Nuovi neuroni in un cervello adulto Risultati 2 PDF

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approfondimenti di neuroscienze cognitive...

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Il BDNF media gli effetti del testosterone sulla sopravvivenza di nuovi neuroni in un cervello adulto Data l'abbondanza del recettore BDNF, TrkB, e il fatto che l'immunomarcatura è stata effettuata con un anticorpo neutralizzante per BDNF (che compete con TrkB per BDNF), una potenziale ragione per i bassi livelli di immunocolorazione osservati nell'HVC potrebbe essere stata la mascheramento del BDNF dovuto al legame del recettore. Abbiamo quindi ripetuto il protocollo immunoistochimico utilizzando sezioni di cervelli canarini perfusi con soluzione salina tamponata con acetato (ABS) e paraformaldeide. È stato precedentemente dimostrato che l'ABS migliora l'immunomarcatura della neurotrofina dissociando il recettore dalla neurotrofina (Zhou et al., 1994). L'immunocolorazione del BDNF nell'HVC dei canarini maschi adulti è risultata notevolmente migliorata dal trattamento con ABS, suggerendo che gran parte del BDNF nell'HVC è normalmente legato al suo recettore. Tuttavia, il trattamento con ABS ha distrutto la morfologia cellulare nell'HVC, BDNF legato al recettore era originariamente presente all'interno delle cellule HVC o nello spazio extracellulare. L'immunomarcatura del BDNF nell'HVC femminile adulta era trascurabile anche dopo il trattamento con ABS, suggerendo che poco o nessun BDNF è normalmente presente nell'HVC femminile, allo stato libero o legato al suo recettore.

L'infusione di BDNF aumenta il reclutamento o la sopravvivenza di nuovi neuroni

Abbiamo testato l'effetto dell'infusione di BDNF sull'HVC di canarini femmine adulte a marzo e ottobre. Nuovi neuroni nascono lungo le pareti dei ventricoli laterali nei canarini adulti (Goldman e Nottebohm, 1983; AlvarezBuylla et al., 1990b) e, in un periodo di 20-40 giorni,

migrano e si differenziano nel parenchima adulto (Alvarez- Buylla e Nottebohm, 1988). Abbiamo iniettato per via sistemica canarini femmine adulte con3H-timidina due volte al giorno per 5 giorni per etichettare un grande contingente di nuovi neuroni, quindi aspettato 25 giorni dalla prima iniezione per consentire alle cellule di migrare (Figura 2A). Il giorno 25, abbiamo iniziato l'infusione di BDNF o soluzione salina immediatamente laterale all'HVC utilizzando una pompa osmotica (Figura 2C). Gli uccelli sono stati uccisi dopo 10 giorni di infusione. Le cannule non hanno provocato lesione dell'HVC. Non

è stato possibile determinare l'entità dell'infusione mediante immunoistochimica per BDNF, probabilmente a causa della degradazione o del mascheramento dell'antigene nel tessuto incorporato nel PEG. Tuttavia, il BDNF diffonde solo pochi millimetri in theammalianbrainparenchima (Mufson et al., 1994; Sobreviela et al., 1996), che sarebbe stato sufficiente in questo caso per coprire l'HVC e alcune aree limitrofe, come la piattaforma e il cHV, ma non per interessare regioni più lontane. L'identità neuronale era basata sulla morfologia nelle sezioni colorate con cresil violetto. Le cellule contenenti nuclei grandi, regolari e chiari con uno o due nucleoli di colorazione scura sono state considerate neuroni (Goldman e Nottebohm, 1983) e neuroni con più di 203 i livelli di fondo dei grani d'argento sono stati contati come 3H-timidina marcato (Figura 3)....