TINCION DE GRAM PDF

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ESTE INFORME TE PUEDE SER UTIL, ES SOBRE TINCION DE GRAM...

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TÉCNI CASDETI NCI ÓNBACTERI ANADI F ERENCI AL , T I NCI ÓNDEGRAM PRACTI CA#2

I NTEGRANTES: DEYANI RI SDAY ANAI PUANAI GUARAN LARENZMARI NAGOMEZSERRANO ANGI EVANESSAGUZMANCENT ENO

PROFESOR: EDWI NCERAREDODNDO FECHADEI NI CI O0 7 / 0 9 / 2 0 2 0 F ECHADEENTREGA:1 4 / 0 9 / 2 0 2 0

UNI VERSI DADDELAGUAJ I RA F ACUL T ADDEI NGENI ERI A I NGENI ERI AAMBI ENT AL

RI OHACHALAGUAJ I RA 2 0 2 0 I NTRODUCCI ÓN

L a st é c n i c a sd et i n c i ó nb a c t e r i a n ad i f e r e n c i a ls o na q u e l l a sq u es o nu t i l i z a d a sd ema n e r aa mp l i ae nl a mi c r o b i o l o g í a ;p a r ad i f e r e n c i a rd ema n e r amá se x p l í c i t al o smi c r o o r g a n i s mo s . Es t a st i n c i o n e su t i l i z a nl o s c o l o r a n t e sd i f e r e n c i a l e s ,q u es ec o mp o n e nd emá sd eu n as u s t a n c i at i n t ó r e aye s t ac o n s i s t ee nl a a p l i c a c i ó nd ed o sc o l o r a n t e sq u ec o n t r a s t a ne ns ui n t e n s i d a doc o l o ryu np a s oi n t e r me d i oq u ep r o v o c a u n ar e s p u e s t ad i f e r e n t ee n t r emi c r o o r g a n i s mo sd i s t i n t o soe n t r ed e t e r mi n a d a sc é l u l a sd e n t r od eu n a p o b l a c i ó n . L a st i n c i o n e sd i f e r e n c i a l e smá si mp o r t a n t e sq u es ee mp l e a ne nb a c t e r i o l o g í as o nl a sd eGr a m yl at i n c i ó na c i d o r e s i s t e n t e .Amb a st i n c i o n e ss eu t i l i z a np a r ao b t e n e ri n f o r ma c i ó na c e r c ad el a c o mp o s i c i ó nd el a sc a p a sd el ap a r e dc e l u l a r . Es t at i n c i ó ne su np r o c e d i mi e n t od eg r a nu t i l i d a de mp l e a d oe nl o sl a b o r a t o r i o sd o n d es ema n e j a np r u e b a s mi c r o b i o l ó g i c a s .Esd e fi n i d ac o mou n at i n c i ó nd i f e r e n c i a l ,y aq u eu t i l i z ad o sc o l o r a n t e syc l a s i fi c aal a s b a c t e r i a se nd o sg r a n d e sg r u p o s : b a c t e r i a sGr a mn e g a t i v a syb a c t e r i a sGr a mp o s i t i v a s . Ene s t ep r o c e s os ei n v e s t i g a r aya n a l i z a r ae l d e s a r r o l l od ee s t ap r á c t i c a,e nl ac u a l s ea p l i c a r at i n c i ó n d i f e r e n c i a l d eGr a m,l ac u a l s er e a l i z aat r a v é sd eu n as e r i ed ep a s o s ,l l a ma d a se t a p a sd el at i n c i ó nd e Gr a m, p u e se s t o st i e n e nc o moo b j e t i v oe l r e c o n o c i mi e n t od eb a c t e r i a sd ei n t e r é sa mb i e n t a l .

RESUMEN Es t ai n v e s t i g a c i ó nt i e n ec o mofi n a l i d a db r i n d a ri n f o r ma c i ó ns o b r el ar e a l i z a c i ó nd el ap r á c t i c ayd e s c r i b i r l o sp a s o sop r o c e d i mi e n t o sq u es el l e v a r o nac a b op a r ap o d e r s er e a l i z a rl at é c n i c at i n c i ó nd eGr a m,l a c u a l e su t i l i z a d ae nl o se s t u d i o smi c r o b i o l ó g i c o s , ys i r v e np a r ac o n fi r ma rl amo r f o l o g í ad el a sb a c t e r i a se i d e n t i fi c a rl at a x o n o mí ad ee s t a s , c l a s i fi c a r l a sy as e a ne nGr a mn e g a t i v a soGr a mp o s i t i v a s , l a sc u a l e ss e p u e d e no b s e r v a rp o rme d i od e lmi c r o s c o p i o .Dei g u a lma n e r at a mb i é nc o n o c e r e mo ss uh i s t o r i ae i mp o r t a n c i ae nl ami c r o b i o l o g í aa mb i e n t a l . ABST RACT T h ep u r p o s eo f t h i sr e s e a r c hi st op r o v i d ei n f o r ma t i o no nt h ep e r f o r ma n c eo f t h ep r a c t i c ea n dd e s c r i b et h e s t e p so rp r o c e d u r e st h a twe r ec a r r i e do u tt ob ea b l et op e r f o r mt h eGr a ms t a i n i n gt e c h n i q u e ,wh i c hi s u s e di nmi c r o b i o l o g i c a ls t u d i e s ,a n ds e r v e st oc o n fi r mt h emo r p h o l o g yo ft h eb a c t e r i aa n di d e n t i f yt h e i r t a x o n o my ,c l a s s i f yt h e ma se i t h e rGr a mn e g a t i v eo rGr a mp o s i t i v e ,wh i c hc a nb eo b s e r v e dt h r o u g ht h e mi c r o s c o p e . I nt h es a mewa ywewi l l a l s ok n o wi t sh i s t o r ya n di mp o r t a n c ei ne n v i r o n me n t a l mi c r o b i o l o g y .

OBJ ET I VOS

OBJ ETI VOGENERAL  Ap r e n d e rme d i a n t ei n v e s t i g a c i ó ne x h a u s t i v aad i f e r e n c i a ru n ab a c t e r i aGr a mp o s i t i v ad e u n aGr a mn e g a t i v a,t e n i e n d oe nc u e n t as umo r f o l o g í ays ue s t r u c t u r ae x t e r n aei n t e r n a , me d i a n t el a st é c n i c a sd et i n c i ó nb a c t e r i a n ad i f e r e n c i a l , t é c n i c a sd eGr a m. OBJ ETI VOSESPECÍ FI COS  Co mp r e n d e r e l f u n d a me n t od el at é c n i c ad eGr a m.  I d e n t i fi c a rl a sb a c t e r i a se nGr a mn e g a t i v aoGr a mp o s i t i v a .  Re c o n o c e r l a sd i s t i n t o st é c n i c a sd et i n c i ó nyt i p o sd ec o l o r a n t e s .

EST ADODELARTE Es t at i n c i ó ns ed e n o mi n a d aa s íp o re lb a c t e r i ó l o g od a n é sCh r i s t i a nGr a m,q u i e nl ad e s a r r o l l óe n1 8 4 4 . So b r el ab a s ed es ur e a c c i ó nal at i n c i ó nd eGr a m,l a sb a c t e r i a sp u e d e nd i v i d i r s ee nd o sg r u p o s , g r a mp o s i t i v a syg r a mn e g a t i v a s( e ne s t ec a s o , l o st é r mi n o sp o s i t i v oyn e g a t i v on ot i e n en a d aq u ev e rc o n c a r g ae l é c t r i c o , s i n os i mp l e me n t ed e s i g n a nd o sg r u p o smo r f o l ó g i c o sd i s t i n t o sd eb a c t e r i a s ) . Gr a mn a c i óe l 1 3d es e t i e mb r ed e1 8 5 3ye s t u d i ói n i c i a l me n t eb o t á n i c ae nl aUn i v e r s i d a dd eCo p e n h a g u e , d o n d ef u ea s i s t e n t ed e l z o ó l o g oyn a t u r a l i s t aJ a p e t u sSt e e n s t r u p . Su se s t u d i o sc o np l a n t a sl oi n t r o d u j e r o n al a sb a s e sd el af a r ma c o l o g í aya l u s od emi c r o s c o p i o s .l i n v e s t i g a d o rd e c i d i ól u e g oe s t u d i a rme d i c i n a . Seg r a d u óe ne s ac a r r e r ae n1 8 7 8yt r a b a j óc o momé d i c or e s i d e n t ee ne lh o s p i t a lmu n i c i p a ld e Co p e n h a g u e . Gr a ms ee mb a r c óp o s t e r i o r me n t ee nu n as e r i ed ev i a j e s , h a s t a1 8 8 5 , ad i f e r e n t e sc e n t r o se u r o p e o sp a r a p r o f u n d i z a rs u sc o n o c i mi e n t o se nb a c t e r i o l o g í a .A e n1 8 8 4 ,mi e n t r a se x a mi n a b at e j i d od ep u l mó n p r o c e d e n t ed ep a c i e n t e sq u eh a b í a nf a l l e c i d op o rn e u mo n í a . Gr a md e s c u b r i óq u ec i e r t o st i n t e se r a nc a p t a d o syr e t e n i d o sc o nma y o rf a c i l i d a dp o rc i e r t a sb a c t e r i a s . En u np r i me rp a s o ,r e a l i z óu nf r o t i sc o nu n a smu e s t r a sq u et e n í a ,e s t ob á s i c a me n t eq u i e r ed e c i rq u ep u s o u n a sg o t a sd es a n g r es o b r eu np o r t a o b j e t o sd ev i d r i o , ya c t os e g u i d ol op a s ós o b r el al l a map r o d u c i d ap o r u nme c h e r o . Ot r oi n v e s t i g a d o r , Pa u l Eh r l i c h , y ah a b í ad e s a r r o l l a d ou nmé t o d op a r ac o l o r e a re l b a c i l od el at u b e r c u l o s i s ye s t oa l e n t óaGr a mar e a l i z a r s u sp r o p i o se x p e r i me n t o se nc o l o r a c i ó nd eb a c t e r i a s . Mi e n t r a st r a b a j a b ae nBe r l í ne ne l l a b o r a t o r i od e l a f a ma d omi c r o b i ó l o g oCa r l F r i e d l ä n d e r ,e l i n v e s t i g a d o r d a n é sd e s a r r o l l óe lmé t o d oq u el l e v as un o mb r ea li n t e n t a rd i f e r e n c i a rd o sb a c t e r i a sc a u s a n t e sd e n e u mo n í a .Elc i e n t í fi c ot a mb i é nf u eu n od el o sp r i me r o se nr e c o n o c e rq u el o sma c r o c i t o s ,l o sg l ó b u l o s r o j o si n u s u a l me n t eg r a n d e s , s o nc a r a c t e r í s t i c o sd el aa n e mi ap e r n i c i o s a .

Gr a ms ej u b i l óe n1 9 2 3d es ut r a b a j oc o mop r o f e s o rd eme d i c i n ae nl aUn i v e r s i d a dd eCo p e n h a g u ey f a l l e c i óe n1 9 3 8al o s8 5a ñ o s . Oc h od é c a d a sd e s p u é sd el amu e r t ed e l c i e n t í fi c od a n é s , s umé t o d os i g u e s i e n d ou s a d oe nl a b o r a t o r i o se nt o d oe l mu n d o .

TI NCI ÓNDEGRAM

Es t at é c n i c af u ed e s a r r o l l a d ap o re lc i e n t í fi c oDa n é sHa n sCh r i s t i a nGr a me n1 8 8 4 ;h o ye nd í a ,s i g u e s i e n d ou n ad el a st i n c i o n e smá su t i l i z a d a su n i v e r s a l me n t ed e b i d oal oe c o n ó mi c o ,s e n c i l l oye fi c a zq u e r e s u l t a . Es t ae sd e fi n i d ac o mou n at i n c i ó nd i f e r e n c i a l ,y aq u eu t i l i z ad o sc o l o r a n t e syc l a s i fi c aal a sb a c t e r i a se n d o sg r a n d e sg r u p o s : b a c t e r i a sGr a mn e g a t i v a syb a c t e r i a sGr a mp o s i t i v a s . L o sp r i n c i p i o sd el at i n c i ó nd eGr a me s t á nb a s a d o se nl a sc a r a c t e r í s t i c a sd el ap a r e dc e l u l a rd el a s b a c t e r i a s , l ac u a l l ec o n fi e r ep r o p i e d a d e sd e t e r mi n a n t e sac a d ami c r o o r g a n i s mo .

EQUI POS, MAT ERI ALESYREACT I VOSDELABORATORI O  Mi c r o s c o p i o

 As a sb a c t e r i o l ó g i c a s

 L a mi n a sp o r t a o b j e t o s

 Es c o b i l l ó n

 Co l o r a c i ó nd eg r a m:c r i s t a l v i o l e t a ,L u g o l , a l c o h o l a c e t o n a , s a f r a n i n a  Me c h e r o

PROCEDI MI ENTOYPASOSAT ENERENCUENT AENLAT ÉCNI CADETI NCI ÓNDEGRAM

Pa s o1 . Col or a nt ebá s i c o Co l o c a rc o moc o l o r a n t ep r i ma r i oc r i s t a lv i o l e t a ,e lc u a lt i e n ea fi n i d a dc o ne lp e p t i d o g l i c a n od el ap a r e d b a c t e r i a n a. Mé t o do:v i o l e t ad eg e n c i a n a( l u e g od e3 0s e g u n d o s . Sel a v ac o na g u ae l e x c e s od ec o l o r a n t e ) . Pa s o2 . Mor di e n t e

Po s t e r i o r me n t e , s ec o l o c al u g o l ,e l c u a l s i r v ec o momo r d i e n t eei mp i d el as a l i d ad e l c r i s t a l v i o l e t ap o rl a f o r ma c i ó nd eu nc o mp l e j oc r i s t a lv i o l e t a y o d oq u es a t u r al o se s p a c i o sd e lp e p t i d o g l i c a n od el ap a r e d b a c t e r i a n a . Mé t o do: L u g o l ( p a s a d o1mi n u t os el a v ac o na g u ae l e x c e s od eL u g o l )

Pa s o3 . De c ol or a c i ó n Ens e g u i d a , s ec o l o c au n ame z c l ad ea l c o h o l a c e t o n a , l ac u a l d e s h i d r a t al ap a r e db a c t e r i a n ayc i e r r al o s p o r o sd el ami s ma , t a mb i é nd e s t r u y el ame mb r a n ae x t e r n ad el a sb a c t e r i a sGr a mn e g a t i v a sd e b i d oaq u e é s t ae ss o l u b l eal aa c c i ó nd es o l v e n t e so r g á n i c o s , c o mol ame z c l ad ea l c o h o l a c e t o n a . Mé t o do:a l c o h o l a l 9 5 %oa l c o h o l a c e t o n a( d u r a n t ea p r o x i ma d a me n t e3 0s e g u n d oyl u e g ol a v a rc o na g u a p a r ae l i mi n a r e l r e s t od e l d i s o l v e n t e ) Pa s o4 . Cont r a s t e Po rú l t i mo , s ec o l o c as a f r a n i n a ,l ac u a l f u n c i o n ac o mou nc o l o r a n t es e c u n d a r i ood ec o n t r a t i n c i ó nys i r v e p a r at e ñ i rl a sb a c t e r i a sq u en op u d i e r o nr e t e n e re l c o mp l e j oc r i s t a l v i o l e t a y o d o Mé t o do: f u c s i n aos a f r a n i n a( l u e g od e3 0s e g u n d o ss el a v ac o na g u ae l e x c e s od ec o l o r a n t e ) Pa s o5 . Ob s e r v a ra l mi c r os c opi o Mé t o do: c o l o c a r s o b r ee l f r o t i su n ag o t ad ea c e i t ed ei n me r s i ó n .

RESUL T ADOSYDI SCUSI ÓN L a sb a c t e r i a sGr a mp o s i t i v a s , a l c o n t e n e ru n ag r a nc a n t i d a dd ep e p t i d o g l i c a n o , r e t i e n e nc o nma y o rf u e r z a e s t ec o mp l e j o ,mi e n t r a sq u el a sGr a mn e g a t i v a sn ol op u e d e nr e t e n e rp o rt e n e rme n o sc a n t i d a dd e p e p t i d o g l i c a n o . 6 Ha yb a c t e r i a sd eu nmi s mog é n e r oq u ep u e d e no b s e r v a r s ee nl ami s mamu e s t r ac o moGr a mp o s i t i v a sy c o moGr a mn e g a t i v a s ,ae s t ee v e n t os el el l a mat i n c i ó nGr a mv a r i a b l es e c u n d a r i aaa l t e r a c i ó ne n n u t r i e n t e s ,t e mp e r a t u r a ,p Hoc o n c e n t r a c i ó nd ee l e c t r o l i t o s .Not o d a sl a sb a c t e r i a ss ep u e d e nt e ñ i rp o r e s t at é c n i c a ,y aq u ec a r e c e nd ep a r e dc e l u l a r( mi c o p l a s ma )os up a r e dc e l u l a rt i e n eu n ac o mp o s i c i ó n q u í mi c ad i f e r e n t e( mi c o b a c t e r i a s ,q u ec u e n t a nc o nu n ag r a nc a n t i d a dd eá c i d o smi c ó l i c o s ) . L a smu e s t r a s ú t i l e sp a r as uu s os o nl í q u i d o se s t é r i l e s ,b i o p s i a sp a r ac u l t i v o ,a b s c e s o s ,h i s o p a d o s ,c r e c i mi e n t od e c o l o n i a sa i s l a d a se nme d i o sd ec u l t i v o . L ap a r e dc e l u l a rd el a sb a c t e r i a sGr a mn e g a t i v a se s t ác o n s t i t u i d ap o ru n ac a p afi n ad ep e p t i d o g l i c a n oy u n ame mb r a n ac e l u l a re x t e r n a ,mi e n t r a sq u el a sb a c t e r i a sGr a mp o s i t i v a sp o s e e nu n ap a r e dc e l u l a r g r u e s ac o n s t i t u i d ap o rp e p t i d o g l i c a n o ,p e r on oc u e n t a nc o nme mb r a n ac e l u l a re x t e r n a ;a s íp u e s ,l a c o mp o s i c i ó nq u í mi c aye l c o n t e n i d od ep e p t i d o g l i c a n oe nl ap a r e dc e l u l a r d el a sb a c t e r i a sGr a mn e g a t i v a s yGr a mp o s i t i v a se x p l i c ayd e t e r mi n al a sc a r a c t e r í s t i c a st i n t or i a l e s .

Di f e r e n c i a se s t r u c t u r a l e se n t r eb a c t e r i a sGr a mn e g a t i v a syGr a mp o s i t i v a s .

L a sb a c t e r i a sGr a mp o s i t i v a ss eo b s e r v a nd ec o l o ra z u lo b s c u r oamo r a d o ,mi e n t r a sq u el a sGr a m n e g a t i v a ss eo b s e r v a nd ec o l o r r o s aar o j o .

Pa s os

Gr a mpo s i t i v a s

Gr a mne ga t i v a s

Co l o r a n t eBá s i c o Mo r d i e n t e

Set i ñ ed ev i o l e t a

Set i ñ ed ev i o l e t a

Pe r ma n e c ev i o l e t a

Pe r ma n e c ev i o l e t a

De c o l o r a c i ó n

Pe r ma n e c ev i o l e t a

Sed e c o l o r a

Co n t r a s t e

Pe r ma n e c ev i o l e t a

Set i ñ ed er o s a

Ob s e r v a r a l Mi c r o s c o p i o

Vi o l e t a

Ro s a

1 -I n v e s t i gu eot r o sd os( 2 )e j e mpl osd ec o l or a c i óndet i n c i óndi f e r e n c i a l .  Mé t o do á c i dor e s i s t e nt e( Z I EHL NEELSEN)L a sp a r e d e sc e l u l a r e sd ec i e r t o sp a r á s i t o sy b a c t e r i a sc o n t i e n e ná c i d o sg r a s o s( á c i d o smi c ó l i c o s ) d ec a d e n al a r g a( 5 0a9 0á t o mo sd ec a r b o n o ) q u el e sc o n fi e r e nl ap r o p i e d a dd er e s i s t i rl ad e c o l o r a c i ó nc o na l c o h o l á c i d o , d e s p u é sd el at i n c i ó n c o nc o l o r a n t e sb á s i c o s . Po re s t os ed e n o mi n a ná c i d o a l c o h o l r e s i s t e n t e s .El f r o t i ss et i ñ ed u r a n t e u n o s5mi nc o nF u c s i n af e n i c a d aa p l i c a n d oc a l o rs u a v e .L a v a rc o na g u a .De c o l o r a rc o na l c o h o l e t í l i c o9 5 %c o nu n3 %d eCl Hc o n c e n t r a d o .L a v a ryt e ñ i rd u r a n t e3 0 6 0s e gc o nAz u l d eMe t i l e n o ( c o l o rd ec o n t r a s t e ) . L a v a r ys e c a r .  T i nc i ónd i f e r e n c i a lp a r ar e v e l a re s t r uc t ur a sc e l ul a r e s .Mé t ododeWi r t z .Al g u n o sg é n e r o s b a c t e r i a n o s ,e n t r el o sq u ed e s t a c a nCl o s t r i d i u m yBa c i l l u s ,p r o d u c e ne ns ui n t e r i o rf o r ma sd e r e s i s t e n c i ad e n o mi n a d a se s p o r a s .Se p r o d u c e nc u a n d ol a sc o n d i c i o n e sa mb i e n t a l e ss o n d e s f a v o r a b l e s( a g o t a mi e n t od el o sn u t r i e n t e s ,t e mp e r a t u r a se x t r e ma s ,r a d i a c i o n e s ,c o mp u e s t o s t ó x i c o s ,e t c . )f o r má n d o s eu n ae s p o r ap o rc a d af o r mav e g e t a t i v a .Alfi n a l i z a re lp r o c e s od e e s p o r o g é n e s i s ,l ac é l u l av e g e t a t i v as el i s ayl i b e r al ae s p o r aa le x t e r i o r .Cu a n d oe la mb i e n t ee s f a v o r a b l e ,l ae s p o r ag e r mi n ag e n e r a n d ou n an u e v af o r mav e g e t a t i v a .L ac a p a c i d a dd eg e r mi n a r p e r d u r ad u r a n t ea ñ o s .L at i n c i ó ne s p e c í fi c ad ee s p o r a sr e q u i e r ed o sc o l o r a n t e s :1 . -Ve r d e ma l a q u i t a : c a p a zd et e ñ i rl a se s p o r a se nc a l i e n t e . 2 . -Sa f r a n i n a : c o l o r a n t ed ec o n t r a s t eq u et i ñ el a s f o r ma sv e g e t a t i v a s . L a se n d o s p o r a s ,t r a sl ap r i me r at i n c i ó n , n op e r d e r á ne l c o l o r a n t ee ne l l a v a d o c o na g u a , ys í l oh a r á nl a sf o r ma sv e g e t a t i v a s , q u eq u e d a r á nt e ñ i d a sc o ne l s e g u n d oc o l o r a n t e .

2 -¿Cua l e ss o nl a sf ue nt e sd ee r r ormá sc o mun e se nl ac o l or a c i óndeGr a m? L o se r r o r e smá sc o mu n e ss o nl a st é c n i c o s .Aln oma n e j a ra d e c u a d a me n t el o sr e a c t i v o sot i e mp o sd e d u r a c i ó n .  Co n c e n t r a c i ó ni n a d e c u a d ad el o sr e a c t i v o sd et i n c i ó n .  p Hi n a d e c u a d o .  Elc o l o r a n t es efi j aal ac é l u l ap o rme c a n i s mo sf í s i c o q u í mi c o s ,q u es ea l t e r a ns i e lPHn oe se l a p r o p i a d o .  L o sc o l o r a n t e sp u e d e ns e r á c i d o s , b á s i c o son e u t r o s .  Ti e mp od eTi n c i ó ni n c o r r e c t o .  T e mp e r a t u r as u fi c i e n t e . 3 -¿Qu ée st i nc i óns e l e c t i v a ?, e x p l i qu ea l gu na st é c ni c a sut i l i z a da se nmi c r obi ol o gí a . L a st i n c i o n e ss e l e c t i v a ss o na q u é l l a sq u ep e r mi t e no b s e r v a ru n ae s t r u c t u r ac e l u l a rd e t e r mi n a d a , a l g u n a s b a c t e r i a st i e n e nl ac a p a c i d a dd ep r o d u c i re n d o s p o r a sy / op r o d u c i re x o p o l i s a c á r i d o sc o n o c i d o sc o mo c á p s u l a s . Seb a s a ne ne l h e c h od eq u ed i s t i n t a se s t r u c t u r a sc e l u l a r e st i e n e nd i s t i n t ac o mp o s i c i ó nq u í mi c a , d emo d o q u es et i ñ e ns e l e c t i v a me n t ec o nc i e r t o sc o l o r a n t e s .Ej . ;t i n c i ó nd ee s p o r a s ,d efl a g e l o s ,d ep a r e d e s c e l u l a r e s , d ec o r p ú s c u l o sme t a c r o má t i c o s . Pu e d e nu t i l i z a r s eu n oomá sc o l o r a n t e s . T é c ni c a su t i l i z a da se nmi c r o b i ol o g í a : T i nc i on e ss i mp l e s Seu s au nú n i c oc o l o r a n t e ,q u es i e mp r ee sd et i p ob á s i c o .Seu t i l i z a ns o l a me n t ep a r ai n c r e me n t a re l c o n t r a s t e;t o d a sl a sc é l u l a sa b s o r b e r á ne lc o l o r a n t eyq u e d a r á nt e ñ i d a sd e lmi s moc o l o r .Sefi j ae l e s p é c i me n , s ea ñ a d ee l c o l o r a n t eys ed e j ae l t i e mp oa d e c u a d op a r aq u es ea b s o r b a , s er e t i r ae l e x c e s o d ec o l o r a n t eyl ap r e p a r a c i ó ny ae s t ál i s t ap a r as e ro b s e r v a d a . T i nc i on e sd i f e r e nc i a l e s Seu t i l i z a np a r ad i s t i n g u i re n t r et i p o sd emi c r o o r g a n i s mo s . L at é c n i c ad et i n c i ó nd i f e r e n c i a l c o n s t ad ed o s e t a p a s :u n at i n c i ó ns i mp l es e g u i d ad eu n at i n c i ó nd ec o n t r a s t e .Enl at i n c i ó nd ec o n t r a s t es eu t i l i z ao t r o

c o l o r a n t eq u et i ñ e( yp o rt a n t o , r e v e l a )l a sc é l u l a sn ot e ñ i d a sp o re l p r i me rc o l o r a n t e . Es t a st i n c i o n e ss o n mu yu t i l i z a d a se nmi c r o b i o l o g í a . T i nc i on e se s pe c í fic a s Seu t i l i z a np a r ai n c r e me n t a re lc o n t...