiales.

Todos los laboratorios de los hospitales funcionan igual. Se diferencian las fases. Con el problema que es en la primera donde encontramos los errores. El primer error que siempre tenemos es la hoja de petición, que tenemos que revisar. Normalmente esta hoja no llega completa o está mal. Por ejemplo, factores fisiológicos modifican la analítica del laboratorio, muchas veces esta errónea o no llega adecuadamente. Cada muestra ha de ir con la hoja. Hay una serie de factores asociados a la recogida u obtención de la muestra, incluso transporte. Vienen en condiciones más o menos estándar. Suponiendo que todo llegue bien, llega al sitio y se clasifica las muestras. Mandando las partes a los distintos lugares. Esta bastante estandarizado. Este es el final de la fase preanalitica. No depende de nosotros pero tenemos que supervisar.

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Fase analítica

Es la fase analítica en la que los farmacéuticos intervienen.Estará asociada a un autoanalizador, pero dependen de una calibración. Comparan con un patrón establecido todas las muestras y esa calibración la tenemos que hacer nosotros, haciéndolo con buenos patrones y mediante curvas a los que se adapten los autoanalizadores. La calibración se programa, en función de la frecuencia y volumen de trabajo, suelen ser semanales. Es una parte de rutina que suele hacer un auxiliar pero tenemos que tenerla. Frente cualquier alteración que se observe repetida, cualquier día, puede indicar que se ha descalibrado y se debe h. Cada mes hay un técnico que viene a revisar la parte técnica del aparato, como los láseres, bomba de aspiración…. Hay que hablar con él y estar de acuerdo y firmar. Los controles de calidad analíticos se hacen de dos formas: interno (utilizando calibradores o conservar una serie de muestras estándares, que han de dar mismo parámetro). Así lo que yo firmo, me lo creo. Todos participamos en centros internacionales de control externo: mandan una muestra de fuera y se manda a analizar. Ellos los reciben y comparan. Es necesario para ver la reproducibilidad. Debe monitorizar la precisión y exactitud de las determinaciones y avisar en tiempo real de problemas y desviaciones sobre los objetivos marcados.

Hematimetría Los métodos de recuento electrónico se basan en la medición de distintas propiedades. Salvo que el aparato nos de alarma no la revisamos. Deberíamos confirmarlas con microscopia, porque cada vez se utiliza menos y ya no se está acostumbrado y porque te meten una dinámica de trabajo donde es una

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rutina. El autoanalizador transmite corriente eléctrica, de forma que la resistencia que muestra, es lo que utiliza para dar los valores. La citometria de flujo se utiliza en hematología , nos habla de alteraciones asociados a ciclos como diploidia, triploidia…(desarrollo de leucemias y canceres), cariogenesis (que permite discriminar distintas poblaciones celulares normales y patológicas). Además, también da parámetros de superficie y parámetros extracelulares. Permite hacer estudios multiparametricos, muchos antígenos de superficie.

Citomorfologia Cada día se utiliza menos, porque no somos capaces de discriminar. Cuando se trabaja en poblaciones escasas es difícil. Problema del array es el coste. Con lo visto caracterizamos las células. Pero queda plasma y suero? Técnicas de hemostasia y trombosis: Se añaden factores exógenos y ver en que punto de la cascada está, como de rápido o lento se produce

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Fase post analítica

Ya tenemos los datos. El médico mirara con que corresponde. Se tiene que hablar con el médico para “entender” los resultados. La es la secuencia de acontecimientos que transcurren desde que el SIL dispone del resultado hasta que el informe es visto por el médico.

SANGRE A diferencia de los tejidos conectivos, es uno líquido, y esto condiciona la toma de muestras. El enfermo se reparte, y este reparto difiere. Nos va a llegar un líquido, y el primer parámetro a valorar es la volemia. Además, hay una serie de variaciones más o menos fisiológicas. Ante patología, se tiene que plantear el porqué. Hay que ver si 5L son normales, o si es en una embarazada no lo es. La viscosidad sanguínea depende mucho de cantidad de proteínas en líquido. Se habla del tiempo que tarda el grupo de células en caer (velocidad de sedimentación). Se ve lo que tardan los hematíes en caer, pero caen de una característica especial, empiezan a pegarse, y formando las pilas van quedándose y quedaran apelotonados en un sedimento. Da una información poco precisa La curva que forma el sedimento a veces no es la adecuada y está mal… Tb puede afectar la hemolisis, muchas veces llegan problemas, antes de hablar de normalidad o patología.

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La velocidad de sedimentación cuando hay alguna inflamación (hay mas proteínas, mas viscoso, tarda más en sedimentar). Preguntar si hay algún proceso agudo. Algunos médicos lo utilizan para discriminar infarto de angina.

La sangre tiene una parte liquida: plasma. Y unas células. El liquido que queda que queda cuando no se activa la coagulación, que tiene muchos componentes inorgánicos y orgánicos (proteínas) y se hace mucho con electroforesis. Hay una parte de plasma, se centrifuga y nos separa la parte forme de la no forme. Si se centrifuga a menores revoluciones, la plaqueta no precipitara. Plasma con plaquetas tiene capacidad de crecimiento celular que favorece cicatrización, reparación. Se utiliza en microinfiltraciones en deportistas y funcionaria muy bien como crema. No se puede medir coagulación en suero porque se ha activado la coagulación, es la parte que tiene todo. Cuando se activa coagulación queda el suero. Suero es parte de la sangre que contiene todo menos células y factores d coagulación activados. [Examen].

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Elementos formes

Hematíes: variabilidad de la cifra es muy pequeña. Fisiología muy importante. Las cifras se han de adaptar a situación fisiológica. La stem cell es la célula troncal (no es exactamente madre) es la que soñamos en usar. Somos capaces de manejar estadios mas diferenciados. Stem se autorregenera y se diferencia a cualquier otra célula.

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Hematopoyesis:

Todas estas células derivan de una que se diferencia y madura, adquiriendo distintas características. Es un mecanismo capaz de mantener niveles habituales, producir aquellas células que hacen falta, es un mecanismo de conservación muy regulado. Ocurre en función del estadio d diferenciación en diferentes sitios. En medula ósea, es sobre todo en huesos planos, esternón, y cresta. Esta medula, es importante porque favorece un entorno donde células hematopoyéticas pueden crecer. El concepto de nicho celular favorece ese crecimiento y desarrollo. En este nicho hay células grasas, superficie de contacto, que estimula receptores, de forma que transmiten la señal adecuada, condicionando la respuesta proliferativa y la de seguridad (que nos alga una célula inmadura a sangre). La segunda señal de proliferación viene dada por los factores de crecimiento, fundamentalmente glucoproteinas que estimulan la célula. La fase inmadura se llaman factores estimuladores de colonias. Junto a estos factores. Las más maduras son las interleuquinas, que permiten la proliferación, junto con la señal del nicho, permiten que maduren… Hematología (Métodos Biológicos)Página 4

Funcionan a través de receptores celulares, que transmiten. Un factor puede hacer dos cosas: evitar apoptosis o inducir su proliferación. Hay células que tienen un factor que actúa sobre ella y puede actuar sobre genes y proliferar o bien inhibir su apoptosis. E definitiva, las células inmaduras se autosintetizan factores para seguir la proliferación La expresión de los factores cambia a lo largo de la diferenciación. El mismo factor puede afectar a diferentes células…*

Diferencia entre suero y plasma: suero esta coagulada. Plasma no. Para hacer pruebas hay que utilizar plasma.

En cuanto a la hematopoyesis, es importante porque es donde se desarrolla la seria blanca y roja con características: gran actividad celular que implica un gasto energético para el organismo increíble. Sistema jerarquizado, una célula precede a la otra y esta a su vez es progenitor de la siguiente: permite tabular y centrar. La localización en el adulto es en la medula ósea. Toda células exceptuando linfoides, y cuando salen, salen formadas y plenamente funcionales. Esto es así pk medula ósea tiene estroma, donde hay células grasas, fibroblastos, y junto a esto unos factores solubles necesarios para que haya maduración , proliferación y diferenciación, una vez diferenciadas son maduras, salen a través de sinusoides para pasar al torrente sanguíneo. El microambiente es muy importante porque hay unas células claves; macrófagos, adipocitos… cada una con una particularidad y receptores, que son correceptores para las células inmaduras, y esto permitirá dar una primera activación a la inmadura. Estas células producen factores de crecimiento y es la segunda señal para las células inmaduras. Además, van a favorecer los nichos, sitios específicos de la medula donde se agrupan los estipes celulares: interacción de células similares. Las tres señales son necesarias para diferenciación. Estas células serán programadas para morirse a no ser que se activen. Si se depriva cualquier de estas habrá apoptosis para que no haya problemas. Favorece en primer lugar la proliferación, supervivencia y la maduración, porque estos factores de crecimiento están producidas por células del entorno… Las mas inmaduras, reciben unos factores que prácticamente están condicionados para la célula; citoquinas estimulan o no estos factores. Las células más tardías, responden a factores presentes en células maduras y sangre periférica. Existe una jerarquía a la hora de producir factores. ¿? CFU es un concepto se da cuando se veía que la medula del ratón viene creciendo en forma de colonias, y lo hacen todas las células inmaduras. Importancia del nicho para el desarrollo. Ocurrió que, conforme habían,. Cuanto más madura tiene menor capacidad para formar estas colonias. El apellido hace referencia y sirve para caracterizar estas células. Solamente en algunos casos van a implicar una capacidad para hablar de cuál es el pronóstico del enfermo. En la mayoría de los casos son células muy indiferenciadas y no sirven. Las características de estos factores es que no son específicos: pueden actuar sobre diferentes células, que a su vez pueden estar producidas por diferentes, no tienen pk tener una célula diana específica, sino actuar sobre células intermedias que as u vez producen otros factores, y que actúan normalmente de forma simétrica. Es necesario que varios factores actúen sobre una célula para que esta lo capte. Todos estos actúan a través de receptores Hematología (Métodos Biológicos)Página 5

Estos van a ser los responsables de segundas señales y segundos mensajeros. Mismo receptor en diferente estadio celular regula distintas actividades. Estos factores son una realidad, un poco en mantilla.

Como se clasifican las células?

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Troncales

Son las más inespecíficas y no las vemos, no las podemos identificar. Aparecen en fotografías, pero es indiferenciada que representan muy pocas células de medula ósea. Y solo se puede identificar mediante marcadores de su superficie. La única forma real de trabajar y saber esas células es analizando con marcadores? Realmente estas células no se utilizan en clínica.

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Progenitoras

Son las siguientes y se diferencian de las troncales en que éstas últimas son capaces de autorregenerarse. Stem cell era capaz de generar nuevas stem cell y de diferenciarse. Las progenitoras pierden capacidad de autorregeneración, solo pueden proliferar. Sigue siendo muy compleja de ver, que morfológicamente es muy complicada, tendría que haber mucha cantidad. A diferencia de stem cell k puede dar todas las células, estas solo podrán dar células de dos estirpes (más o menos) necesitando marcadores selectivos; la stem cell da cualquier cosa y cuando se analiza y solo hay marcadores de inmadurez, es una celula muy grande y no expresa ninguna serie. La célula progenitora expresa marcadoras de serie: La stem no expresa ninguna porque da todas.?

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Blastos

Primeras células que se ven en microscopio. Son células aun indiferenciadas, pero ya completamente dirigida a fabricar una o dos estirpes, es mucho mas restrictiva. En situación normal se puede encontrar blasto en sangre periférica, no indica patología. En realidad un blasto no existe, es un intermedio, y la fotografía no es real, es un momento congelado. Se habla de blasto porque funcionalmente no tiene las características plenas y n ose puede hablar.

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Células terminales: son las que encontramos en sangre periférica.

Marcadores de madurez, de inmadurez. El cluster de diferenciación los CD, son grupos de cluster que reconocer una sola molécula. Están expresadas en células y se pierden ..? Eso permite identificar el estadio madurativo de una célula. Una stem, expresa 34 que se pierde conforme madura la célula. A medida que pierde, adquiere uno característico y que no aparece cuando es indiferenciada. Las moléculas de superficie facilitan conocer las células con las que se trabaja. Tb permite tipificar la patología.

Hay dos formas de obtener medula ósea: aspirar (cogen aguja, pinchan cresta iliaca y sacan liquido)

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Las características del líquido es grumoso y permite hacer extensiones. Ahí podremos ver como es la medula, si es fibrosa, dura, si cuesta aspirarla. Si tiene mucha fibrosis, hay gran producción celular? La aparición de grumos se asocia a inmadurez, hay gran actividad de células formadoras. Celularidad: cuantas, tipo. Estas células se utilizan para definir estadios. No existe una medula pura, encontramos proporciones, normalmente las clasificaciones son en función de la cantidad de madurez,..

Tb se puede mediante biopsia: la diferencia es que es mayor la aguja, la ventaja nos da una preparación fijada y sobre esta permite definir, ver los nichos. Ventajas sobre aspirado: tenemos toda estructura medular en una fotografía. Desventaja: normalmente no lo hacemos nosotros y depende de los demás.

Existe una serie de líneas de diferenciación: serie blanca (granulocitos y agranulocitos), roja, plaquetas. Serie roja hay eritropoyesis que depende de eritropoyetina, aunque no solo, las citoquinas son coestimuladoras. Existen unos métodos clásicos, tenemos colonias, ponemos eritropoyetina y se ve el crecimiento.

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Serie eritropoyética

La primeras células son los proeritroblasto: es una celula grande, tiene nucléolos, presenta citoplasma pequeño con particularidad que es la aparición de semilunas. La siguiente generación sí existe; eritroblasto basófilo, es una célula madura, con lo que hay mayor cantidad. Morfológicamente nos e ve pero se identifica por citometría. En leucemias se va a poder identificar? Morfológicamente es menor, con un núcleo, la mayor madurez hace que tenga una menor actividad o menores marcadores de inmadurez morfológica. Cada vez disminuye el tamaño. Es una célula que está ahí, pero con utilidad clínica muy pequeña. Cuando madura un poco más, ya la podemos ver: eritroblasto policromática. Permite trabajar con ella. Característica: empieza a sintetizar Hb, mas especifica, más madura. La ultima célula que tiene actividad mitótica proliferativa. Después ya aparece el eritroblasto?. Pierde el núcleo y se convierte en reticulocitos, es el precursor de la eritropoyetina. Es totalmente funcional. Habrá por tanto en sangre periférica. Es una célula diana terapéutica, ya la podemos modular.

El objetivo de todo esto, es tener entorno 5 millones de hematíes, con vida media de 120 días y que son claves para transportar oxigeno. Estas células son funcionalmente activas, en situaciones patológicas se ha de mirar si es apoptótica o no, si ha perdido núcleo. ¿? A la hora de determinar glóbulos rojos, es importante el hematocrito, su porcentaje, importante en plasma, concentración de hb (por espectrofotometría), una serie de índices que nos hablan del tamaño y de la capacidad de transporte que tienen.

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Cuando encontramos un elemento inmaduro o un mayor contenido sospechamos eritroleucemia, enfermedad con mal pronóstico, porque hay inmadurez en medula importante y difícil de recuperar y regenerar. Suele responder muy mal. En prácticamente todas las enfermedades de inmadurez medular hay deficiencia de células maduras?

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Plaquetas

La trombopoyesis depende fundamentalmente de trombopoyetina aunque de nuevo hay cofactores que son las citoquinas. A diferencia de la eritropoyesis hay una células muy inmaduras: Megacarioblasto, que no se ve, rápidamente se diferencia a promegacariocito que ya se encuentra, esta dará lugar al megacariocito maduro.

El megacarioblasto es ...