PrÁctica Nº 07 - Ciprofloxacino PDF

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PRÁCTICA Nº 07 - CIPROFLOXACINO UNMSM | 2018 1. INTRODUCCIÓN A principios de la década de los años 60, Lescher y col. descubren de forma fortuita la primera 4quinolona, denominándola ácido nalidíxico. Su baja difusión tisular y su alta unión a las proteínas, hacen que su Concentración Inhibitoria Mí...

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PRÁCTICA Nº 07 - CIPROFLOXACINO

UNMSM | 2018

1. INTRODUCCIÓN A principios de la década de los años 60, Lescher y col. descubren de forma fortuita la primera 4quinolona, denominándola ácido nalidíxico. Su baja difusión tisular y su alta unión a las proteínas, hacen que su Concentración Inhibitoria Mínima sea elevada, impidiendo su utilización en infecciones sistémicas, por tal motivo su uso ha sido limitado. Esta familia de quimioterápicos evolucionó lentamente, apareciendo otros fármacos en la década de los 70; ácido oxolónico, ácido piromídico, ácido pipemídico y cinoxacino, todos ellos con adelantos limitados con respecto al ácido nalidíxico. Denominándolos de Primera Generación. En 1984, debido a la introducción de uno o varios átomos de fluor en el núcleo básico y aparecen las primeras 4-fluorquinolonas, tambien llamadas Quinolonas de Segunda Generación encabezada por la norfloxacina, seguidas por la pefloxacina, cfloxacina, ciprofloxacina, fleroxacina y temafloxacina, todas con una importante actividad contra Bacterias Gram negativas y escasa contra Gram positivas (excepto Estafilococos) con buena disponibilidad administrada por vía oral y excelente tolerancia. En la década de los 90 empezaron a sintetizarse otros componentes de las quinolonas, siendo entre ellas tosufloxacina, levofloxacina, gatifloxacina y sparfloxacina conocidas como quinolonas de Tercera Generación, con mejoras importantes respecto a su biodisponibilidad, vida media y espectro, específicamente sobre el Estreptococo pneumoniae. En los últimos cuatro años han sido probadas cinco nuevas quinolonas maxifloxacina, gatifloxacina, trovafloxacina y siafloxacina, conocidas como de cuarta generación, incluyendo en su espectro a los gérmenes anaerobios. Por último se encuentra en estudio, pendiente de aprobación por la FDA, las siguientes quinolonas gemifloxacina, pazufloxacina teniendo el mismo espectro que las precedentes generaciones, siendo la gemifloxacina la más potente quinolona contra el Estreptococo Pneumoniae, y Balofloxacina con importante acción sobre micobacterias (M. Tuberculosis, M. Kansassi, M. Fortuitum). El importante desarrollo de esta familia de drogas les está situado en la avanzada del tratamiento antimicrobiano de las enfermedades infecciosas, siendo consideradas en la actualidad dentro del grupo de antimicrobianos de Elite para enfrentar la sepsis por gérmenes con alta virulencia y resistencia

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2. MECANISMO DE ACCIÓN El blanco específico de las quinolonas es interferir en la síntesis del ADN, conduciendo a muerte celular bacteriana mediante la fragmentación cromosómica. Penetran la pared celular a través de porinas, inhibiendo directamente la replicación bacteriana al interactuar con dos enzimas; ADN girasa (proteína tetramérica compuesta por dos pares de subunidades A y B, codificadas por los genes GyrA y GyrB) y topoisomerasa IV (proteína tetramérica compuesta por dos pares de subunidades A y B, codificados por los genes ParC y ParE), las cuales son necesarias para realizar el superenrollamiento del ADN. Específicamente, ADN girasa es el blanco primario en bacterias gramnegativas, mientras que topoisomerasa IV lo es en bacterias grampositivas. Algunas quinolonas con espectro de actividad y potencia mejorada, parecen tener como blanco ambas enzimas. La resistencia puede alcanzarse mediante tres mecanismos no exclusivos: A través de mutaciones

cromosómicas

en

genes

codificantes,

al

reducir

las

concentraciones

intracitoplásmicas de quinolonas y por genes de resistencia a quinolonas mediados por plásmidos (PMQR, por sus siglas en inglés). Las mutaciones cromosómicas afectan las regiones determinantes de resistencia a quinolonas (QRDR, por sus siglas en inglés) de ADN girasa (GyrA y GyrB) y topoisomerasa IV (ParC y ParE). Se dan por errores de transcripción durante la replicación cromosómica y ocurren en rangos tan altos como 1 en 106 a 109 en bacterias silvestres. Las mutaciones en gyrA, el gen que codifica las subunidades A de ADN girasa, conforman el mecanismo que con mayor frecuencia se encuentra involucrado en la resistencia a quinolonas entre las bacterias gramnegativas. La reducción de la concentración intracelular de quinolonas se da principalmente por dos mecanismos; pasivamente, mediante reducción de la permeabilidad por “downregulation” de proteínas extra-membranales que forman canales y activamente, mediante sobreexpresión de sistemas de eflujo multidroga pertenecientes a la superfamilia de división de resistencianodulación (DRN), AcrAB-TolC. Estos últimos reducen la acumulación de quinolonas en el citoplasma, proporcionando el tiempo suficiente para que la bacteria se adapte y adquiera resistencia.

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Influencia la potencia, el espectro y la farmacocinética. Aumenta la potencia a bacterias gramnegativas y mejora la biodisponibilidad

Influencia la potencia y la farmacocinética. Amplio espectro contra gramnegativos

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Controla la Girasa y la potencia antibacteriana

3. RELACIÓN ESTRUCTURA – ACTIVIDAD

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Esencial para la unión a las girasas y el transporte a través de la membrana bacteriana

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4. PROTOCOLO I. DATOS GENERALES SUSTANCIA ANALIZADA FORMA FARMACÉUTICA

Ciprofloxacino

ORIGEN:

Farmaindustria

Tabletas recubiertas

PROCEDENCIA:

Boticas Dr. Simi

NOMBRE COMERCIAL

Ciprofloxacino

EN-01492

CONCENTRACIÓN:

500 mg

REGISTRO SANITARIO FECHA DE VENCIMIENTO:

NÚMERO DE LOTE:

10596068

FECHA DE ANÁLISIS:

26 / 09 / 18

II.

III.

ANÁLISIS ORGANOLÉPTICO

05/21

ANÁLISIS DE SOLUBILIDAD (SEGÚN FARMACOPEA) Moderadamente soluble

ASPECTO

Cristales

AGUA

COLOR

Amarillo claro

ÁCIDO ACÉTICO

Poco soluble

OLOR

No aplica

METANOL

Poco soluble

SABOR

No aplica

ACETONA

Insoluble

IV.

OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA

AUMENTO

OBSERVACIÓN

V. CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA SISTEMA DE Cloroformo: metanol: SOLVENTES ácido acético PROPORCIÓN

3: 1: 0,5

REVELADOR

Vapores de yodo

Rf St

0.48

Rf M.P.

0.47

Procedimiento para cromatografía: -

Preparar una cromatoplaca

-

Realizar 5 aplicaciones de estándar y de M.P, en distintos puntos

-

Colocar en la cuba cromatográfica (con el sistema de solventes

cloroformo:metanol:ácido

acético

en

una

proporción de 3:1:0.5 -

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Terminada la cromatografía, revelar con vapores de yodo

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VI. ANÁLISIS QUÍMICO CUALITATIVO REACCIÓN

RESULTADO

OBSERVACIÓN

INDICA:

DRAGENDROFF

+++

Precipitado naranja

Nitrógeno terciario

MAYER

+++

Precipitado blanco

Nitrógeno terciario

CLORURO FÉRRICO

+++

Coloración roja

Quinona

LE ROSEN TIOCIANATO DE COBALTO DICROMATO DE POTASIO/ ÁCIDO SULFÚRICO

+++

Coloración amarilla

Compuesto aromático

-

Precipitado azul acero

-

+++

Coloración verde

Oxidación

A.) REACCIÓN DE DRAGENDROFF: Se coloca en un tubo de ensayo mg me muestra problema y se agrega 1 mL de agua destilada, posteriormente se agrega II gotas del reactivo de Dragendorff.

Fig. 1. Ecuación de la reacción de Dragendroff

Fig. 2. Reacción de Dragendroff (precipitado rojo)

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B.) REACCIÓN DE MAYER: Se coloca en un tubo de ensayo mg me muestra problema y se agrega 1 mL de agua destilada, posteriormente se agrega II gotas del reactivo de Mayer.

Fig. 3 Ecuación de la reacción de Mayer

Fig. 4. Reacción de Mayer

(precipitado blanco)

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C.) REACCIÓN DE CLORURO FÉRRICO Se coloca en un tubo de ensayo mg me muestra problema y se agrega 1 mL de agua destilada, posteriormente se agrega II gotas de cloruro férrico.

Fig. 5 Ecuación de la reacción de FeCl3

Fig. 6. Reacción de cloruro férrico (coloración roja)

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D.) REACCIÓN DE LE ROSEN En una cápsula se colocan mg de muestra problema y posteriormente se le adicionan II-III gotas del reactivo de Le Rosen.

Fig. 7. Ecuación de Le Rosen

Fig. 8. Reacción de Le Rosen (Anaranjado)

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E.) REACCIÓN DE TIOCIANATO DE COBALTO: En un tubo de ensayo se colocan mg de muestra problema, posteriormente se añaden III-IV gotas de tiocianato de cobalto.

Fig. 9. Ecuación de la reacción de tiocianato de cobalto

Fig. 10. Reacción de tiocianato de cobalto (precipitado azul acero)

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F.) Bicromato En una cápsula se colocan mg de muestra problema y posteriormente se le adicionan II-III gotas del bicromato de potasio, posteriormente se añaden III gotas de ácido sulfúrico.

Fig. 11. Ecuación de la reacción de bicromato de potasio/ácido sulfúrico

Fig. 12. Reacción de bicromato de potasio/ácido sulfúrico (coloración verde)

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PRÁCTICA Nº 07 - CIPROFLOXACINO VII.

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ANÁLISIS QUÍMICO CUANTITATIVO

MÉTODO ANALÍTICO

Valoración de ácido en medio no acuoso

SOLUCIÓN VALORANTE

Metóxido de sodio 0.092N

SOLVENTE

Dimetilformamida

INDICADOR

Azul de timol

GASTO

1.4 mL

RESULTADO

mg OBTENIDOS

42 mg

% de meropenem

102%

Metóxido de sodio 0,092 N Gasto: 1,4 mL

Fig. 13. Esquema de valoración de Ciprofloxacino con metóxido de sodio 100 mg M.P. 5 mL V gotas azul de timol AZUL ➔ AMARILLO

Fig. 13. Punto final de valoración de Ciprofloxacino con metóxido de sodio 0,092 N

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g = N x V x Peq g = 0.092 x 1,4 x 331,34 g = 42.63 g CIPROFLOXACINO

I.

DATOS GENERALES

CONFORME

ANÁLISIS ORGANOLÉPTICOS

CONFORME

III.

ANÁLISIS DE SOLUBILIDAD

CONFORME

IV.

OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA

NO APLICA

V.

CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA

CONFORME

VI.

ANÁLISIS QUÍMICO CUALITATIVO

CONFORME

ANÁLISIS QUÍMICO CUANTITATIVO

CONFORME

II.

RESULTADOS GENERALES

VII.

Se comprobó mediante análisis químicos cuantitativo y cualitativo, además del CONCLUSIONES

análisis cromatográfico, se determina que la muestra de CIPROFLOXACINO cumple con lo analizado, por lo tanto, se ACEPTA

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Fig. 14. Descripción y solubilidad de Ceftazidima

Fig. 15. Estructura molecular y nomenclatura de Ceftazidima

Fig. 16. Definición de cápsulas de Ceftazidima

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5. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1.

Delgado A. Introducción a la química terapéutica. 2da ed. Barcelona: Diaz de Santos; 2010. Pág. 433.

2.

Rodriguez Z,Idelmis B. Lopez M. Antibióticos cefalosporánicos: Actualidades y perspectivas .Revista CENIC.2013;44(1):16-23

3.

Sonawane VC. Enzymatic modi?cations of cephalosporins by cephalosporin acylase and other enzymes. Critical Reviews in Biotechnology. 2006; 26(2):95-120.

4.

Singh GS.-Lactams in the new millennium. Mini-Reviews in Medicinal Chemistry. 2004; 4(1):69-92.

5.

Zapun A, Contreras Martel C, Vernet T. Penicillin-binding proteins and lactam resistance. FEMS Microbiol Rev. 2008; 32(2):361-85.

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