Relatório 2 - contagem de hemácias PDF

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Relatório prático...

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIÁS

CONTAGEM DE HEMÁCIAS EM CÂMARA DE NEUBAUER

GOIÂNIA 2018

CONTAGEM DE HEMÁCIAS EM CÂMARA DE NEUBAUER

Relatório encaminhado como critério de

avaliação

para

a

disciplina

“Métodos Analíticos em Biomedicina” da Universidade Federal de Goiás.

GOIÂNIA 2018 Resumo A contagem de hemácias faz parte do exame de hemograma, com o objetivo de diagnosticar e ou monitorar distúrbios que afetem a quantidade de hemácias. A contagem é feita na câmara de Neubauer, onde é utilizado soro fisiológico para diluição da amostra em 1/200, permitindo a facilitação da contagem. A contagem foi feita de forma eficaz, estando dentre os valores esperados (normais).

Palavras chave: Hemácias. Contagem. Câmara de Neubauer.

Sumário 1 Introdução................................................................................................................5 2

Materiais

e

métodos.................................................................................................7 2.1Materiais………………………………………………………......……………...7 2.2Metodologia………………...…………………………………………………....7

3 Resultados...............................................................................................................9 4 Considerações finais.............................................................................................11 Referências Bibliográficas......................................................................................12 Anexos......................................................................................................................13

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1 Introdução No eritrograma existem várias partes a serem analisadas, dentro delas está a contagem de hemácias. Por ser um exame de rotina, é realizado para mostrar se há alguma alteração nos eritrócitos, que são células de extrema importância para o organismo, como por exemplo o transporte de oxigênio para todo o corpo. Quando ocorre a diminuição de hemácias, o paciente geralmente apresenta um quadro de anemia. E quando tem o aumento de hemácias, indica que o organismo precisa de mais oxigenação para todas as células logo produz mais eritrócitos, uma das causas desse aumento pode ser: tumor, desidratação, fibrose pulmonar e entre outras. Para a realização da contagem de hemácias é necessário a realização da punção venosa com a amostra de sangue inserida do tubo roxo, possuindo o anticoagulante EDTA que é o mais usado na hematologia para a preservação da morfologia celular.

Figura 1. Tubo de coleta de sangue a vácuo com anticoagulante – EDTA. (Fonte: http://www.splabor.com.br/blog/aprendendo-mais/aprendendo-mais-tubos-para-coleta-desangue-a-vacuo/)

É necessário levar a amostra para centrífuga e assim poder começar o procedimento. Na contagem de células é utilizado a câmara de Neubauer. Ela é uma lâmina espessa de vidro, com formato retangular, atravessado transversalmente por dois sulcos que delimitam três plataformas, sendo que a plataforma central é onde se encontra a área reticulada usada para a contagem de eritrócitos e outras células (Roteiro da aula de métodos analíticos de biomedicina). A grade de contagem tem 3 mm x 3 mm de tamanho e é subdividida em nove quadrantes de 1 mm x 1mm.

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Figura 2. Câmara de Neubauer com suas 2 câmaras independentes. (Fonte: https://www.biomedicinapadrao.com.br/2013/10/conhecendo-camara-de-neubauer.html).

Sabendo-se da importância da contagem de hemácias e de como é feita, o objetivo da aula foi reproduzir a técnica de contagem.

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2 Materiais e métodos 2.1 Materiais Para a realização da punção venosa foi necessário: ● Álcool 70% ● Algodão ● Agulha descartável 25x0,8 verde ● Seringa ● Garrote ● Tubo de Coleta de Sangue a Vácuo ● Algodão com adesivo ● Tubo de EDTA para coleta do sangue ● Descarpack ● Lixo infectante ● Lixo comum Para a realização da contagem de hemácias e diluição foi necessário: ● Tubo de ensaio de vidro (x5) ● Pipeta volumétricas: 5,0 ml ● Pera para pipeta volumétrica ● Pipeta automática de 20 μL ● Câmara de Neubauer ● Lamínulas de vidro ● Solução salina - alíquotas de 50 ml em tubos com tampa ● Balança ● Microscópio para contagem ● Béquer de vidro ● Copo descartável para descarte de ponteiras

2.2 Metodologia Através da punção venosa foi obtido a amostra para contagem de hemácias. A coleta foi realizada sem a necessidade de jejum, para isto, foi identificado o nome da paciente em um tubo com EDTA (tampa roxa), que é o indicado para o exame de hemograma, uma vez que este EDTA se liga ao cálcio, inibindo a coagulação do

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sangue. Após a identificação do tubo, foi preparado o restante do material de coleta (seringa e agulha) e em seguida colhido a amostra, 5 ml de sangue venoso. Após coletar a amostra, foi mantida em agitação (o tubo) para que as células não descessem para o fundo e coagulassem, o que atrapalha na contagem, podendo obter-se um resultado errôneo. Logo, preparou-se uma solução fisiológica, necessária para a diluição da amostra, pois assim possibilita uma melhor contagem das células. A solução foi feita com 0,88 g de NaCl para 100 mL de água destilada. Na diluição, pipetou-se 20 μL da amostra de sangue e 4 mL de solução fisiológica em um tubo, homogeneizando-o, ou seja, fazendo uma diluição de 1/200 da amostra. A contagem de hemácias foi realizada no quadrante central de uma câmara de Neubauer, sendo analisada ao microscópio óptico. Para este fim, umidificam-se as laterais da câmara, coloca-se a lamínula sobre a lâmina, e então pipetou-se com uma pipeta de 20 microlitros, a suspensão de hemácias (amostra diluída), desprezando se a primeira gota até completar o volume da câmara. Esperou-se 5 minutos para realizar a contagem, permitindo a decantação das hemácias. Para uma contagem mais precisa foram escolhidos 5 quadrantes dos 25 pertencentes ao quadrante central. Após somar todas as células (dos 5 quadrantes escolhidos) foi feita a conversão para o volume desejado. Esta conversão é necessária para soltar o resultado final. A conversão da contagem foi realizada da seguinte maneira: HT X 5 X 10 X 200 = hemácias/μL O HT é encontrado a partir do total de células, ou seja, de hemácias contadas, multiplicando por 5 - este é o equivalente de todos os quadrantes central (5x5=25). A multiplicação por 10 é para passar para 1 microlitro. E o 200 é o fator de diluição da câmara (1 / 200).

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3 Resultados A aula de contagem de hemácias em câmara de Neubauer contou com ampla participação dos alunos. Primeiramente foi realizada a prática da punção venosa para obtenção da amostra a ser trabalhada, onde cada grupo realizou uma punção entre seus componentes e então assim transferiu-se a amostra para um tubo contendo EDTA, homogeneizando-o em seguida para evitar a coagulação do sangue. Nessa semana a Keilah coletou da Thais, e obteve sucesso, superando suas dificuldades. Foi diluída a amostra em uma diluição 1/200 em solução salina, e assim prosseguiu-se para a contagem das hemácias na câmara de Neubauer. Para uma contagem mais precisa foram escolhidos 5 quadrantes dos 25 pertencentes ao quadrante central da câmara, estando estes esquematizados abaixo em forma de tabelas coloridas para melhor compreensão da contagem. Obtivemos os seguintes números de células nos seguintes quadrantes. Esquematização da contagem de hemácias na câmara de Neubauer

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Legenda: Primeiro quadrante, primeira linha à esquerda (1) Último quadrante, primeira linha a direita (3) Quadrante central (5) Primeiro quadrante, última linha à esquerda (2) Último quadrante, última linha à direita (4)

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Os números dentro das tabelas representam a quantidade de células contadas em cada um dos quadrantes da câmara escolhidos para a contagem. Com isso, podemos então calcular o número de hemácias por microlitro de sangue pegando os números encontrados e jogando na seguinte fórmula.

HT X 5 X 10 X 200 = hemácias/μL Calcula-se as hemácias totais encontradas entre os quadrantes contados, que nesse caso foram cinco, multiplica-se então pelo número de quadrantes restantes para o total de quadrantes para completar o quadrante central, que são 25 (ou seja, 5x5=25) e então, multiplica-se pela área total da câmara em milímetros cúbicos, e por último, multiplica-se pelo fator de diluição da câmara, encontrando assim o valor de hemácias por microlitro de sangue. Com a nossa contagem obtivemos os seguintes resultados: HT = 628 (valor obtido pela soma do número de células contadas nos cinco quadrantes escolhidos para análise). Portanto, obtemos: 628 x 5 x 10 x 200 = 6280000 hemácias, ou seja, 6,2 6

x10 hemácias/μL.

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4 Considerações finais A contagem de hemácias em câmara de Neubauer é um método manual, simples e rápido. Essa contagem é realizada em hemograma para a contagem das hemácias. O hemograma é um exame muito comum e pedido pelos médicos pois indica alterações causadas no organismo, seja uma anemia, alergia ou infecção. Existem fatores que podem interferir no resultado do exame, seja uma coleta realizada inadequadamente ou a demora para a realização do exame pós coleta. O procedimento pode envolver erros de pipetagem, lâminas e lamínulas sujas que interferem no resultado final de um bom exame. Então mesmo sendo um exame prático, deve-se ter atenção e cuidado na realização do mesmo, para que não haja resultados com errôneos. Hoje em dia, existem aparelhos automáticos que realizam esse tipo de contagem; a contagem em câmara de Neubauer é realizada e recomendável para verificar resultados que podem trazer dúvidas, onde pode haver diagnósticos de doenças graves, então realiza-se para verificar o resultado obtido em aparelhos automáticos. Com essa prática pudemos superar algumas dificuldades que alguns componentes do grupo apresentavam; mesmo com receio, a aluna Keilah conseguiu realizar a punção venosa na aluna Thais em segurança e sem contratempos. Quanto a parte da diluição da amostra, não apresentamos dificuldades, porém, na contagem na câmara de Neubauer apresentamos certa confusão até compreendermos como contar as células, porém, após entendermos, conseguimos realizar com êxito o exercício proposto para a aula prática.

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Referências Bibliográficas Biomedicina

padrão,

Câmara

Neubauer .

de

Disponível

em:

. Acesso em: 03 de abril de 2018. Leles, R. N. Roteiro de Aulas práticas de Métodos Analíticos em Biomedicina . Goiânia, 2018. Significados,

Contagem

de

hemácias .

Disponível

em:

. Acesso em: 03 de abril de 2018. Splabor,

Tubos

de

coleta.

Disponível

. Acesso em: 03 de abril de 2018.

em:

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Anexos

Figura 1. Hemácias para contagem na câmara de Neubauer (Fonte própria)

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