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UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS ESPE

Departamento de Ciencias de la Vida y la Agricultura Microbiología I INFORME DE LABORATORIO Integrantes: Daniel Corredor

Docente: Dra. ALMA ROSEL KOCH KAISER

NRC: 4332

Fecha: /05/2018

TÍTULO Tinción de esporas bacterianas. Resumen: las esporas son estructuras que permiten a un microorganismo garantizar su supervivencia, aplicando la técnica de tinción correcta con calor y verde de malaquita, se pueden apreciar las esporas de la muestra[ CITATION Min12 \l 12298 ]. Palabras clave: bacilos, tinción de Schaeffer-Fulton, verde malaquita, célula vegetativa, resistencia. INTRODUCCIÓN Antecedentes: las esporas bacterianas son estructuras resistentes que contienen una copia del material genético de la bacteria. Las capsulas creadas (esporas) tendrán como objetivo garantizar la supervivencia o incluso la dispersión de los organismos cuando las condiciones externas sean desfavorable[ CITATION Cat17 \l 12298 ]. Justificación: Al realizar esta práctica se observaron esporas que soportan altas temperaturas. Las esporas, están hechas para soportar condiciones extremas se encuentran inactivas por periodos prolongado, para que llegado el momento de germinación se desarrolle un nuevo organismo. Objetivos General: Lograr visualizar al microscopio esporas bacterianas en una placa con Bacillus subtilis, aplicando la tinción de Schaeffer-Fulton. Específicos 



Aprender la técnica básica de tinción de esporas bacterianas con el reactivo de verde malaquita. Reconocer la forma de las esporas del microorganismo Bacillus subtilis.

Hipótesis al observar al microscopio la placa ya teñida con verde de malaquita observaremos estructuras verdes dentro del bacilo únicamente. Marco Teórico

La estructura de varias membranas y un núcleo deshidratado confieren a la espora resistencia muchos colorantes. La cantidad de glicoproteínas la hace resistente al calor y a rayos UV,el verde malaquita con calor continuo debilita las membranas de la espora y logra teñirlas[ CITATION Rut18 \l 12298 ]. Las bacterias que producen esporas suelen pertenecer a los géneros sporolactobacillus, clostridium y bacillus[ CITATION Cat17 \l 12298 ]. Materiales y métodos Se realizó la preparación de la placa rotulada de Bacillus subtilis, un bacilo que si produce esporas, se prendió el mechero y con una malla de asbesto y un trípode se preparó la estructura para la tinción. Se recortó un trozo de papel toalla del tamaño de la placa, se lo puso sobre la superficie con muestra sin arrugarlo, se sujetó la placa con una pinza, y se la dejo reposar en la malla de asbesto sin llama alta[ CITATION Lui14 \l 12298 ]. Inmediatamente se vertieron gotas de verde malaquita cubriendo toda la placa, añadiendo gotas cada vez que la placa se secaba, se observó la emisión de vapores , se realizó este proceso durante 5 minutos con calor continuo, el papel se tornó rojo cromado, esto indica que la tinción de las esporas está completa, se dejó enfriar y se lavó con agua[ CITATION SAV14 \l 12298 ]. Se colocó safranina como colorante de contraste durante un minuto, se lavó la placa y se la observo a lente objetivo 100x. Resultados Se observaron esporas que son estructuras con forma ovalada teñidas de color verde, de menor tamaño que los bacilos o células vegetativas coloreados de rojo, la esporas que se observaron estaban presentes tanto dentro como fuera del bacilo, como indica la figura 1 la cantidad de esporas libres en el campo se asemejan a puntos verdes dispersos.

Células vegetativas Esporas

Figura 1 tinción de Schaeffer-Fulton en muestra de Bacillus subtilis lente objetivo 100x.

Discusión A pesar de que la espora es de menor tamaño en comparación con su célula vegetativa, en la figura 1 se ven esporas ovoides, el gran número de esporas en la placa se debe a que se completó el ciclo de esporulación y se liberó las esporas, las bacterias tiene una espora central, lo que las hincha cuando la espora está dentro de la célula vegetativa[ CITATION Lei10 \l 12298 ]. Comparando con resultados de tinción publicados en diferentes medios, se puede comprobar que los resultaos de la tinción son los mismos, pero estos salen sin artefactos en el campo óptico[ CITATION SAV14 \l 12298 ]. Conclusiones Se Logró visualizar esporas ovoides de Bacillus subtilis, aplicando la tinción de Schaeffer-Fulton. En esta técnica el verde de malaquita requiere calor para penetrar en la célula y teñir la espora, este colorante primario no destiñe al ser lavada la placa por la composición de las membranas de la espora.

Bibliografía Barrera, M. (15 de 11 de 2012). Tincion de scheffer fulton. Obtenido de PRACTICA #6TINCION DE SCHEFFERFULTON MESA # 5: https://es.slideshare.net/MinneBarrera/tincion-de-scheffer-fulton Garcia, L. M. (10 de 11 de 2014). TINCIÓN DE SCHAEFFER-FULTON. Obtenido de https://prezi.com/gsugs6rg2utr/tincion-de-schaeffer-fulton/ Ley, R. (2018). Endospora de Bacterias. Obtenido de Department of Microbiology Cornell university: https://micro.cornell.edu/research/epulopiscium/espanol/endospora-debacterias Marcela, L. (2010). bacillus subtilis. Obtenido http://bacillus8.blogspot.com/2010/04/bacillus-subtilis-clasificacion.html

de

Martinez, C. (28 de 09 de 2017). ¿Qué son las Esporas Bacterianas? Características Principales. Obtenido de https://www.lifeder.com/esporas-bacterianas/ SAVUNISEVILLA. (10 de 09 de 2014). Prácticas de Microbiología. Tinción de endospora bacteriana. Vídeo 3. Obtenido de https://www.youtube.com/watch?v=AVZPbzdF8fE...