Biofisica Laboratorio Final 123 PDF

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INFORME DE LABORATORIO QUE AFECTAN LA MEMBRANA 1 Oscar Eduardo Gracia 2Marcela Alexandra Villamizar 3Lisseth Catalina Rubio 1611278 Universidad Francisco Paula Santander, Colombia (Junio 22 De 2017) 1 2 3 RESUMEN En esta de laboratorio se la absorbancia al someter diversos cilindros de remolacha (Be...

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INFORME DE LABORATORIO “FACTORES QUE AFECTAN LA MEMBRANA CELULAR”

1

Oscar Eduardo Cerón Gracia - 1611270; 2Marcela Alexandra Villamizar - 161159; 3Lisseth Catalina Rubio – 1611278

Universidad Francisco Paula Santander, Ingeniería Biotecnológica. Cúcuta, Colombia (Junio 22 De 2017) 1

[email protected]. ; 2 [email protected]. ; 3 [email protected].

RESUMEN En esta práctica de laboratorio se determinó la absorbancia al someter diversos cilindros de remolacha (Beta vulgaris L.) a distintas condiciones tales como agua destilada con temperaturas de 6, 50 y 70°c, propanol, acetona, solución acida (pH), y detergente para platos (lavaplatos), con el fin de estudiar los efectos de varios tratamientos químicos y físicos de las membranas celulares en el cual podemos aumentar su permeabilidad y así permitir la salida del pigmentos de las células. Después de este proceso medimos la absorbancia en el espectrofotómetro para así cuantificar el aumento de permeabilidad en el cual los resultados obtenidos nos permiten estimar un aumento en la permeabilidad de las membranas tras someterlas a dichos tratamientos físicos y químicos.

Palabras claves: pigmentos, permeabilidad, Beta vulgaris, espectrofotómetro, absorbancia.

1. INTRODUCCIÓN La membrana celular está formada por una capa doble de fosfolípidos, proteínas y carbohidratos. Cada fosfolípido está compuesto por glicerol, que le permiten el paso de sustancias al interior de él o exterior debido a su permeabilidad; esta permeabilidad selectiva permite que tipo de sustancias que entran y salen de la célula sean necesarias para el flujo de agua o de la salida de desechos.

Las membranas confieren a las células su individualidad, al separarlas del medio que las rodea y regular la entrada y salida de solutos (permeabilidad selectiva) las células eucariotas contienen además membranas internas que delimitan organoides, tales como mitocondrias, cloroplastos, lisosomas, etc. Para que las membranas cumplan sus funciones biológicas, deben encontrarse en estado

fluido, lo que implica un constante movimiento de las moléculas que las constituyen. Dicha fluidez no solo depende de factores ambientales como la temperatura, sino también de su composición química., ¿Qué factor

químico del presentado posteriormente afecto más a la membrana celular? 2. EQUIPOS 50ml propanol, 50ml. Acetona, Solución acida, Solución detergente liquido (lavaplatos), Agua destilada a temperatura ambiente, Agua destilada a 70º C, Agua Destilada a 50º C, Agua destilada a 6º C, 1 Beaker de 250ml, 8 Tubos de ensayo de 16 x 150, Sacabocados de 1,0cm de diámetro, Fotómetro con capacidad de leer 479nm, Regla, Bisturí, Papel absorbente, 10ml detergente liquido (lavaplatos), 8 Cilindros de Remolacha sin corteza de 1cm de diámetro y 1cm de longitud 3. MÉTODOS Preparación de los cilindros de remolacha para el cronograma: se cortan 8 cilindros de remolacha en los cuales se le adiciona agua destilada con temperaturas de 6, 50 y 70°c, propanol, acetona, solución acida (pH), y detergente para platos (lavaplatos), pasado este procedimiento se le adicionan 5 ml de agua destilada por 10 minutos dependiendo de los frentes del cambio de color y pimento se agregan en pequeños tubos con una absorbancia a 479 nanómetros utilizando como blanco agua destilada. Preparación y desarrollo de la práctica: se realizan los procedimientos requeridos de manera ordenada, con el fin de obtener resultados de acuerdo a las condiciones puestas para el experimento tales como la longitud de onda y la absorbancia.

4. PROCEDIMIENTOS En esta sección se analizara de los efectos de los tratamientos físicos (La temperatura alta y baja) y tratamiento químico (tratamiento con solventes orgánicos, detergentes y pH). A. Permeabilidad de membrana: En esta sección se analizara de los efectos de los tratamientos físicos (La temperatura alta, la congelación) y tratamiento química. 1. Cortamos con el sacabocados 8 cilindros de remolacha (sin corteza) de 1 centímetro de longitud y 1 centímetro de diámetro, Sumergir en agua destilada durante 10-15 minutos. Secar ligeramente. 2. Marcar los tubos de ensayo 16 x 150. Introducir en cada uno de ellos un (1) cilindro de remolacha. 3. Al tubo marcado como No.1 le adicionamos 5ml de agua destilada a temperatura ambiente. Dejamos el tratamiento durante 10 minutos 4. Al tubo No.2 adicionarle 5ml de agua destilada a 70°C. Realizar el tratamiento por 10 minutos 5. Al tubo No.3 adicionarle 5ml de agua destilada a 50°C, realizar el tratamiento por 10 minutos 6. Al tubo No.4 adicionarle 5ml de agua destilada a 6°C (fría) e introducir al congelador, realizar el tratamiento por 10minutos 7. Al tubo No.5 adicionarle 5 ml de propanol realizar el tratamiento por 10 minutos 8. Al Tubo No.6 adicionarle 5ml de acetona y realizar el tratamiento durante 10 minutos

9. Al Tubo No.7 adicionarle 5ml de una solución acida y realizar el tratamiento durante 10 minutos

5. ACTIVIDADES DE ANALISIS DE RESULTADOS.

10. Al Tubo No.8 adicionarle 5ml de una solución de detergente y realizar el tratamiento durante 10 minutos

A. Permeabilidad de membrana: 1. Consignar los datos de las absorbancias obtenidas por LOS GRUPOS en general:

11. Terminado el tiempo de tratamiento retirar el solvente de todos los tubos y dejar solo el cilindro de remolacha.

6. GRAFICA OBTENIDA TRAS LOS DATOS EVALUADOS

12. Retirado el solvente de cada tubo; agregar 5ml de agua destilada a temperatura ambiente a cada uno de los tubos y dejar en reposo por 10 minutos. 13. Finalizado el tiempo de reposo, mediremos la absorbancia de la solución a 479 nanómetros utilizando como blanco agua destilada.

GRUPO DE TRABAJO N°3 N°1 AGUA DESTILADA N°2 TEMPERATURA 70°C N°3 TEMPERATURA 50°C N°4 TEMPERATURA 6°C N°5 PROPANOL N°6 ACETONA N°7 Ph N°8 DETERGENTE

1

3

4

5

0,335 0,166

0,032

0,190

0,167

0,651 1,328

0,659

1,406

3,716

0,192 0,151

0,035

0,301

0.286

0,226 0,150

0,164

0,095

0.266

3,570 2,744 1,577 1,364

2

2,593 2,094 2,597 3,665 4,044 3,430 1,969 3,509 2,929 1,522 2,721 2,265 2,163 1,189 1,818 2,106

DATOS GRUPO N°3

PROMEDIO MEDIA (X) ABSORBANCIA

0,032

0,178

0,659

1,152

0,035

0,195

0,174

0,139

2,094

2,904

3,430

3,139

1,583 1,189

2,227 1,728

GRUPO DE TRABAJO N°3 TUBO N° N°1 AGUA DESTILADA N°2 TEMPERATURA 70°C N°3 TEMPERATURA 50°C N°4 TEMPERATURA 6°C N°5 PROPANOL

NUMER O DE DATOS

VALOR MINIMO DE ABSORBANCIA

VALOR MAXIMO DE ABSORBANCIA

PROMEDIO MEDIA (X) ABSORBANCIA

DESVIACION ESTANDAR

COEFICIENTE DE VARIACION

5

0,032

0,190

0,178

0,108

0,252

5

0,651

3,716

1,552

1,261

1,801

5

0,035

0,301

0,170

0,122

-0,091

5

0,095

0,266

0,159

0,085

0,190

5

2,094

3,665

2,904

0,684

0,191

5

1,969

4,044

3,139

0,801

-0,688

5

1,522

2,929

2,203

0,643

-0,060

5

1,189

2,163

1,728

0,437

-0,339

N°6 ACETONA N°7 Ph N°8 DETERGENTE

cantidades mínimas de diferencia a la hora de calcular en la cromatografía

7. ANALISIS Y DISCUSIONES ¿Qué factor químico de los presentados anteriormente afecto más a la membrana celular? Justifique su respuesta R/ Se llega la conclusión que el factor que más afecto a la membrana fue el propanol ya que es un alcohol, y los alcoholes tienden a alterar la fluidez de las membranas, esto quiere decir que afecta directamente proporcional a las proteínas y a los lípidos , la importancia de estas biomoléculas se debe a que gracias a ellas logra mantener el equilibro en el interior y en el exterior de la célula, además este alcohol produjo en la membrana de la remolacha una deshidratación, esto se demuestra en los resultados del experimento, en el cual nos damos cuenta que la absorbancia es aún mayor en los factores químico del propanol.

8. CONCLUSIONES  Con esta práctica se puede saber la importancia que tienen los factores que pueden afectar a la membrana y los componentes que no la afectan, esto nos lleva a que no cualquier sustancia puede entrar en la membrana  Entre todos los caracteres se dice que si el soluto es mayor es que está en una solución hipotónica se pudo observar las diferentes

 Los factores químicos son los principales desnaturalizantes de las membranas celulares no obstante los factores físicos también pueden influir en esta desnaturalización. Estos efectos desnaturalizantes en la membrana celular se dice que pueden ser reversibles siempre y cuando no ocurra una lisis completa.  Los factores físicos o químicos que pueden alterar la membrana son: temperaturas, extremos de pH, acción de disolventes orgánicos, acción de detergentes. 9. REFERENCIAS https://es.slideshare.net/macr091/i-02proteinas-desnaturalizacion-proteinas-delplasma Frumento AS. Biofísica. Tercera Edición. Editorial Mosby/Doyma; 1995. https://es.slideshare.net/LizethSakura/repor te-la-membrana-y-el-transporte-celular Solomon, E: P: L R. Berg y D: W Martin 2007. Biología 12ª edición. Mc Graw Hill. Interamericana. 1238 p....