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REPORTE DE ENSAYOS REALIZADOS EN CÁMARA HÚMEDA Valencia Del Solar Rodrigo Jesús, Código: 20170080 Facultad de Agronomía - Universidad Nacional Agraria La Molina Resumen- El presente ensayo tiene como objetivo demostrar mediante inoculaciones de cámara húmeda de diversos órganos de plantas cultivadas que los signos encontrados en frutos de manzana y en una vaina de arveja son patógenos débiles. Este proceso es posible gracias a una cámara húmeda en la que el patógeno encuentra las condiciones óptimas para su desarrollo y propagación. I.

INTRODUCCIÓN

- Los hongos patógenos son organismos que generan toxinas para poder ingresar en su hospedante y de esta manera sobrevivir y reproducirse. Al ingresar al hospedante producen enfermedades en plantas o frutos que bajan la calidad del producto final o simplemente lo convierte en inviable. En este ensayo vamos a determinar si el patógeno inoculado necesita una abertura en el hospedante o puede ingresar de manera directa. El medio usado para que se genere la infección es la cámara húmeda. La cámara húmeda en un medio que nos va a ayudar a que se genere de manera rápida una esporulación, se puede armar con cosas que podemos encontrar en casa y no requiere de mucho tiempo. II. -

-

III.

órgano inoculado. La cámara debe estar limpia para evitar que ingrese algún agente contaminante.

IV.

METODOLOGÍA

Procedimiento para armar la cámara húmeda: Para construir una cámara húmeda necesitamos un recipiente limpio que pueda ser sellado herméticamente, en este recipiente se colocará algún material estéril que retenga la humedad (Papel higiénico o algodón), posteriormente este material se humedecerá con agua hervida o agua reposada y encima de este material ubicado en el fondo del recipiente se colocará alguna plataforma (algún plato pequeño) en el que se colocará el órgano inoculado.

OBJETIVOS Determinar si los patógenos inoculados en Manzana y Arveja son o no patógenos débiles. Identificar cuáles son los patógenos que generan la infección MARCO CONCEPTUAL

Patógeno: Es un agente infeccioso que genera alguna enfermedad en el huésped, este agente puede ser macroscópico o microscópico y alteran la fisiología el organismo al que infectan Patógeno débil: Es el patógeno que puede infectar a algún organismo (en este caso plantas) que se encuentren en situaciones de estrés o tengan alguna herida, la cual va a permitir el ingreso sencillo del patógeno. No pueden ingresar de manera directa. Cámara húmeda: Espacio herméticamente cerrado en el que se va a producir la esporulación de algún hongo, esta cámara le brinda al patógeno condiciones de temperatura y humedad relativa constantes ya que no se debe abrir hasta la visualización del signo en el

Procedimiento para inocular: Para realizar la inoculación debemos tener un fruto infectado y uno sano, el infectado será la fuente del patógeno para el fruto sano. Se debe lavar el fruto sano con agua convencional de caño y luego de su secado se debe sumergir en una solución de Hipoclorito de Sodio al 1% (se debe de considerar la pureza de la lejía que se está utilizando) por 3 minutos, en estos 3 minutos se deben de limpiar los recipientes en donde se colocará el fruto inoculado con alcohol de 70°, una vez esterilizados los recipientes se procede a retirar el fruto sano de la solución y se debe enjuagar con agua hervida (repetir este proceso 3 veces) y una vez seco se debe hacer un corte en forma de “V” en el que se va a levantar la piel del fruto y con un estilete se va a extraer parte del patógeno del fruto infestado para colocarlo en el fruto sano, luego cerrar esta abertura y rotularlo como “1”, el mismo procedimiento sin un corte se realiza en otra parte del fruto y luego de colocar el patógeno se encierra y rotula como “2”. La marca “1” se debe cubrir con cinta y después de realizado todo esto se coloca el fruto inoculado en la cámara húmeda, la cual se cerrará herméticamente y

se colocará en un lugar en el que no llegue de manera directa la luz del sol. Este procedimiento se realizó 3 veces. -2da evaluación: Se realizó el 25 de marzo del 2021 y se observó la vaina casi en su totalidad infestada. V.

RESULTADOS Y DISCUSIONES

RESULTADOS: Repetición 1: Se realizó el 12 de marzo del 2021, se extrajo micelio de un fruto de manzana infestado y se colocó en un fruto de manzana sano. -1era evaluación: Se realizó el 15 de marzo del 2021, no se observó presencia de patógeno.

Repetición 3: Se realizó el 20 de marzo del 2021, se extrajo micelio de una manzana infestada y se inoculó en un fruto sano. -2da evaluación: Se realizó el 18 de marzo de 2021, no se observó presencia de patógeno.

-1era evaluación: Se realizó el 22 de marzo del 2021 y se observó diseminación del micelio (aún pequeño) en el área en la que se realizó la abertura.

Repetición 2: Se realizó el 19 de marzo del 2021, se observó signo en una vaina de arveja (moho) y se inoculó en una vaina sana. -1era evaluación: Se realizó el 21 de marzo: se observó signo en una proporción muy pequeña en el área en donde se realizó la abertura.

-2da evaluación: Se realizó el 25 de marzo y se observó considerablemente micelio en el área de la abertura y micelio pequeño en el área en la que no se hizo ningún corte.

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VII.

Un patógeno puede desarrollarse de manera rápida si tiene las condiciones óptimas, condiciones de temperatura y porcentaje de humedad relativa constantes que le brinda la cámara húmeda.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

- Facultad de agronomía, Departamento de fitopatología. 2015. pv.fagro. [online] Available at: [Accessed 28 March 2021]. DISCUSIÓN: -En el primer ensayo no se obtuvo algún resultado debido a que el proceso de lavado del fruto sano después de sumergido en la solución de hipoclorito fue incorrecto, el lavado se realizó una vez y de manera espontánea, lo que pudo generar por el concepto de residualidad de compuestos algún compuesto inhibidor del patógeno. -En el segundo ensayo realizado en una vaina de arveja se determinó que el patógeno es de carácter débil debido a la proporción de signo observada en las evaluaciones en el área de corte, según Koppert (2017) el moho es un patógeno débil que ingresa por aberturas en los órganos de las plantas, lo cual coincide con lo observado en el ensayo. -En el tercer ensayo realizado en un fruto de manzana se determinó que el patógeno inoculado es débil debido a que la mayor proporción de micelio se encontró en la zona de corte, en la abertura realizada con cuchilla. Troy Buechel indica en un artículo publicado en la página de PRO-MIX (2020) que el crecimiento de micelio aparece en zonas de las plantas que tienen lesiones y en frutos de manera rápida en zonas que han tenido un crecimiento débil o alguna lesión. Lo que concuerda con el resultado obtenido en el ensayo.

VI.

CONCLUSIONES

-Todos los patógenos presenciados en este ensayo han tenido un desarrollo mayor en las zonas en las que se realizó el corte, es decir, son patógenos que tienen facilidad de infectar cuando hay una lesión en el órgano de la planta de interés.

- Retos de Koppert, 2017. Botryotinia fuckeliana, Moho gris. Available at:...