Relatorio - Microscopia óptica PDF

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Relátório de aula prática....

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Microscopia óptica

Microscópio óptico binocular. (ampliação máx. 1000x)

Estruturas e funções 

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Oculares: Dois sistemas de lentes (em microscópios mais simples há apenas um). As oculares geralmente têm poder de aumento de 10x e é por meio delas que observamos a imagem ampliada. Tubo: Suporte das oculares. Também chamado de canhão. Braço: Também chamado de coluna, é fixo na base do microscópio e serve de suporte para as demais partes. Revólver: Peça giratória que comporta as objetivas. Para trocar de objetiva, sempre manuseie o revólver, nunca force as objetivas. Objetivas: Geralmente três ou quatro, são lentes de maior poder de ampliação. Platina: Também chamada de mesa, é o suporte onde será colocada a lâmina. A platina pode ser levantada ou baixada para regular o foco, utilizando-se os parafusos macro e micrométrico. Pinça: Alça que segura e fixa a lâmina sobre a platina para que não haja movimento da mesma durante a análise. Condensador: Concentra os raios luminosos que incidem sobre a lâmina. Diafragma: Controla tamanho e intensidade do cone de luz que é projetado sobre o objeto. Fonte de luz: Nos microscópios modernos é uma lâmpada, mas em microscópios mais antigos era um espelho que refletia a luz. Liga/desliga: Botão para ligar e desligar a lâmpada. Macrométrico: Parafuso que permite regular a altura da platina. Faz movimentos amplos para um ajuste grosso. Micrométrico: Parafuso que permite um ajuste fino do foco. Pé ou base: Trata-se do apoio e do ponto de fixação do microscópio. Charriot: Peça que permite movimentar a lâmina sobre a platina. Não aparece na figura pois geralmente localiza-se na lateral direita.

Funcionamento No microscópio óptico, a luz proveniente do objeto observado atravessa as lentes objetiva e ocular e chega ao olho do observador, onde se forma a imagem ampliada. O microscópio óptico possui objetivas de 4x (menor aumento), 10x (médio aumento), 40x (maior aumento) e 100x (imersão), se empregarmos, por exemplo, uma lente ocular que amplie 10x e uma lente objetiva que amplie cem vezes, o valor final da ampliação será de 1000x (o aumento da ocular multiplicado pelo aumento da objetiva).

Poder de resolução e limite de resolução A qualidade de um microscópio não depende apenas da ampliação, mas também do poder de resolução, que é a capacidade de distinguir pontos situados muito próximos (adjacentes) no objeto observado. Quanto maior essa capacidade, melhor a definição da imagem. O poder de resolução de um microscópio óptico tem limite. Se dois pontos estiverem a menos de 0,25 micrometro (1 um= 1 x 10 mm) um do outro, eles serão vistos como um único ponto. Essa distância é o limite de resolução. O poder de resolução é função do comprimento de onda de luz visível utilizada (400 a 700 nm) e da abertura numérica (uma medida de capacidade de concentrar luz).

Esquema do trajeto da luz gerada pela fonte até as lentes oculares.

O limite de resolução é obtido com o menor comprimento de onda da luz visível e com a objetiva de maior abertura numérica. Lentes de maior aumento possuem aberturas numéricas maiores. Quando as objetivas de 100x ou mais (de grande abertura numérica) são utilizadas, aplica-se uma gota de óleo de imersão de alta pureza entre a espécime e a objetiva. Quando o óleo é aplicado, os raios emergentes do espécime são coletados, aumentando assim a quantidade de luz captada pela lente, melhorando a visualização da amostra.

Cortes histológicos

Corte de Estômago - Fovéolas gástricas (F) Coloração: Hematoxilina e Eosina. Imersão (100x)

Fonte: ATLAS DIGITAL DE HISTOLOGIA BÁSICA - UNIVERSIDADE ESTADUAL DE LONDRINA CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS DEPARTAMENTO DE HISTOLOGIA....