Práctica 13 Obtención DE Glucogeno DE Hígado DE RATA PDF

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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONALESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICASBIOQUÍMICA GENERALCruz Botello Jakob Iñaky Valadez Ibarra Marco Uriel PRÁCTICA 13 OBTENCIÓN DE GLUCOGENO DE HÍGADO DE RATAINTRODUCCIONEl Glucógeno es la forma principal de almacenaje de carbohidratos en los animales, se encuentra e...

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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS BIOQUÍMICA GENERAL Grupo: 3FV1

Cruz Botello Jakob Iñaky

Sección: 3

Valadez Ibarra Marco Uriel

PRÁCTICA 13 OBTENCIÓN DE GLUCOGENO DE HÍGADO DE RATA INTRODUCCION El Glucógeno es la forma principal de almacenaje de carbohidratos en los animales, se encuentra en proporción mayor en el hígado (hasta 6%) y en el músculo, se encuentra del 2-3%. Sin embargo, debido a su masa mayor, el músculo almacena tres a cuatro veces la cantidad de glucógeno que tiene el hígado como reserva. Al igual que el almidón, es un polímero ramificado de alfaglucosa.

Acido (HCl)

1 N

2N 4N

Fehlin g

+

++

Lugol

+

++

Seliwa nof

-

-

++ + ++ +

Testigo

Enzimáti ca

Gl ucógen osi n hi dr ol i z ar

P1 +

+

-

+

+

+

-

+

-

-

-

( i n)

-

CÁLCULOS

La hidrolisis de los enlaces glicosidicos puede ser catalizada por ácidos o enzimas en la hidrolisis, los enlaces se rompen y forman oligosacáridos, para formar glucosa. La hidrolisis también puede ser llevada por la enzima α-amilasa

DISCUSIÓN DE RESULTADOS



Aislar una estrategia para aislar purificar y caracterizar glucógeno.

RESULTADOS Prueba Molish Biuret Ninhidrina

Resultado Positivo Negativo Negativo

Tabla 1. Resultados de las pruebas del glucógeno sin hidrolizar

P2 Agua

-

Su estructura está formada por varias cadenas que contienen de 12 a 18 unidades de α-glucosas formadas por enlaces glicosidicos α-1-4; uno de los extremos de esta cadena se une a la siguiente cadena mediante un enlace α-1-6-glucosídico, tal y como sucede en la amilopectina. Una sola molécula de glucógeno puede contener más de 120.000 moléculas de glucosa.

OBJETIVO

Blanco

Tabl a2.Res ul t adosdel aspr uebasdelgl ucógeno hi dr ol i z ado,donde( i n)s i gni fic ai nmedi at o

El peso del hí gado extraí do de la rata fue de 16.6 g, mientras que el glucógeno obtenido de este órgano fue de 2.02 g. Por lo tanto el porcentaje de glucógeno presente en el hí gado de rata en función de los pesos es de 12.1 %.

A lo largo de la práctica ademas de remover el hígado tambien removimos el corazón, los riñoes y las dos patas traseras de la rata al momento de obtener el glucógeno tuvimo que usar bastante etanol para poder obtener lo mayor posible de los tuvos de centrifuga por lo cual al hacer la caracterización química nos costo mas trabajo debido a que no todo el metanol se habia evaporado. Al ralizar las pruebas de la Tabla 1. Biuret y ninhidrina nos dieron negativas debido a que el glucogeno no presenta grupos amino esto por ser un polisacárido y no un aminoácido, peptido o proteína y molish da positivo devido

a que esta prueba identifica carbohidratos en general. En la Tabla 2 Para la reacción de fehling nos identificó en casi todas a excepcion del testigo una prueba positiva para polisacaridos. Para la reacción de Seliwanoff la reacción da igual forma da positiva para casi todos los tubos a excepcion del tesitigo esto da positivo a a cetoas y aldosas. Para la reacción de lugol solo da coloracion en el testigo que esto es un postivo para polisacáridos. CONCLUSIONES Se logró caracterizar e identificar el glucógeno de hígado de una rata además de su caracterización química la cual se iba intensificando en cuando la concentración de HCl iba aumentando esto debido a que la hidrolisis se daba mayor además de que con la saliva de los dos la coloración era prácticamente igual. BIBLIOGRAFÍAS

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Lehninger, A.L. Bioquímica, 2ª ed. Omega, Barcelona, 1978 Bioquímica 3ª Ed. (2002) C.K. Mathews, K.E. van Holde, K.G. Ahern. Pearson Educación S.A. Principios de Bioquímica 3ª/4ª edición. (2000/2005) David L. Nelson y M. M. Cox. Editorial Omega...