Tinciones simples y diferenciales PDF

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Microbiología Docente: Virginia Roa Angulo Tinciones simples y diferenciales Objetivos logrados Tinción simple  

Se logró evidenciar estructura de hongos filamentosos, conidióforo fialides y conidias Identificación de levaduras

Tinción diferencial  

Logro evidenciar bacterias Gram negativas. Identificación de capsula bacteriana.

Resultados Tinción simple. conidióforos Fialides Conidias

Figura 1. Representación esquemática de hongo filamentoso penicillium. Tinción azul de lactofenol. 10X.

Figura 2. Representación esquemática de levadura Saccharomyces cerevisiae. Azul de Metileno. 10X.

Tinciones diferenciales

Figura 3. Representación esquemática de E colí. Tinción Gram. 100X.

Figura 4. Representación esquemática de capsula bacteriana

Figura 4. Representación esquemática de staphilococcus. Tinción Gram. 100X

Análisis Tinción entre la pared celular y el citoplasma de células fúngicas, al realizar una adecuada tinción con azul de lactofenos permite observar fácilmente las estructuras que el hongo presenta, en este caso se logró observa con gran precisión cada una de las partes del hongo filamentoso; conidióforos, fialides y conidias (Figura 1.) respectivamente, estas se logran evidenciar gracias a sus diferentes componentes, como el fenol destruye la flora acompañante e inactiva la célula, además, inactiva enzimas líticas de la células impidiendo que estas se rompan. Por otro lado, el ácido láctico ayuda a preservar las estructuras fúngicas (López et al, 2014.). Las levaduras al igual que la anterior, una adecuada tinción y la basicidad de la tinción (azul de metileno), y por afinidad por carga con componentes de la superficie celular, permite evidenciar las estructuras de levadura forma ovoide y circular unicelulares no filamentosas, en la figura 2. Se evidencias la célula de levadura separas, ninguna en proceso de fisión. Tinción Gram siendo una tinción diferencial, separando las bacterias en dos grupos: bacterias Gram positivas y Gram negativas, dicha diferenciación está basada en la composición de la pared celular. Se trabajó con E coli y streptococcus, en los resultados se demuestra en la figura 3. La Representación esquemática de E coli: ésta es una bacteria Gram negativa en forma de bacilo, altamente patógena, son bacterias que presentan una delgada capa de péptidoglucano unida a una segunda membrana plasmática exterior mediante lipoproteínas, estas bacterias toman una coloración rosada, en la figura 3. se evidencian bacilos tanto rosados como violetas, estos violetas son característicos de bacterias Gram positivos, infiriendo que hubo un error experimental en el procedimiento de la tinción, al momento de aplicar el alcohol acetona. Cuando se forma el complejo CV-I (Cristal violeta y yodo) las células se tiñen de violeta, al momento de aplicar el solvente orgánico (Alcohol- acetona) la porosidad de la célula aumenta, permitiendo que el complejo CV-I se separe de la célula perdiendo la coloración violeta (eliminación por extracción de grasas de las paredes celulares) y permitiendo la fijación de la safranina, con una coloración rojiza o rosada. (ESPC, 2017). Dicho lo anterior experimentalmente no se aplicó la suficiente cantidad de alcohol acetona o se contabilizo mal el tiempo impidiendo el lavado del complejo CV-I. En cuanto a las Gram positivas representada en la figura 4. Presenta una coloración violeta o azul. Cuando se complejo CV-I las celas se tiñen de violeta, al aplicar el alcohol acetona se deshidratan las paredes celulares y se cierran los poros, disminuyendo la permeabilidad

impidiendo que el complejo CV-I salga de la célula manteniendo la coloración violeta o azul. (FCN, 2007)

Conclusiones 



Para identificar estructura como la morfología de hongos filamentosos y levaduras se pueden implementar tinciones simples, pues todas las células absorben el mismo colorante bien sea por la carga o por sus componentes acido- base. Las tinciones de contraste permiten no solo evidenciar morfología celular de las bacterias, si no también poder diferenciar unas de otras clasificándolas en diferentes grupos dependiendo de la coloración

Bibliografía: López-Jácome, L. E., Hernández-Durán, M., Colín-Castro, C. A., Ortega-Peña, S., CerónGonzález, G., & Franco-Cendejas, R. (2014). Las tinciones básicas en el laboratorio de microbiología. Investig. en discapacidades, 3(1), 10-18. ESPC. Escuela Superior Politécnica de Chimborazo. (20017) Guía de prácticas de laboratorio de microbiología y parasitología. Facultad de salud pública de medicina. https://es.calameo.com/read/00516939156baad2157ec FCN.

(2017).

Microbiología

general

coloración

de

http://www.fcn.unp.edu.ar/sitio/microgeneral/wp-content/uploads/2017/02/03COLORACIONES.pdf

bacterias....